摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
文献综述 | 第9-25页 |
第一章 SOX2 基因的研究进展 | 第9-16页 |
·SOX2 基因的结构及其特征 | 第9-10页 |
·Sox2 基因的结构 | 第9页 |
·SOX2 蛋白的特点 | 第9-10页 |
·SOX2 基因的功能 | 第10-12页 |
·Sox 基因家族其他成员的功能 | 第10-11页 |
·Sox2 基因在正常胚胎发育中的表达 | 第11页 |
·Sox2 基因缺失对胚胎发育的影响 | 第11-12页 |
·SOX2 基因的作用机理 | 第12-16页 |
·Sox2 基因与Oct4,Nanog 之间的关系 | 第12-13页 |
·Sox2/Oct4 协同调控的分子机制 | 第13-16页 |
第二章 RNA 干扰研究进展 | 第16-20页 |
·RNAI 的分子机制 | 第16-17页 |
·RNAi 中所需的酶 | 第16页 |
·RNAi 作用机理 | 第16-17页 |
·SIRNA 的制备 | 第17-18页 |
·化学合成法 | 第17页 |
·质粒载体介导的siRNA 的制备 | 第17页 |
·病毒载体介导的siRNA 的制备 | 第17-18页 |
·RNAI 在基因组研究方面的应用 | 第18页 |
·RNAI 在医学方面的应用 | 第18-19页 |
·利用RNAI 技术在ESCS 研究中的应用 | 第19-20页 |
第三章 干细胞向心肌诱导分化的研究 | 第20-25页 |
·干细胞概述 | 第20-21页 |
·胚胎干细胞概述 | 第20-21页 |
·畸胎瘤干细胞概述 | 第21页 |
·干细胞向心肌细胞的诱导 | 第21-24页 |
·诱导分化的方法 | 第21-22页 |
·诱导分化的机制 | 第22-24页 |
·干细胞向心肌诱导分化的意义与应用 | 第24-25页 |
实验研究 | 第25-51页 |
第四章 PFLAG-SOX2 表达载体的构建 | 第25-39页 |
·材料与方法 | 第25-36页 |
·材料 | 第25-27页 |
·方法与步骤 | 第27-36页 |
·结果和分析 | 第36-38页 |
·Sox2 基因的克隆 | 第36页 |
·重组质粒pT-Sox2 酶切鉴定及测序结果 | 第36-37页 |
·Sox2 基因真核表达载体pFlag-Sox2 构建及鉴定 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38页 |
·Sox2 基因克隆 | 第38页 |
·表达载体构建 | 第38页 |
·小结 | 第38-39页 |
第五章 SIRNA 干扰SOX2 基因对P19 细胞分化的影响 | 第39-45页 |
·材料和方法 | 第39-40页 |
·材料 | 第39页 |
·方法步骤 | 第39-40页 |
·结果与分析 | 第40-43页 |
·半定量RT-PCR 检测siRNA 干扰效果 | 第40-41页 |
·siRNA 转染P19 细胞以及对P19 细胞诱导类胚体的影响 | 第41-43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
·siRNA 设计 | 第43页 |
·siRNA 干扰P19 细胞Sox2 基因 | 第43-44页 |
·Sox2 基因表达下降对于P19 细胞的影响 | 第44页 |
·小结 | 第44-45页 |
第六章 诱导P19 细胞向心肌分化 | 第45-51页 |
·材料与方法 | 第45-46页 |
·材料 | 第45页 |
·方法与步骤 | 第45-46页 |
·结果与分析 | 第46-49页 |
·细胞培养与诱导分化 | 第46-47页 |
·免疫组化分析 | 第47-48页 |
·心肌细胞表面标记物分析 | 第48-49页 |
·讨论 | 第49-50页 |
·P19 细胞的诱导分化 | 第49-50页 |
·心肌细胞特异基因检测 | 第50页 |
·小结 | 第50-51页 |
结论 | 第51-52页 |
下一步工作设想 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
作者简介 | 第62页 |