摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
1 引言 | 第10-22页 |
·PCV 病原特征 | 第10-11页 |
·病毒基本特性 | 第10-11页 |
·病毒的培养特性 | 第11页 |
·分子生物学特征 | 第11-12页 |
·基因组特征 | 第11页 |
·Rap 蛋白 | 第11页 |
·Cap 蛋白 | 第11-12页 |
·流行病学 | 第12页 |
·与PCV2 相关的疾病 | 第12-14页 |
·断奶仔猪多系统衰竭综合征 | 第12-13页 |
·猪皮炎与肾病综合征 | 第13页 |
·猪先天性震颤(Congenital Tremors,CT) | 第13-14页 |
·致病机理 | 第14-15页 |
·免疫抑制 | 第14页 |
·其他病原对疾病发展的促进和诱导 | 第14-15页 |
·PCV2 感染猪体内靶细胞的变化 | 第15页 |
·PCV 诊断技术 | 第15-20页 |
·间接免疫荧光试验(Immunofluorescence Assay,IFA) | 第15-16页 |
·免疫组化法(Irtmunohistoehemistry,IHC) | 第16页 |
·聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR) | 第16-18页 |
·原位杂交(In Situ Hybirdzation,ISH) | 第18页 |
·免疫过氧化物酶单层细胞试验(Immunoperoxidase Monolayer Assay,IPMA) | 第18-19页 |
·酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA) | 第19-20页 |
·PCV2 相关疾病的疫苗研究 | 第20页 |
·防制措施 | 第20-21页 |
·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-34页 |
·毒株 | 第22页 |
·实验动物 | 第22页 |
·质粒与菌株 | 第22页 |
·实验中所需要的主要试剂 | 第22-25页 |
·细胞培养所需主要试剂 | 第22页 |
·聚合酶链式反应(PCR)所需主要试剂 | 第22-23页 |
·目的基因的克隆所需主要试剂 | 第23页 |
·过氧化物酶单层实验(IPMA)所需主要试剂 | 第23页 |
·乳胶凝集实验(LAT)所需主要试剂 | 第23页 |
·主要试剂的配制方法 | 第23-25页 |
·主要仪器 | 第25页 |
·病毒的分离及生物学特性的鉴定 | 第25-27页 |
·病料的处理 | 第25页 |
·PCR 检测 | 第25-26页 |
·病毒的增殖 | 第26页 |
·兔抗分离株高免血清的制备 | 第26页 |
·病毒毒价测定(Tissue Culture Infective Dose,TCID_(50)) | 第26-27页 |
·理化特性鉴定 | 第27页 |
·病毒的形态学观察 | 第27页 |
·圆环病毒多重PCR 诊断方法的建立 | 第27-31页 |
·引物的设计与合成 | 第27-28页 |
·病毒培养 | 第28页 |
·DNA 模板的制备 | 第28页 |
·单相PCR 扩增 | 第28页 |
·多重PCR 扩增 | 第28-29页 |
·PCV2 PCR 产物的酶切鉴定 | 第29页 |
·PPV 和PRV 片段PCR 产物的克隆及鉴定 | 第29-31页 |
·正向乳胶凝集实验诊断方法的建立 | 第31-33页 |
·乳胶的预处理 | 第31页 |
·致敏乳胶最佳条件的确定 | 第31-32页 |
·乳胶凝集试验的操作过程 | 第32页 |
·PCV2 致敏乳胶的稳定性检验 | 第32页 |
·乳胶凝集抗原质量的鉴定 | 第32-33页 |
·乳胶的预处理 | 第33-34页 |
·致敏乳胶最佳条件的确定 | 第33页 |
·乳胶凝集试验的操作过程 | 第33页 |
·血清致敏乳胶的稳定性检验 | 第33页 |
·乳胶凝集抗原质量的鉴定 | 第33-34页 |
3 实验结果 | 第34-49页 |
·PCV2 的分离及生物学特性的鉴定 | 第34-40页 |
·PCR 检测结果 | 第34页 |
·免疫过氧化物酶单层细胞实验(IPMA)结果 | 第34-35页 |
·基于IPMA 测定PCV2 的TCID50 结果 | 第35页 |
·理化特性鉴定结果 | 第35-39页 |
·病毒的形态学观察 | 第39-40页 |
·多重PCR 实验结果 | 第40-45页 |
·单相PCR 扩增 | 第40页 |
·多重PCR 反应条件的确定 | 第40-42页 |
·多重PCR 特异性 | 第42-43页 |
·重复性试验 | 第43页 |
·酶切鉴定结果 | 第43-44页 |
·PCR 产物测序结果 | 第44-45页 |
·正向乳胶凝集实验结果 | 第45-47页 |
·最佳致敏浓度的选择 | 第45-46页 |
·最佳致敏温度的确定 | 第46页 |
·最佳致敏时间的确定 | 第46页 |
·血清致敏乳胶的稳定性检验 | 第46-47页 |
·乳胶凝集抗原质量的鉴定结果 | 第47页 |
·反向乳胶凝集实验结果 | 第47-49页 |
·致敏乳胶最佳浓度的选择 | 第47-48页 |
·最佳致敏温度和最佳致敏时间的确定 | 第48页 |
·血清致敏乳胶的稳定性检验 | 第48页 |
·乳胶凝集抗原质量的鉴定结果 | 第48-49页 |
4 讨论 | 第49-51页 |
5 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
作者简介 | 第59-60页 |
在读期间发表的论文 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |