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农杆菌介导ASACC基因转化苹果的研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-10页
缩略语第10-11页
引言第11-12页
第一章 文献综述第12-24页
 1 苹果遗传转化研究进展第12-18页
   ·苹果离体再生系统的影响因素第13-15页
     ·基因型第13页
     ·外植体生理状态第13-14页
     ·培养基及激素第14页
     ·前期暗处理第14页
     ·其它第14-15页
   ·苹果遗传转化系统的影响因素第15-17页
     ·农杆菌菌系的致毒性第15页
     ·农杆菌vir基因的活化第15-16页
     ·浸菌时间及共培养时间第16页
     ·抗生素及选择压第16页
     ·延迟选择第16-17页
   ·受体系统对苹果遗传转化的影响第17-18页
 2 反义RNA技术研究进展第18-19页
   ·反义RNA技术的原理及作用机制第18-19页
   ·反义RNA技术在植物上的应用第19页
 3 乙烯在果实成熟中调控研究第19-24页
   ·乙烯在果实成熟中的生理作用第19-20页
   ·乙烯调控果实成熟研究进展第20-22页
     ·ACC合成酶第20-21页
     ·ACC氧化酶第21-22页
     ·ACC脱氨基酶第22页
   ·问题及展望第22-24页
第二章 新红星苹果再生体系的建立第24-40页
 1 材料与方法第24-28页
   ·材料第24-25页
     ·植物材料第24页
     ·培养基第24-25页
   ·方法第25-28页
     ·无菌苗的获得第25-26页
       ·外植体消毒第25-26页
       ·接种及防褐化措施第26页
     ·试管苗的快速繁殖第26页
       ·基础培养基的筛选第26页
       ·激素浓度配比筛选实验设计第26页
       ·生根培养条件第26页
     ·再生体系的建立第26-28页
       ·植物激素种类及浓度对叶片再生的影响第27页
       ·基因型对叶片再生的影响第27页
       ·不同外植体类型对再生的影响第27-28页
       ·不同暗培养时间对再生的影响第28页
       ·叶片不同放置方式对再生的影响第28页
       ·外植体叶片节位对再生的影响第28页
 2 结果与分析第28-37页
   ·不同褐化抑制剂去褐化效果第28-29页
   ·激素浓度组合对新红星快繁的影响第29-30页
   ·基础培养基对新红星组培苗的影响第30-31页
   ·生根培养条件第31-32页
   ·植物激素种类及浓度对叶片再生的影响第32-34页
   ·基因型对外植体叶片再生的影响第34-35页
   ·不同外植体类型对再生的影响第35-36页
   ·不同暗培养时间对再生的影响第36页
   ·叶片不同放置方式对再生的影响第36-37页
   ·外植体叶片节位对再生的影响第37页
 3 讨论第37-40页
   ·影响新红星苹果无菌繁殖系建立的因素第37-38页
   ·影响苹果组培苗叶片再生的因素第38-40页
第三章 新红星苹果遗传转化第40-48页
 1 材料与方法第40-42页
   ·材料第40-41页
     ·植物材料第40页
     ·菌株、质粒及基因性质第40-41页
     ·菌株的保存第41页
   ·方法第41-42页
     ·卡那霉素选择压的确定第41页
     ·农杆菌侵染时间的确定第41-42页
     ·共培养时间的对叶片转化再生的影响第42页
     ·抑菌抗生素对嘎拉叶片转化再生的影响第42页
     ·延时筛选对嘎拉叶片转化再生的影响第42页
 2 结果与分析第42-46页
   ·Km选择压的确定第42-43页
   ·农杆菌侵染时间的确定第43页
   ·共培养时间对转化再生的影响第43-44页
   ·抑菌抗生素对新红星叶片转化再生的影响第44-45页
   ·延时筛选对新红星叶片转化再生的影响第45-46页
 3 讨论第46-48页
   ·选择压对遗传转化的影响第46-47页
   ·侵染时间与抑菌抗生素对遗传转化的影响第47-48页
第四章 转基因植物的获得及检测第48-60页
 1 材料与方法第48-54页
   ·材料第48-49页
     ·植物材料第48页
     ·菌株的性质第48-49页
     ·培养基与培养液第49页
     ·主要试剂及试剂盒第49页
     ·主要设备第49页
   ·方法第49-54页
     ·叶片预培养第49页
     ·农杆菌的活化第49-50页
     ·侵染第50页
     ·黑暗共培养第50页
     ·延时筛选第50页
     ·选择培养第50页
     ·抗性植株的获得第50页
     ·检测第50-54页
       ·GUS基因组织化学染色第50-51页
       ·PCR扩增检测第51-53页
       ·PCR-Southern杂交检测第53-54页
 2 结果与分析第54-59页
   ·新红星苹果转ASACC12融合基因植株的获得及检测第54-57页
     ·新红星苹果转ASACC12融合基因植株的获得第54页
     ·GUS基因组织化学法检测第54页
     ·PCR检测第54-56页
     ·PCR-Southern检测第56-57页
   ·嘎拉苹果转ASACC12融合基因植株的获得及检测第57-59页
     ·嘎拉苹果转ASACC12融合基因植株的获得第57-58页
     ·GUS基因组织化学法检测第58-59页
 3 讨论第59-60页
图版第60-65页
参考文献第65-74页
致谢第74页

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