转rhG-CSF基因鱼腥藻的构建及其特性研究
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-26页 |
| ·蓝藻基因工程 | 第10-18页 |
| ·蓝藻及其特点 | 第10-11页 |
| ·蓝藻基因工程技术 | 第11-15页 |
| ·外源基因在蓝藻中的表达 | 第15-18页 |
| ·粒细胞集落刺激因子的研究进展 | 第18-25页 |
| ·G-CSF 的基本性质及研究进展 | 第19-22页 |
| ·hG-CSF 药物制备 | 第22-25页 |
| ·研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 第二章 材料和方法 | 第26-41页 |
| ·实验材料和主要试剂 | 第26-28页 |
| ·主要溶液的配制 | 第28-31页 |
| ·感受态细菌的制备 | 第31-32页 |
| ·质粒的提取和纯化 | 第32-33页 |
| ·DNA 浓度的测定 | 第33页 |
| ·PCR 扩增目的片段 | 第33-34页 |
| ·酶切反应体系的建立 | 第34-35页 |
| ·连接反应体系的建立 | 第35页 |
| ·穿梭表达载体的构建、筛选和鉴定 | 第35-37页 |
| ·蓝藻的培养、纯化及保种 | 第37页 |
| ·三亲接合转移方法转化蓝藻 | 第37-38页 |
| ·蓝藻质粒DNA 的检测 | 第38-39页 |
| ·转基因蓝藻总蛋白含量测定 | 第39页 |
| ·G-CSF 蛋白的含量测定 | 第39-40页 |
| ·转基因藻的筛选和纯化 | 第40页 |
| ·转基因藻的形态观察 | 第40页 |
| ·转基因藻的生理活性检测 | 第40页 |
| ·放氧光合活性的测定 | 第40-41页 |
| 第三章 穿梭表达载体的构建及转化鱼腥藻 | 第41-51页 |
| ·中间载体的鉴定 | 第41-42页 |
| ·G-CSF 基因序列测定 | 第42-43页 |
| ·G-CSF 基因表达产物的序列 | 第43-45页 |
| ·穿梭表达载体的鉴定和正反连的筛选 | 第45-46页 |
| ·载体pRL-G-CSF 对鱼腥藻的转化 | 第46-47页 |
| ·转基因鱼腥藻的筛选 | 第47页 |
| ·转基因鱼腥藻中目的基因的PCR 检测 | 第47-48页 |
| ·转基因鱼腥藻质粒酶切检测 | 第48-49页 |
| ·转基因鱼腥藻蛋白检测 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 转基因藻的筛选及其生理学特性研究 | 第51-56页 |
| ·转基因藻的筛选和纯化 | 第51页 |
| ·转基因藻的形态观察 | 第51-52页 |
| ·生长曲线及叶绿素含量 | 第52-53页 |
| ·光合放氧曲线 | 第53-55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |
