| 第一章 引言 | 第1-60页 |
| ·杆状病毒及其侵染机制 | 第20-32页 |
| ·杆状病毒的一般特 | 第20-21页 |
| ·杆状病毒分类与命名 | 第21-22页 |
| ·杆状病毒的感染历程 | 第22-27页 |
| ·杆状病毒DNA在宿主细胞中的复制 | 第27-30页 |
| ·核衣壳的形态发生与病毒装配 | 第30-32页 |
| ·已经鉴定的杆状病毒基因及其功能 | 第32-50页 |
| ·病毒结构蛋白基因 | 第33-37页 |
| ·病毒调控蛋白基因 | 第37-50页 |
| ·分离新基因的最新技术 | 第50-57页 |
| ·基因芯片技术 | 第51页 |
| ·计算机技术 | 第51-53页 |
| ·酵母双杂交技术 | 第53-55页 |
| ·噬菌体展示技术 | 第55-57页 |
| ·本论文研究背景及目的 | 第57-60页 |
| ·研究背景 | 第57-58页 |
| ·研究目的 | 第58-60页 |
| 第二章 棉铃虫细胞cDNA文库的构建 | 第60-81页 |
| ·引言 | 第60-61页 |
| ·材料与方法 | 第61-76页 |
| ·试剂、质粒、菌株及细胞 | 第61-63页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第63页 |
| ·从细胞总RNA中分离mRNA | 第63-65页 |
| ·cDNA的合成 | 第65-66页 |
| ·cDNA第一链的检测 | 第66-67页 |
| ·cDNA的末端处理 | 第67页 |
| ·cDNA片段的分捡 | 第67-70页 |
| ·质粒的提取和制备 | 第70-74页 |
| ·DNA连接反应 | 第74页 |
| ·cDNA文库的构建(质粒的转化) | 第74-76页 |
| ·结果 | 第76-78页 |
| ·细胞总RNA的完整性 | 第76页 |
| ·细胞总RNA的含量、纯度及mRNA的浓度 | 第76-77页 |
| ·细胞cDNA第一链的长度分布 | 第77页 |
| ·细胞cDNA文库插入片段的大小及文库滴度的测定 | 第77-78页 |
| ·讨论 | 第78-81页 |
| 第三章 HaNPV衣壳蛋白与棉铃虫肌动蛋白间的相互作用 | 第81-98页 |
| ·引言 | 第81-83页 |
| ·材料与方法 | 第83-91页 |
| ·试剂与溶液 | 第83-84页 |
| ·载体、cDNA文库 | 第84页 |
| ·cDNA文库的滴定和扩增 | 第84-85页 |
| ·酵母菌的转化-LiAC转化法 | 第85-86页 |
| ·β-半乳糖苷酶活性滤膜实验 | 第86-87页 |
| ·阳性文库质粒DNA的提取及分析 | 第87页 |
| ·重组质粒的构建 | 第87-91页 |
| ·阳性酵母菌质粒DNA的提取和cDNA插入片段分析 | 第91页 |
| ·序列测定及计算机分析 | 第91页 |
| ·结果 | 第91-96页 |
| ·vp39基因的克隆及融合表达载体的同框序列分析 | 第91-93页 |
| ·VP39相互作用蛋白基因的筛选、测序及分析 | 第93-95页 |
| ·VP39与ACTIN相互作用的鉴定 | 第95-96页 |
| ·讨论 | 第96-98页 |
| 第四章 HaNPV VP39与Actin的体外相互作用及瞬时表达的VP39对Actin骨架的影响 | 第98-119页 |
| ·引言 | 第99页 |
| ·材料和方法 | 第99-109页 |
| ·细胞、质粒及试剂 | 第99-101页 |
| ·质粒的提取与限制性酶消化反应 | 第101页 |
| ·DNA片段的回收 | 第101-102页 |
| ·DNA连接反应 | 第102-103页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第103-104页 |
| ·重组质粒构建 | 第104-108页 |
| ·昆虫细胞的盖玻片培养 | 第108页 |
| ·质粒DNA对细胞的转染 | 第108页 |
| ·荧光显微镜 | 第108-109页 |
| ·Western blot | 第109页 |
| ·Actin蛋白与VP39蛋白体外结合的等温量热仪分析 | 第109页 |
| ·结果 | 第109-117页 |
| ·VP39蛋白与Actin蛋白的体外结合 | 第109-110页 |
| ·VP39蛋白与Actin蛋白的体外结合常数 | 第110-113页 |
| ·重组质粒pEGFP39及pEGFP的鉴定 | 第113-114页 |
| ·HaNPV VP39的瞬时表达与细胞骨架的变化 | 第114-117页 |
| ·讨论 | 第117-119页 |
| 第五章 Actin缆绳结构对HaNPV增殖与子代病毒粒子装配的影响 | 第119-134页 |
| ·前言 | 第119-120页 |
| ·材料和方法 | 第120-127页 |
| ·试剂、质粒和菌株 | 第120页 |
| ·病毒粒子(budded virus，BV)、多角体的分离 | 第120-122页 |
| ·细胞松弛素D处理 | 第122页 |
| ·空斑计数 | 第122页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第122-123页 |
| ·Western blot | 第123-124页 |
| ·病毒DNA的提取 | 第124-125页 |
| ·dot blot | 第125-127页 |
| ·透射电镜 | 第127页 |
| ·结果 | 第127-132页 |
| ·HaNPV感染Hz-AM1细胞后的病理变化 | 第127-129页 |
| ·Actin缆绳结构对HaNPV增殖的抑制 | 第129页 |
| ·细胞松弛素D不影响肌动蛋白的合成 | 第129-130页 |
| ·Actin缆绳结构不影响病毒DNA的合成 | 第130-131页 |
| ·Actin缆绳结构对子代病毒装配的影响 | 第131-132页 |
| ·讨论 | 第132-134页 |
| 第六章 HaNPV衣壳向细胞核内运输的分子机制 | 第134-157页 |
| ·前言 | 第134-136页 |
| ·材料和方法 | 第136-141页 |
| ·细胞、病毒和试剂 | 第136页 |
| ·Western blot | 第136-137页 |
| ·HaNPV VP39蛋白的原核表达和纯化 | 第137-138页 |
| ·抗体的制备及检测 | 第138-139页 |
| ·透射电镜观察 | 第139-140页 |
| ·病毒复制的流式细胞仪检测 | 第140页 |
| ·激光共聚焦显微镜 | 第140-141页 |
| ·结果 | 第141-154页 |
| ·HaNPV VP39蛋白的原核表达及纯化 | 第141-142页 |
| ·HaNPV VP39蛋白抗体效价及其特异性的的测定 | 第142-143页 |
| ·HaNPV衣壳的运输与微管和微丝的关系 | 第143-146页 |
| ·微管和微丝对HaNPV核衣壳运输的影响 | 第146-150页 |
| ·HaNPV VP39蛋白是衣壳向胞核运输的关键分子 | 第150-154页 |
| ·讨论 | 第154-157页 |
| 研究总结 | 第157-158页 |
| 参考文献 | 第158-176页 |
| 博士期间所发表和待发表的论文 | 第176-177页 |
| 致谢 | 第177页 |
