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核盘菌弱毒相关病毒基因组分子生物学特性的初步研究

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
第一章 文献综述第8-18页
 1 核盘菌研究进展第8-10页
   ·核盘菌的寄主范围第8页
   ·核盘菌的生物学特性第8页
   ·核盘菌的致病作用及其寄主的抗性第8-9页
   ·作物菌核病的防治第9-10页
 2 真菌病毒或dsRNA及其介导的植物病原真菌弱毒现象的研究进展第10-16页
   ·真菌病毒或dsRNA第10-12页
   ·植物病原真菌的弱毒现象及其与真菌病毒或dsRNA的关系第12-14页
   ·真菌病毒或dsRNA与寄主的互作第14-15页
   ·弱毒株的生防潜能第15-16页
 3 核盘菌弱毒株Ep-1PN的研究进展第16-17页
 4 研究目的及意义第17-18页
第二章 核盘菌Ep-1PN菌株病毒基因组cDNA克隆及序列分析第18-43页
 1 材料及方法第18-26页
   ·材料第18-19页
     ·核盘菌Ep-1PN菌株及其培养基第18页
     ·细菌菌株及培养基第18页
     ·载体、抗性标记、引物及分子标记第18-19页
     ·缓冲液第19页
     ·酶及其它试剂和试剂盒第19页
   ·方法第19-26页
     ·菌株培养第19-20页
     ·dsRNA的粗提取第20页
     ·dsRNA的纯化第20-21页
     ·用随机引物或特定引物对dsRNA序列进行cDNA克隆第21页
     ·cDNA克隆的Northern杂交鉴定第21-22页
     ·用特异引物对dsRNA进一步作cDNA克隆第22-23页
     ·用特异引物对对dsRNA序列进行RT-PCR克隆第23页
     ·dsRNA近末端序列的克隆第23页
     ·目的片段的回收及纯化第23-24页
     ·PCR产物的A-Tailing第24页
     ·PCR产物与克隆载体的连接第24页
     ·利用大肠杆菌感受态细胞转化连接产物第24页
     ·重组质粒DNA的提取及鉴定第24-25页
     ·亚克隆第25页
     ·克隆的测序第25页
     ·dsRNA基因组序列的拼接和分析第25-26页
 2 结果与分析第26-41页
   ·核盘菌Ep-1PN dsRNA及其与弱毒性的关系第26页
   ·重要dsRNA 6.4kb片段的cDNA克隆第26-28页
   ·SS15的RT-PCR延伸第28页
   ·SS15的cDNA克隆延伸第28-29页
   ·Northern杂交鉴定第29-30页
   ·dsRNA 6.4kb片段5'端和3'端的克隆第30-31页
   ·cDNA克隆间的拼接第31-36页
   ·推定的蛋白质功能分析第36-37页
   ·SsHV编码的Helicase及RdRp同源性比较第37-41页
 3 结论与讨论第41-43页
   ·结论第41页
   ·讨论第41-43页
第三章 核盘菌Ep-1PN及其衍生菌株核酸RT-PCR比较分析第43-48页
 1 材料与方法第43-45页
   ·材料第43页
     ·菌株及其培养基第43页
     ·酶及其它试剂第43页
   ·方法第43-45页
     ·菌株培养第43页
     ·总RNA的提取第43页
     ·总RNA的纯化第43-44页
     ·RNA的RT-PCR检测第44-45页
 2 结果与分析第45-47页
   ·Ep-1PN及其衍生菌株的总RNA第45页
   ·RT-PCR分析第45-47页
 3 结论与讨论第47-48页
研究前景展望第48-49页
参考文献第49-57页
致谢第57页

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