芜菁花青素合成过程中相关基因的筛选及表达研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-13页 |
| 1 绪论 | 第13-32页 |
| ·色素合成途径及相关基因 | 第14-22页 |
| ·类黄酮的结构 | 第14页 |
| ·花青素的生物合成途径 | 第14页 |
| ·花青素生物合成的结构基因所编码的酶 | 第14-19页 |
| ·色素生物合成的调节基因 | 第19-22页 |
| ·内在因素和外界环境对植物色素生物合成的影响 | 第22-23页 |
| ·内源激素的影响 | 第22页 |
| ·糖类物质的影响 | 第22页 |
| ·外界环境的影响 | 第22-23页 |
| ·光敏受体对花青素生物合成的影响 | 第23-26页 |
| ·光敏色素的影响 | 第24-25页 |
| ·蓝光和紫外光受体的影响 | 第25-26页 |
| ·微阵列在植物研究中的应用 | 第26-28页 |
| ·基因芯片的分类 | 第26-27页 |
| ·微阵列的应用 | 第27-28页 |
| ·研究情况及相关假设 | 第28-30页 |
| ·本项研究的目的和意义 | 第30-32页 |
| 2 cDNA文库的构建及阳性克隆的筛选 | 第32-42页 |
| ·试验材料 | 第32页 |
| ·试验试剂 | 第32-33页 |
| ·cDNA文库构建试剂盒 | 第32页 |
| ·筛选阳性克隆所需试剂 | 第32-33页 |
| ·试验方法 | 第33-38页 |
| ·总RNA的提取 | 第33页 |
| ·mRNA的纯化 | 第33-34页 |
| ·cDNA文库的构建 | 第34-37页 |
| ·cDNA文库中阳性克隆的筛选 | 第37-38页 |
| ·试验结果 | 第38-40页 |
| ·总RNA及mRNA的质量 | 第38-39页 |
| ·文库的滴度、重组率及质粒的提取结果 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| 本章小结 | 第41-42页 |
| 3 消减文库的构建及阳性克隆的筛选 | 第42-52页 |
| ·试验材料 | 第42页 |
| ·试验试剂 | 第42页 |
| ·消减文库构建试剂盒 | 第42页 |
| ·筛选阳性克隆所需试剂 | 第42页 |
| ·试验方法 | 第42-49页 |
| ·总RNA的提取及mRNA的纯化 | 第42页 |
| ·消减文库的构建 | 第42-47页 |
| ·消减文库中阳性克隆的筛选 | 第47-49页 |
| ·试验结果 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| 本章小结 | 第51-52页 |
| 4 cDNA文库和消减文库ESTs测序及分析 | 第52-73页 |
| ·试验试剂 | 第52页 |
| ·测序反应试剂盒及测序胶 | 第52页 |
| ·测序所需其他试剂 | 第52页 |
| ·试验方法 | 第52-53页 |
| ·cDNA文库和消减文库中ESTs序列的测定 | 第52-53页 |
| ·ESTs之间序列同源性的对比 | 第53页 |
| ·特异基因片段的功能聚类 | 第53页 |
| ·试验结果 | 第53-68页 |
| ·特异基因片段的筛选结果 | 第53-62页 |
| ·特异基因片段的功能聚类 | 第62-66页 |
| ·基因注释分类的比较 | 第66-68页 |
| ·讨论 | 第68-72页 |
| ·关于cDNA文库和消减文库中特异基因片段的筛选 | 第68-69页 |
| ·关于特异基因片段的功能聚类和基因注释分类 | 第69-72页 |
| 本章小结 | 第72-73页 |
| 5 cDNA微阵列的制备及芯片杂交 | 第73-86页 |
| ·试验试剂 | 第73页 |
| ·PCR反应和纯化试剂盒 | 第73页 |
| ·芯片杂交所需试剂 | 第73页 |
| ·试验方法 | 第73-76页 |
| ·特异基因片段的PCR扩增及纯化 | 第73-74页 |
| ·芯片杂交及检测 | 第74-76页 |
| ·试验结果 | 第76-83页 |
| ·特异基因片段的扩增和纯化结果 | 第76页 |
| ·芯片杂交结果 | 第76-83页 |
| ·讨论 | 第83-85页 |
| ·关于特异基因片段的扩增和纯化 | 第83-84页 |
| ·关于芯片杂交结果 | 第84-85页 |
| 本章小结 | 第85-86页 |
| 6 与花青素生物合成相关的基因表达分析 | 第86-105页 |
| ·试验试剂 | 第86页 |
| ·色素提取试剂 | 第86页 |
| ·Northren杂交试剂 | 第86页 |
| ·酶和其它生化试剂 | 第86页 |
| ·试验方法 | 第86-90页 |
| ·芜菁块根皮色素含量测定 | 第86-87页 |
| ·芜菁块根皮总RNA提取方法 | 第87页 |
| ·花青素合成相关基因的引物设计 | 第87页 |
| ·探针的合成 | 第87-89页 |
| ·Northern杂交 | 第89-90页 |
| ·试验结果 | 第90-102页 |
| ·芜菁块根皮花青素含量的测定 | 第90-96页 |
| ·Northern杂交结果 | 第96-102页 |
| ·讨论 | 第102-104页 |
| ·关于芜菁块根皮花青素含量测定的讨论 | 第102页 |
| ·关于Northern杂交结果的讨论 | 第102-104页 |
| 本章小结 | 第104-105页 |
| 结论 | 第105-107页 |
| 参考文献 | 第107-120页 |
| 附录 | 第120-133页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第133-134页 |
| 致谢 | 第134页 |
