彭泽鲫抗菌肽基因的筛选及其分析鉴定
| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第1章 文献综述 | 第8-26页 |
| ·鱼类抗菌肽研究进展 | 第8-12页 |
| ·鱼类抗菌肽的生化特点与组成 | 第8-9页 |
| ·鱼类抗菌肽基因的结构 | 第9-10页 |
| ·鱼类抗菌肽的生物学活性与功能 | 第10-11页 |
| ·鱼类抗菌肽的抗菌机制 | 第11-12页 |
| ·展望 | 第12页 |
| ·基因表达差异的研究方法 | 第12-21页 |
| ·前言 | 第12-13页 |
| ·基因表达差异的研究方法 | 第13-19页 |
| ·mRNA差异显示技术的应用 | 第19-21页 |
| ·小结 | 第21页 |
| ·表达序列标签的研究及应用 | 第21-24页 |
| ·前言 | 第21-22页 |
| ·表达序列标签的研究及应用 | 第22-24页 |
| ·小结 | 第24页 |
| ·本试验的研究意义和主要内容 | 第24-26页 |
| 第2章 彭泽鲫肝脏差异显示cDNA片段的筛选 | 第26-46页 |
| ·材料与方法 | 第26-36页 |
| ·试验材料 | 第26-30页 |
| ·Trizol法提取彭泽鲫肝脏总RNA及其纯化 | 第30-31页 |
| ·甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测总RNA完整性 | 第31-32页 |
| ·总RNA中基因组DNA的酶解 | 第32页 |
| ·逆转录(1st Strand cDNA合成) | 第32-33页 |
| ·差异显示逆转录PCR(DDRT-PCR) | 第33页 |
| ·8M-尿素-6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第33-34页 |
| ·银染法染色 | 第34-35页 |
| ·差异片段的切取、再扩增与纯化 | 第35-36页 |
| ·试验结果 | 第36-42页 |
| ·彭泽鲫肝脏组织总RNA的提取与纯化 | 第36-40页 |
| ·差异片段的切取 | 第40页 |
| ·差异片段的再扩增、回收与纯化 | 第40-42页 |
| ·讨论与分析 | 第42-45页 |
| ·总RNA的提取 | 第42-43页 |
| ·关于DNaseI的处理 | 第43页 |
| ·反应条件对实验结果的影响 | 第43-44页 |
| ·差异片段的回收与再扩增 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 第3章 差异显示cDNA片段的克隆与测序 | 第46-59页 |
| ·材料与方法 | 第47-50页 |
| ·试验材料 | 第47页 |
| ·差异显示cDNA片段的克隆 | 第47-48页 |
| ·转化子的筛选 | 第48-49页 |
| ·质粒DNA提取及纯化 | 第49-50页 |
| ·序列测定 | 第50页 |
| ·确定差异显示cDNA片段序列 | 第50页 |
| ·试验结果 | 第50-56页 |
| ·阳性片段的克隆与筛选 | 第50-51页 |
| ·菌落PCR验证结果 | 第51页 |
| ·质粒提取与鉴定 | 第51-53页 |
| ·阳性克隆的序列测定 | 第53页 |
| ·差异显示cDNA片段的序列信息 | 第53-56页 |
| ·讨论与分析 | 第56-58页 |
| ·PCR产物与载体的连接与克隆效率 | 第56-57页 |
| ·关于测序结果 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 第4章 彭泽鲫肝脏差异显示ESTs的分析鉴定 | 第59-77页 |
| ·分析方法 | 第59-60页 |
| ·分析结果 | 第60-73页 |
| ·序列递交结果 | 第60-61页 |
| ·相似性搜索结果 | 第61-73页 |
| ·讨论与分析 | 第73-76页 |
| ·搜索结果中存在功能注释的差异显示ESTs | 第73-75页 |
| ·搜索结果中不存在功能注释的差异显示ESTs | 第75-76页 |
| ·未来的研究方向 | 第76页 |
| ·小结 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-83页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第83页 |
