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SARS冠状病毒复制酶蛋白nsp8和nsp9受体蛋白的研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-12页
1 引言第12-33页
   ·严重急性呼吸综合征的病原学第12-23页
     ·SARS 冠状病毒的形态学和培养特性第12页
     ·SARS 冠状病毒的稳定性和抵抗力第12-13页
     ·SARS 冠状病毒的起源和变异第13-14页
     ·SARS 冠状病毒分子生物学研究进展第14-23页
   ·SARS 流行病学第23-24页
   ·SARS 的临床诊断、病理改变与实验室检测第24-29页
     ·SARS 临床症状和免疫反应第24-26页
     ·病理症状第26-27页
     ·SARS 的诊断第27-29页
   ·SARS 的治疗第29-31页
     ·药物治疗第29-30页
     ·疫苗的开发和前景第30-31页
   ·本课题研究的目的和意义第31-33页
2 材料和方法第33-48页
   ·实验材料第33-34页
     ·病毒和细胞第33页
     ·质粒和菌株第33页
     ·其他主要试剂和材料第33页
     ·主要仪器设备第33-34页
   ·SARS 冠状病毒复制酶蛋白nsp8 受体蛋白的研究第34-41页
     ·nsp8 基因的克隆和表达第34-35页
     ·Pull-Down 实验钓取nsp8 的受体蛋白第35-36页
     ·受体蛋白ZNF324 的克隆和表达第36-37页
     ·蛋白体外作用Pull-down 验证试验第37-38页
     ·荧光抗体的制备第38-39页
     ·TRITC 标记 IgG-anti-ZNF324 的检测第39页
     ·稳定转染nsp8 细胞系的建立第39-40页
     ·激光共聚焦显微镜观察分子共存第40-41页
   ·SARS 冠状病毒复制酶蛋白nsp9 受体蛋白的研究第41-48页
     ·nsp9 基因的克隆和表达第41页
     ·Pull-Down 实验钓取nsp9 的受体蛋白第41-42页
     ·A549 细胞总RNA 的反转录产物合成第42页
     ·受体蛋白TA-KRP 的克隆和表达第42-44页
     ·受体蛋白BAZ2(ZNF215)的克隆和表达第44-45页
     ·蛋白体外作用Pull-down 验证试验第45页
     ·荧光抗体的制备第45-46页
     ·稳定转染nsp9 细胞系的建立第46-47页
     ·激光共聚焦显微镜观察分子共存第47-48页
3 实验结果第48-72页
   ·SARS 冠状病毒复制酶蛋白nsp8 受体蛋白的研究结果第48-56页
     ·nsp8 基因的克隆第48-49页
     ·nsp8 表达和纯化第49页
     ·Western-blotting 鉴定免疫后血清效价第49-50页
     ·Pull-Down 实验钓取nsp8 的受体蛋白分析结果第50-52页
     ·ZNF324 部分片段基因的克隆第52-53页
     ·ZNF324 部分片段的表达结果第53页
     ·蛋白体外作用Pull-down 验证试验结果第53页
     ·TRITC 标记 IgG-anti-ZNF324 的检测结果第53-54页
     ·nsp8 真核表达载体的构建第54页
     ·nsp8 在转染细胞系中表达的结果第54-56页
     ·激光共聚焦显微镜观察分子共存的结果第56页
   ·SARS 冠状病毒复制酶蛋白nsp9 受体蛋白的研究结果第56-72页
     ·nsp9 基因的克隆第56-57页
     ·nsp9 的表达和纯化第57-58页
     ·Western-blotting 鉴定免疫后血清效价第58页
     ·Pull-Down 实验钓取nsp9 的受体蛋白分析结果第58-60页
     ·TA-KRP 蛋白的基因克隆和表达第60-63页
     ·BAZ2 蛋白的基因克隆和表达第63-67页
     ·蛋白体外作用Pull-down 验证试验结果第67-68页
     ·TRITC 标记 IgG-anti-TA-KRP 和IgG-anti-BAZ2 的检测结果第68页
     ·nsp9 真核表达载体的构建第68-69页
     ·nsp9 在转染细胞系中表达的结果第69-70页
     ·激光共聚焦显微镜观察分子共存的结果第70-72页
4 讨论第72-77页
   ·蛋白质测序和肽质量指纹图谱分析的可行性第72页
   ·锌指蛋白的功能第72-75页
     ·锌指蛋白的结构第73-74页
     ·锌指蛋白与核酸、蛋白质之间的作用第74-75页
     ·锌指蛋白调节基因的转录第75页
   ·nsp8 和其潜在受体ZNF324第75-76页
   ·nsp9 与其潜在受体TA-KRP 和BAZ2第76-77页
5 结论第77-78页
参考文献第78-89页
附录第89-92页
攻读博士学位期间发表的学术论文第92-93页
致谢第93页

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