摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-36页 |
1 褐飞虱的生物学特性及其对水稻的危害 | 第13-15页 |
·褐飞虱的生物学特性 | 第13页 |
·褐飞虱的取食特点 | 第13-14页 |
·褐飞虱对水稻的危害 | 第14-15页 |
2 植物对昆虫的防御机制 | 第15-25页 |
·直接防御作用 | 第16-22页 |
·间接防御作用 | 第22-24页 |
·耐受性 | 第24-25页 |
3 昆虫对宿主植物的适应及其防卫策略 | 第25-28页 |
·细胞色素P450单加氧酶在昆虫取食植物中的重要作用 | 第26-27页 |
·羧酸酯酶在昆虫取食植物中的重要作用 | 第27-28页 |
·谷胱苷肽转移酶在昆虫取食植物中的重要作用 | 第28页 |
4 基于mRNA水平上的基因表达研究方法 | 第28-35页 |
·mRNA差异显示技术 | 第29-30页 |
·抑制消减杂交 | 第30-31页 |
·基因表达系列分析 | 第31-32页 |
·cDNA-AFLP技术 | 第32-34页 |
·cDNA微阵列技术 | 第34-35页 |
5 本研究的目的和意义 | 第35-36页 |
第二章 从取食三种不同抗性水稻的褐飞虱中克隆差异表达的基因 | 第36-58页 |
·引言 | 第36-37页 |
·材料和方法 | 第37-46页 |
·材料 | 第37页 |
·褐飞虱总RNA的提取 | 第37-38页 |
·用紫外分光光度计测定RNA浓度及纯度 | 第38页 |
·变性琼脂糖胶电泳检测总RNA的质量 | 第38页 |
·mRNA的提取 | 第38-39页 |
·cDNA-AFLP实验 | 第39-43页 |
·利用点杂交验证差异表达的基因 | 第43-45页 |
·Northern杂交 | 第45-46页 |
·结果与分析 | 第46-55页 |
·RNA的提取及电泳 | 第46页 |
·mRNA的提取和cDNA的合成 | 第46-47页 |
·cDNA-AFLP中的预扩增和选择扩增 | 第47页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染展示 | 第47-48页 |
·差异DNA条带的克隆及测序 | 第48-49页 |
·测序结果分析及点杂交验证 | 第49-54页 |
·Northern杂交验证 | 第54-55页 |
·讨论 | 第55-58页 |
第三章 褐飞虱解毒及毒物耐受性相关基因cDNA片段的克隆及其表达谱分析 | 第58-71页 |
·引言 | 第58-59页 |
·材料和方法 | 第59-64页 |
·材料 | 第59页 |
·褐飞虱总RNA的提取及检测 | 第59页 |
·简并性引物设计及合成 | 第59-60页 |
·解毒和耐受性相关基因cDNA片段的扩增 | 第60-63页 |
·cDNA片段的回收、连接转化和测序 | 第63页 |
·Northern杂交和RT-PCR验证 | 第63-64页 |
·结果与分析 | 第64-68页 |
·褐飞虱中解毒和耐受性相关基因的cDNA片段的克隆 | 第64-65页 |
·测序结果及分析 | 第65-67页 |
·Northern杂交和RT-PCR检测基因的表达 | 第67-68页 |
·讨论 | 第68-71页 |
第四章 解毒和毒物耐受性相关基因全长cDNA的克隆和序列分析 | 第71-107页 |
·引言 | 第71-72页 |
·材料和方法 | 第72-77页 |
·RACE引物的设计及合成 | 第72-73页 |
·褐飞虱总RNA的提取及检测 | 第73页 |
·SMART RACE反应 | 第73-74页 |
·快速扩增cDNA末端(RACE) | 第74-75页 |
·RACE DNA片段的连接转化及测序 | 第75页 |
·cDNA全长序列分析 | 第75-76页 |
·Sorthern杂交检测ACE基因的拷贝数 | 第76-77页 |
·结果与分析 | 第77-104页 |
·乙酰胆碱酯酶全长cDNA的克隆及序列分析 | 第77-84页 |
·细胞色素P450 CYP6AX1和CYP6AY1全长cDNA的克隆及序列分析 | 第84-89页 |
·nemo激酶全长cDNA的克隆及序列分析 | 第89-95页 |
·NQO全长cDNA的克隆及序列分析 | 第95-100页 |
·胰蛋白酶全长cDNA的克隆及序列分析 | 第100-104页 |
·讨论 | 第104-107页 |
第五章 取食不同抗性水稻的褐飞虱中肠细胞及组织结构变化 | 第107-115页 |
·引言 | 第107-108页 |
·材料和方法 | 第108-109页 |
·材料和试剂盒 | 第108页 |
·石蜡切片 | 第108页 |
·TUNEL反应及检测 | 第108-109页 |
·DAPI染色反应及观察 | 第109页 |
·结果与分析 | 第109-112页 |
·TUNEL检测 | 第109-111页 |
·DAPI检测 | 第111-112页 |
·讨论 | 第112-115页 |
总结与展望 | 第115-118页 |
参考文献 | 第118-134页 |
附录Ⅰ 常用试剂配方 | 第134-136页 |
附录Ⅱ 在读期间发表及待发表的论文 | 第136-137页 |
致谢 | 第137页 |