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野油菜黄单胞菌中感受植物信号基因的鉴定

第一章 前言第1-20页
   ·野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)概况第7页
   ·植物病原细菌与寄主的相互作用第7-14页
     ·植物病原细菌的致病因子第8-11页
     ·植物病原细菌的致病相关基因第11-12页
     ·植物病原细菌致病生化因子的分泌机制第12页
     ·植物病原细菌与致病有关的调控系统第12-14页
   ·细菌在感受植物信号方面的研究进展第14-19页
     ·革兰氏阴性植物病原细菌的hrp基因及其表达调控第15-16页
     ·Ralstonia solanacearum中感受植物信号的基因第16-19页
   ·本工作的目的与内容第19-20页
第二章 材料与方法第20-34页
   ·材料第20-25页
     ·本实验所用的菌株和质粒见表第20-21页
     ·培养基及生长条件第21-23页
     ·抗生素及其贮存、使用浓度第23页
     ·溶液与缓冲液第23-25页
   ·方法第25-34页
     ·三亲本接合第25-26页
     ·常规PCR反应第26-28页
     ·琼脂糖凝胶电泳第28页
     ·PCR产物的回收与纯化第28页
     ·质粒的提取第28-29页
     ·限制性内切酶酶切第29页
     ·DNA连接第29页
     ·电脉冲感受态细胞的制备第29-30页
     ·转化第30页
     ·总DNA的提取第30页
     ·胞外多糖的检测第30-31页
     ·胞外酶的检测第31页
     ·植株的致病性试验第31页
     ·GUS组织化学染色检测第31-32页
     ·将质粒pK18mob改造成pT18mob第32页
     ·Xcc 8004基因组上目标基因的整合突变体的构建第32-34页
第三章 结果与分析第34-59页
   ·野油菜黄单胞菌中存在与茄青枯病罗尔斯通氏菌感受植物信号基因同源的基因第34-41页
     ·XC3665、XC4121所编码的蛋白的氨基酸序列与prhA的氨基酸序列相似第34-37页
     ·XC0755、XC4024所编码的蛋白的氨基酸序列与prhJ的氨基酸序列相似第37-39页
     ·XC0519所编码的蛋白的氨基酸序列与prhI的氨基酸序列相似第39页
     ·XC0520所编码的蛋白的氨基酸序列与prhR的氨基酸序列相似第39-41页
   ·hrp基因GUS报告系统的构建第41-45页
     ·hrp基因Tn5gusA5插入突变体的构建第41-42页
     ·将自杀质粒pK18mob(Km~r)改造成pT18mob(Tc~r)第42页
     ·双突变体的构建第42-45页
   ·双突变体的GUS报告系统表达检测第45-48页
     ·突变体的平板GUS检测第45-46页
     ·突变体的叶内GUS染色第46-47页
     ·突变体的平板检测第47-48页
   ·双突变体的致病性检测第48-49页
   ·XC0519与致病的关系第49-50页
   ·XC0519 Tn5gusA5插入突变体(214H01)的致病性检测第50-51页
   ·214H01的互补试验第51-53页
     ·互补菌株的构建第51-52页
     ·互补菌株的致病性实验第52-53页
   ·定点突变体的构建第53-54页
   ·定点突变体的致病性检测第54-56页
   ·突变体的生长测定第56-57页
     ·突变体在完全培养基中的生长测定第56页
     ·突变体在基本培养基中的生长测定第56-57页
   ·XC0519和XC0520的突变不影响Xcc的胞外多糖和胞外酶第57-59页
第四章 讨论第59-61页
   ·XC0519和XC0520与hrp基因表达调控的关系第59-60页
   ·XC0519和XC0520与致病性的关系第60-61页
参考文献第61-70页
致谢第70页

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