| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-13页 |
| 材料和方法 | 第13-66页 |
| 1.实验材料 | 第13-25页 |
| 2.实验方法 | 第25-66页 |
| ·载体的构建 | 第25-30页 |
| ·重组蛋白的表达和纯化 | 第30-34页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第34-36页 |
| ·Western blot分析 | 第36-38页 |
| ·免疫组织化学方法 | 第38-40页 |
| ·酵母双杂交 | 第40-51页 |
| ·细胞复苏、传代和冻存 | 第51-52页 |
| ·真核细胞的转染 | 第52-54页 |
| ·细胞免疫荧光实验 | 第54-56页 |
| ·GST Pull-Down实验 | 第56页 |
| ·免疫共沉淀实验 | 第56-57页 |
| ·丙酮酸激酶表达及活性的测定 | 第57-59页 |
| ·人泛酸激酶(PANK4)基因的获得 | 第59-62页 |
| ·2.15 PANK4的蛋白质组学研究 | 第62-66页 |
| 实验结果 | 第66-119页 |
| 1.Fang1基因的生物信息学分析 | 第66-79页 |
| 2.Rat PANK4蛋白质的表达和纯化 | 第79-84页 |
| 3.抗Rat PANK4蛋白质的多克隆抗体的制备 | 第84-85页 |
| 4.rat PANK4在组织和细胞中的定位 | 第85-89页 |
| 5.酵母双杂交文库的构建 | 第89-92页 |
| 6.构建DNA-BD融合蛋白 | 第92-93页 |
| 7.获得与PANK4相互作用的蛋白质分子 | 第93-96页 |
| 8.酵母双杂交中阳性克隆全长cDNA片段的克隆 | 第96-97页 |
| 9.Pkm2与PANK4蛋白体内结合的验证 | 第97-100页 |
| 10.PANK4蛋白与Pkm2蛋白体外结合的验证(GST pull-down) | 第100-101页 |
| 11.PANK4的两个保守结构域与Pkm2体内结合的验证 | 第101-105页 |
| 12.PANK4对Pkm2的可能的影响 | 第105页 |
| 13.人PANK4基因SNP位点的引入 | 第105-108页 |
| 14.PANK4蛋白中的KOG2201结构域的功能研究 | 第108-111页 |
| 15.PANK4蛋白质组的研究 | 第111-119页 |
| 讨论 | 第119-130页 |
| 小结 | 第130-131页 |
| 参考文献 | 第131-138页 |
| 附录 | 第138-139页 |
| 文献综述 | 第139-160页 |
| 致谢 | 第160页 |
