| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-22页 |
| ·玻璃化冻存原理 | 第9页 |
| ·玻璃化冷冻保存方法 | 第9-12页 |
| ·细管法 | 第10页 |
| ·开放式拉管法(Open Pulled Straw, OPS 法) | 第10-11页 |
| ·微滴法和固体表面法(Solid Surface of Vitrification, SSV 法) | 第11-12页 |
| ·冷环玻璃化法(Cryo-loop of Vitrification, CLV 法) | 第12页 |
| ·其他方法 | 第12页 |
| ·玻璃化冷冻保护剂 | 第12-16页 |
| ·渗透型保护剂 | 第13页 |
| ·非渗透型保护剂 | 第13-14页 |
| ·海藻糖(trehalose) | 第14-16页 |
| ·抗冻蛋白(antifreeze protein, AFP) | 第16页 |
| ·玻璃化冻存在动物组织细胞中的应用 | 第16-20页 |
| ·小鼠胰岛 | 第16-17页 |
| ·小鼠卵母细胞 | 第17页 |
| ·大鼠卵巢 | 第17-18页 |
| ·牛胚泡 | 第18页 |
| ·牛卵母细胞 | 第18-19页 |
| ·羊胚胎 | 第19页 |
| ·猪胚胎 | 第19页 |
| ·人卵母细胞 | 第19-20页 |
| ·人胚胎 | 第20页 |
| ·玻璃化冷冻技术的展望 | 第20-21页 |
| ·本文的立题依据、目的及要解决的问题 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-27页 |
| ·实验动物、试剂与仪器 | 第22-23页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第22-23页 |
| ·细胞的玻璃化溶液的配方设计 | 第23页 |
| ·脑细胞悬液的制备 | 第23-24页 |
| ·预平衡、冻存、复温和洗脱 | 第24页 |
| ·预平衡 | 第24页 |
| ·玻璃化冻存 | 第24页 |
| ·复温和冻存液的洗脱 | 第24页 |
| ·预平衡温度与时间对小鼠脑细胞的影响 | 第24-25页 |
| ·玻璃化冻存后小鼠脑细胞活性和各项生化指标的检测 | 第25-26页 |
| ·检测脑细胞回收率和存活率 | 第25页 |
| ·MTT 法检测脑细胞琥珀酸脱氢酶（SDH）活性 | 第25页 |
| ·吖啶橙荧光染色(acridine orange staining method)观察细胞完整性 | 第25-26页 |
| ·统计学处理 | 第26-27页 |
| 3 实验结果 | 第27-39页 |
| ·预平衡温度与时间对细胞的影响 | 第27-31页 |
| ·不含海藻糖组玻璃化溶液对小鼠脑细胞存活率的影响 | 第27-30页 |
| ·海藻糖组玻璃化溶液对小鼠脑细胞存活率的影响 | 第30-31页 |
| ·玻璃化冻存对小鼠脑细胞的影响 | 第31-37页 |
| ·玻璃化冻存对细胞回收率的影响 | 第31-32页 |
| ·玻璃化冻存对细胞存活率的影响 | 第32-35页 |
| ·玻璃化冻存对细胞内琥珀酸脱氢酶（SDH）活性的影响 | 第35-37页 |
| ·玻璃化冻存对细胞膜完整性的影响 | 第37页 |
| ·结论 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-43页 |
| ·玻璃化保护剂的筛选 | 第39-40页 |
| ·预平衡时间与温度对玻璃化冻存效果的影响 | 第40-41页 |
| ·玻璃化冻存对细胞酶活力的影响 | 第41页 |
| ·玻璃化冻存对细胞膜的影响 | 第41-42页 |
| ·研究展望 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 个人简介 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
