摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-18页 |
1 核盘菌研究进展 | 第8-10页 |
·核盘菌的寄主范围 | 第8页 |
·核盘菌的生物学特性 | 第8页 |
·核盘菌的致病作用及其寄主的抗性 | 第8-9页 |
·作物菌核病的防治 | 第9-10页 |
2 真菌病毒或dsRNA及其介导的植物病原真菌弱毒现象的研究进展 | 第10-16页 |
·真菌病毒或dsRNA | 第10-12页 |
·植物病原真菌的弱毒现象及其与真菌病毒或dsRNA的关系 | 第12-14页 |
·真菌病毒或dsRNA与寄主的互作 | 第14-15页 |
·弱毒株的生防潜能 | 第15-16页 |
3 核盘菌弱毒株Ep-1PN的研究进展 | 第16-17页 |
4 研究目的及意义 | 第17-18页 |
第二章 核盘菌Ep-1PN菌株病毒基因组cDNA克隆及序列分析 | 第18-43页 |
1 材料及方法 | 第18-26页 |
·材料 | 第18-19页 |
·核盘菌Ep-1PN菌株及其培养基 | 第18页 |
·细菌菌株及培养基 | 第18页 |
·载体、抗性标记、引物及分子标记 | 第18-19页 |
·缓冲液 | 第19页 |
·酶及其它试剂和试剂盒 | 第19页 |
·方法 | 第19-26页 |
·菌株培养 | 第19-20页 |
·dsRNA的粗提取 | 第20页 |
·dsRNA的纯化 | 第20-21页 |
·用随机引物或特定引物对dsRNA序列进行cDNA克隆 | 第21页 |
·cDNA克隆的Northern杂交鉴定 | 第21-22页 |
·用特异引物对dsRNA进一步作cDNA克隆 | 第22-23页 |
·用特异引物对对dsRNA序列进行RT-PCR克隆 | 第23页 |
·dsRNA近末端序列的克隆 | 第23页 |
·目的片段的回收及纯化 | 第23-24页 |
·PCR产物的A-Tailing | 第24页 |
·PCR产物与克隆载体的连接 | 第24页 |
·利用大肠杆菌感受态细胞转化连接产物 | 第24页 |
·重组质粒DNA的提取及鉴定 | 第24-25页 |
·亚克隆 | 第25页 |
·克隆的测序 | 第25页 |
·dsRNA基因组序列的拼接和分析 | 第25-26页 |
2 结果与分析 | 第26-41页 |
·核盘菌Ep-1PN dsRNA及其与弱毒性的关系 | 第26页 |
·重要dsRNA 6.4kb片段的cDNA克隆 | 第26-28页 |
·SS15的RT-PCR延伸 | 第28页 |
·SS15的cDNA克隆延伸 | 第28-29页 |
·Northern杂交鉴定 | 第29-30页 |
·dsRNA 6.4kb片段5'端和3'端的克隆 | 第30-31页 |
·cDNA克隆间的拼接 | 第31-36页 |
·推定的蛋白质功能分析 | 第36-37页 |
·SsHV编码的Helicase及RdRp同源性比较 | 第37-41页 |
3 结论与讨论 | 第41-43页 |
·结论 | 第41页 |
·讨论 | 第41-43页 |
第三章 核盘菌Ep-1PN及其衍生菌株核酸RT-PCR比较分析 | 第43-48页 |
1 材料与方法 | 第43-45页 |
·材料 | 第43页 |
·菌株及其培养基 | 第43页 |
·酶及其它试剂 | 第43页 |
·方法 | 第43-45页 |
·菌株培养 | 第43页 |
·总RNA的提取 | 第43页 |
·总RNA的纯化 | 第43-44页 |
·RNA的RT-PCR检测 | 第44-45页 |
2 结果与分析 | 第45-47页 |
·Ep-1PN及其衍生菌株的总RNA | 第45页 |
·RT-PCR分析 | 第45-47页 |
3 结论与讨论 | 第47-48页 |
研究前景展望 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-57页 |
致谢 | 第57页 |