| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| ·植酸磷 | 第12-13页 |
| ·植酸酶 | 第13-19页 |
| ·植酸酶的代谢原理 | 第13-14页 |
| ·植酸酶分类 | 第14页 |
| ·植酸酶的来源 | 第14-16页 |
| ·植酸酶的酶学性质 | 第16-17页 |
| ·植酸酶基因工程进展 | 第17-19页 |
| ·植酸酶的研究方向 | 第19页 |
| ·家蚕转基因研究 | 第19-22页 |
| 第二章 引言 | 第22-24页 |
| ·研究背景及意义 | 第22页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第22-24页 |
| 第三章 植酸酶基因的克隆及转基因表达载体的构建 | 第24-36页 |
| ·材料及试剂 | 第24-26页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·主要试剂和配方 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-29页 |
| ·phyA基因的亚克隆 | 第26-29页 |
| ·载体构建 | 第29页 |
| ·结果 | 第29-33页 |
| ·phyA基因的亚克隆 | 第29-33页 |
| ·转基因表达载体构建 | 第33页 |
| ·讨论 | 第33-36页 |
| 第四章 转基因家蚕的获得及分子检测 | 第36-50页 |
| ·材料及试剂 | 第36-38页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36-37页 |
| ·引物、试剂及配方 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-44页 |
| ·蚕卵显微注射 | 第38页 |
| ·转基因阳性个体的筛选 | 第38-39页 |
| ·家蚕基因组提取 | 第39页 |
| ·Southern Blot | 第39-41页 |
| ·反向PCR | 第41-43页 |
| ·RNA提取 | 第43页 |
| ·反转录 | 第43-44页 |
| ·荧光定量PCR | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-48页 |
| ·phyA转基因家蚕的获得 | 第44-45页 |
| ·转基因Southern blot分析 | 第45-46页 |
| ·插入位点的鉴定 | 第46-47页 |
| ·phyA基因转录表达分析 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 重组植酸酶表达检测 | 第50-64页 |
| ·材料与试剂 | 第50-54页 |
| ·表达载体与表达菌株 | 第50页 |
| ·主要仪器 | 第50页 |
| ·主要试剂和配方 | 第50-54页 |
| ·实验方法 | 第54-58页 |
| ·phyA基因的原核表达及蛋白纯化 | 第54-57页 |
| ·转基因家蚕重组植酸酶检测 | 第57-58页 |
| ·结果与分析 | 第58-61页 |
| ·重组质粒的构建 | 第58-59页 |
| ·原核表达及纯化 | 第59-60页 |
| ·BmLP3-phyA转基因蚕脂肪体中rphyA蛋白的SDS-PAGE表达检测 | 第60页 |
| ·BmLP3-phyA转基因蚕脂肪体中rphyA蛋白的Western blot表达检测 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-64页 |
| 第六章 重组植酸酶的活性检测 | 第64-72页 |
| ·材料与试剂 | 第64-65页 |
| ·实验材料 | 第64页 |
| ·主要仪器 | 第64页 |
| ·主要试剂和配方 | 第64-65页 |
| ·试验方法 | 第65-67页 |
| ·样品处理 | 第65页 |
| ·实验步骤 | 第65-66页 |
| ·结果计算和表示 | 第66-67页 |
| ·实验结果 | 第67-70页 |
| ·重组植酸酶的活性 | 第67-68页 |
| ·植酸酶活性随温度的变化 | 第68-69页 |
| ·植酸酶活性随pH的变化 | 第69-70页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| 第七章 总结 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-80页 |
| 附录 | 第80-82页 |
| 参加过的研究课题及发表论文目录一览表 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |