| 引言 | 第1-9页 |
| 第一章 hβarrestin Ⅱ overexpression转基因小鼠的制备和纯合子的建立 | 第9-24页 |
| 一、材料与方法 | 第9-18页 |
| (一) 材料 | 第9-10页 |
| 1. 质粒 | 第9页 |
| 2. 工具酶 | 第9-10页 |
| 3. 主要生化试剂 | 第10页 |
| 4. Sourthern杂交试剂 | 第10页 |
| 5. 其他分子生物学仪器 | 第10页 |
| (二) 方法 | 第10-18页 |
| 1. Arr2O小鼠载体的构建和显微注射用 DNA的制备 | 第10页 |
| 2. 显微注射 | 第10-11页 |
| 3. 小鼠基因组 DNA的提取 | 第11-12页 |
| 4. 转基因阳性鼠鉴定 | 第12-15页 |
| 4.1 PCR筛选 | 第12页 |
| 4.2 Southern杂交 | 第12-15页 |
| 5. Arr2O小鼠的蛋白表达鉴定 | 第15-17页 |
| 5.1 RT-PCR鉴定 | 第15-16页 |
| 5.2 免疫组化鉴定 | 第16-17页 |
| 6. 用实时荧光定量 PCR的方法鉴定纯和转基因鼠 | 第17-18页 |
| 二、结果与讨论 | 第18-24页 |
| (一) 结果 | 第18-22页 |
| 1. 显微注射用 DNA的制备 | 第18页 |
| 2. 显微注射与转基因鼠建立 | 第18-19页 |
| 3. 转基因鼠的 PCR鉴定 | 第19页 |
| 4. 转基因鼠的 Southern杂交鉴定 | 第19-20页 |
| 5. RT-PCR鉴定基因转录情况 | 第20-21页 |
| 6. 免疫组化分析转基因蛋白表达的情况 | 第21页 |
| 7. Realtime PCR鉴定纯合子 | 第21-22页 |
| (二) 讨论 | 第22-24页 |
| 第二章 转基因小鼠的功能研究 | 第24-31页 |
| 第一节 阿片成瘾作用探讨-tolerance(tail flick) | 第24-27页 |
| 一、材料与方法 | 第24页 |
| (一) 材料 | 第24页 |
| 1. 实验动物和分组 | 第24页 |
| 2. 仪器 | 第24页 |
| (二) 方法 | 第24页 |
| 1. 急性吗啡甩尾实验 | 第24页 |
| 2. 长时吗啡甩尾实验 | 第24页 |
| 二、结果与讨论 | 第24-27页 |
| (一) 结果 | 第24-26页 |
| 1. 急性吗啡耐受 | 第24-25页 |
| 2. 长时吗啡耐受 | 第25-26页 |
| (二) 讨论 | 第26-27页 |
| 第二节 转基因小鼠的自主活动和空间记忆研究 | 第27-31页 |
| 一、材料与方法 | 第27-28页 |
| (一) 材料 | 第27页 |
| 1. 实验动物和分组 | 第27页 |
| 2. 仪器 | 第27页 |
| (二) 方法 | 第27-28页 |
| 1. 自主活动测定 | 第27页 |
| 2. 空间记忆的研究--Morris水迷宫 | 第27-28页 |
| 二、结果与讨论 | 第28-31页 |
| (一) 结果 | 第28-30页 |
| 1. 自主活动 | 第28-29页 |
| 2. Morris水迷宫 | 第29-30页 |
| (二) 讨论 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-32页 |
| 文献综述 | 第32-37页 |
| 参考文献 | 第37-38页 |
| 在读期间发表的文章 | 第38-39页 |
| 致谢 | 第39页 |