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力学环境下组织工程骨的构建与动态培养

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-19页
第一章 绪论第19-30页
   ·研究的背景第19-24页
   ·研究目的和意义第24页
   ·研究内容与研究方法第24-26页
   ·参考文献第26-30页
第二章 胶原多糖基纳米HA仿生骨支架材料的制备与理化性能第30-42页
   ·引言第30页
   ·材料与方法第30-33页
     ·主要材料与试剂与仪器第30-31页
     ·胶原多糖基纳米HA仿生复合材料的制备第31-32页
       ·Ⅰ型胶原与透明质酸钠的交联第31-32页
       ·胶原多糖交联结合物的矿化第32页
     ·三维多孔支架的制备第32页
     ·材料的分析测试第32-33页
   ·结果第33-35页
   ·讨论第35-37页
   ·结论第37-38页
   ·参考文献第38-42页
第三章 小鼠MC3T3-E1成骨样细胞的培养与鉴定第42-50页
   ·引言第42页
   ·材料与方法第42-46页
     ·主要试剂第42-43页
     ·主要仪器第43页
     ·主要试剂的配制第43-44页
     ·实验方法第44-46页
   ·结果第46-48页
     ·光镜下观察细胞第46-47页
     ·碱性磷酸酶(ALP)染色第47页
     ·茜素红矿化结节染色第47-48页
     ·Ⅰ型胶原免疫组化染色第48页
     ·骨钙素(BGP)免疫组化染色第48页
   ·讨论第48-49页
   ·参考文献第49-50页
第四章 胶原多糖基纳米HA仿生骨支架材料的细胞相容性检测第50-63页
   ·引言第50页
   ·材料第50-51页
   ·方法第51-54页
     ·成骨细胞与胶原基纳米HA支架材料的联合培养第51-52页
     ·细胞增殖效应检测第52页
     ·碱性磷酸酶(ALP)活性测定第52-53页
     ·细胞形态观察第53-54页
       ·细胞与材料碎屑共混培养后爬片观察第53页
       ·细胞/支架复合物切片观察第53-54页
       ·扫描电镜观察第54页
     ·统计学处理第54页
   ·结果第54-60页
     ·细胞增殖效应检测结果第54-55页
     ·碱性磷酸酶(ALP)活性测定结果第55页
     ·细胞形态观察结果第55-60页
       ·支架材料与细胞混合培养7d后形态观察第55-57页
       ·细胞/支架复合培养物的切片观察第57-58页
       ·细胞/支架复合培养物的扫描电镜观察第58-60页
   ·讨论第60-61页
   ·参考文献第61-63页
第五章 新型动态载荷与循环灌流生物反应器系统的研制与性能测试第63-83页
   ·引言第63页
   ·材料第63-64页
   ·方法第64-73页
     ·动态载荷与循环灌流生物反应器系统的设计第64-68页
       ·设计原则第64页
       ·刚性框架的设计第64-65页
       ·加载动力与控制系统的设计及其工作原理第65-66页
       ·三维循环灌注系统的设计及其工作原理第66-67页
       ·生物反应器的铺助工具——标本标准化切割工具的设计第67-68页
     ·动态载荷与循环灌流生物反应器系统的操作第68-70页
     ·生物反应器的调控与培养物内部力学微环境的改变第70-73页
       ·组织工程培养物内部的压应力分布与动态载荷的确定第70-72页
       ·组织工程培养物内部剪切力的计算第72-73页
     ·反应器系统的运行测试第73页
   ·结果第73-79页
     ·设计结果第73-75页
     ·标本标准化切割工具设计结果第75-77页
     ·流量测定结果第77-78页
     ·微应变加载测试结果第78-79页
     ·细菌学检测结果第79页
   ·讨论第79-81页
   ·参考文献第81-83页
第六章 组织工程骨在生物反应器内的初步培养实验第83-104页
   ·引言第83页
   ·材料第83-86页
   ·方法第86-91页
     ·组织工程骨的构建第86页
     ·细胞增殖效应检测第86页
     ·碱性磷酸酶(ALP)活性测定第86-87页
     ·支架内细胞分布及形态观察第87页
     ·RT-PCR检测动态应变加载对成骨细胞mRNA表达水平的影响第87-90页
     ·Western-blot检测动态应变加载后成骨细胞蛋白表达水平的变化第90-91页
   ·结果第91-97页
     ·细胞增殖效应检测结果第91-92页
     ·碱性磷酸酶(ALP)活性测定结果第92页
     ·支架内细胞分布及形态观察第92-95页
     ·RT-PCR检测结果第95-96页
     ·Western-blot检测成骨细胞标志蛋白表达的结果第96-97页
   ·讨论第97-99页
   ·参考文献第99-104页
第七章 全文总结第104-106页
   ·全文主要结论第104页
     ·胶原多糖基纳米HA仿生骨支架材料研制的结论第104页
     ·新型动态载荷与循环灌流生物反应器系统的研制与性能测试结论第104页
     ·组织工程骨在生物反应器内的初步培养实验结论第104页
   ·本研究的创新点第104-106页
攻读博士学位期间成果第106-107页
附录 缩略词索引表第107-109页
致谢第109-110页

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