中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
前言 | 第8页 |
一 背景介绍 | 第8-16页 |
1 STAT3背景介绍 | 第8-12页 |
·STAT3在肿瘤细胞中组成性激活的机制 | 第8-10页 |
·STAT3的结构 | 第8-9页 |
·STAT3的激活 | 第9-10页 |
·STAT3的组成性激活 | 第10页 |
·STAT3调控的靶基因 | 第10页 |
·STAT3在肿瘤发生中的作用 | 第10-12页 |
·肿瘤发生的因素 | 第10-11页 |
·STAT3在肿瘤发生早期发挥着重要作用 | 第11页 |
·STAT3促进细胞的迁移和转化能力 | 第11页 |
·STAT3在肿瘤诱导的免疫抑制中发挥着重要的作用 | 第11-12页 |
·STAT3将成为癌症治疗的靶标 | 第12页 |
2 NR4A1背景介绍 | 第12-15页 |
·NR4A1的结构与激活 | 第13-14页 |
·NR4A1在疾病中的作用 | 第14-15页 |
3 FGR与NIF3L1简单介绍 | 第15页 |
4 本文研究的内容和意义 | 第15-16页 |
二 材料与方法 | 第16-29页 |
1 菌株、质粒、cDNA文库、细胞 | 第16页 |
2 主要试剂 | 第16-17页 |
3 常用试剂配方 | 第17页 |
4 主要仪器设备 | 第17页 |
5 实验方法 | 第17-24页 |
·PCR扩增目的基因 | 第17-18页 |
·引物 | 第17页 |
·PCR反应体系 | 第17-18页 |
·扩增FGR与NIF3L1目的基因反应体系 | 第18页 |
·扩增NR4A1目的基因反应体系 | 第18页 |
·PCR扩增时变性、复性和聚合(延伸反应),相应的循环条件与温度 | 第18页 |
·在质粒载体中的定向克隆 | 第18-19页 |
·转化 | 第19-21页 |
·转染细胞(24孔板) | 第21页 |
·收集裂解细胞 | 第21页 |
·SDS-PAGE分离相互作用蛋白 | 第21页 |
·Western-Blot检测靶蛋白 | 第21-22页 |
·双荧光素酶报告基因实验 | 第22页 |
·GST融合蛋白质表达与纯化 | 第22-24页 |
6 结果 | 第24-29页 |
·Western-Blot检测靶蛋白 | 第24-25页 |
·双荧光素酶报告基因实验 | 第25-27页 |
·考马斯亮蓝染色 | 第27-28页 |
·Western-Blot检测纯化后GST融合蛋白质 | 第28-29页 |
结论 | 第29-31页 |
展望 | 第31-32页 |
参考文献 | 第32-38页 |
致谢 | 第38-39页 |
附录 | 第39-42页 |
附录1:常用试剂配方 | 第39-41页 |
附录2:主要仪器设备 | 第41-42页 |
在读期间发表的文章 | 第42页 |