| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-40页 |
| 一、栉孔扇贝养殖现状及面临问题 | 第13-20页 |
| 1.栉孔扇贝养殖 | 第13页 |
| 2.栉孔扇贝养殖面临问题 | 第13-16页 |
| 3.病害控制策略 | 第16-20页 |
| ·抗生素的使用 | 第16-17页 |
| ·免疫增强剂的应用 | 第17-20页 |
| 二、无脊椎动物免疫防御机制 | 第20-29页 |
| 1.无脊椎动物免疫防御与脊椎动物免疫防御的差异 | 第20-21页 |
| 2.固有免疫防御机制 | 第21-29页 |
| ·细胞免疫 | 第22-26页 |
| ·吞噬作用 | 第22-26页 |
| ·吞噬细胞的识别 | 第23-25页 |
| ·病原物的吞入及其杀灭机制 | 第25-26页 |
| ·体液免疫 | 第26-29页 |
| ·水解酶类 | 第26-27页 |
| ·氧化酶 | 第27-28页 |
| ·抗氧化酶类 | 第28-29页 |
| 三、无脊椎动物免疫致敏(immune priming)研究 | 第29-39页 |
| 1.脊椎动物的免疫记忆研究 | 第29-31页 |
| 2.无脊椎动物的免疫致敏(immune priming)研究 | 第31-39页 |
| ·无脊椎动物中存在免疫记忆现象 | 第32-33页 |
| ·海绵动物组织移植中的排斥现象 | 第32页 |
| ·昆虫类及甲壳类动物中的免疫记忆现象 | 第32-33页 |
| ·无脊椎动物可能产生特异性免疫致敏(immune priming)的机制 | 第33-37页 |
| ·无特异性的可诱导机制组合型表达时可以产生特异性免疫致敏 | 第33-35页 |
| ·免疫成分的协作效应可能产生特异性免疫致敏 | 第35页 |
| ·免疫成分的剂量效应可能产生特异性免疫致敏 | 第35-37页 |
| ·无脊椎动物免疫致敏在进化上的重要性 | 第37-38页 |
| ·目前无脊椎动物免疫致敏研究缺少理论支持 | 第38页 |
| ·研究无脊椎动物在第二次受到相同病原物刺激后的免疫反应将为无脊椎动物免疫致敏研究提供宝贵的理论数据支持 | 第38-39页 |
| 四、本研究的目的和意义 | 第39-40页 |
| 1.本研究的目的 | 第39页 |
| 2.本研究的意义 | 第39-40页 |
| 第二章 材料与方法 | 第40-51页 |
| 一、材料 | 第40-42页 |
| 1.扇贝 | 第40-41页 |
| ·注射刺激 | 第40页 |
| ·菌刺激 | 第40页 |
| ·取样 | 第40页 |
| ·浸泡刺激 | 第40-41页 |
| ·扇贝和鳗弧菌 | 第40-41页 |
| ·菌刺激与取样 | 第41页 |
| 2.培养基 | 第41-42页 |
| 3.菌株 | 第42页 |
| 4.主要化学试剂与仪器设备 | 第42页 |
| ·主要化学试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| 二、方法 | 第42-51页 |
| 1.扇贝总RNA提取和cDNA模板第一链的合成 | 第42-44页 |
| ·扇贝总RNA提取 | 第42-44页 |
| ·实验用品的预处理 | 第43页 |
| ·扇贝总RNA提取 | 第43-44页 |
| ·DNase I消化 | 第44页 |
| ·扇贝cDNA模板第一链的合成 | 第44页 |
| 2.荧光实时定量PCR检测目的基因的表达 | 第44-48页 |
| ·荧光实时定量PCR的原理 | 第45-47页 |
| ·荧光实时定量PCR的引物设计 | 第47页 |
| ·荧光实时定量PCR检测环境胁迫下目的基因的表达 | 第47-48页 |
| ·荧光实时定量PCR反应体系及参数 | 第48页 |
| 3.栉孔扇贝体液免疫指标的测定 | 第48-50页 |
| ·样品制备 | 第48-49页 |
| ·吞噬活性的测定 | 第49页 |
| ·POL活性的测定 | 第49-50页 |
| ·抗菌活力的测定 | 第50页 |
| ·ACP和活性的测定 | 第50页 |
| ·AKP活性的测定 | 第50页 |
| ·SOD活性的测定 | 第50页 |
| ·MDA含量的测定 | 第50页 |
| 4.数据分析 | 第50-51页 |
| 第三章 结果 | 第51-68页 |
| 一.扇贝在连续接受等量鳗弧菌刺激后PRR(CfPGRP-S1和LGBP)及各种免疫指标的变化 | 第51-60页 |
| 1.实时定量PCR检测栉孔扇贝受到鳗弧菌刺激后CfPGRP-S1和LGBP的时序表达 | 第51-56页 |
| ·鳗弧菌刺激后CfPGRP-S1基因的时序表达 | 第52-54页 |
| ·鳗弧菌刺激后LGBP基因的时序表达 | 第54-56页 |
| 2.鳗弧菌刺激后各免疫指标的变化 | 第56-60页 |
| ·吞噬活性的变化 | 第56-58页 |
| ·血淋巴中抗菌活力的变化 | 第58页 |
| ·肝胰腺中酶活性的变化 | 第58-60页 |
| ·SOD活性的变化 | 第58-59页 |
| ·MDA含量的变化 | 第59-60页 |
| 二.扇贝在连续接受两次浸泡刺激后死亡率及各种免疫指标变化情况的研究 | 第60-68页 |
| 1.鳗弧菌刺激浓度的确定 | 第60-61页 |
| 2.短期刺激后扇贝各种免疫指标的变化 | 第61-64页 |
| 3.第二次浸泡刺激中各组的死亡率变化 | 第64页 |
| 4.第二次浸泡刺激中各组的免疫指标的变化 | 第64-68页 |
| 第四章 讨论 | 第68-76页 |
| 一.扇贝中有可能存在免疫致敏(immune priming)现象 | 第68-71页 |
| 二.扇贝中存在增强的免疫保护作用 | 第71-72页 |
| 三.并非所有免疫成分都参与扇贝增强的免疫保护作用 | 第72-73页 |
| 四.无脊椎动物免疫致敏(immune priming)机制的复杂性和未知性 | 第73-76页 |
| 第五章 结论 | 第76-77页 |
| 第六章 栉孔扇贝过氧化物还原酶(Peroxiredoxin)基因cDNA序列分析及其在短期鳗弧菌刺激下的表达 | 第77-83页 |
| 参考文献 | 第83-99页 |
| 博士期间完成及发表的文章 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100页 |
