胸腺基质淋巴细胞生成素基因的克隆与表达
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 一、文献综述 | 第8-17页 |
| 1 TSLP基因及其表达 | 第8-9页 |
| ·TSLP基因 | 第8页 |
| ·TSLP基因的表达 | 第8-9页 |
| ·TSLP蛋白结构 | 第9页 |
| 2 TSLP受体基因及其表达 | 第9-11页 |
| ·TSLP受体基因 | 第9-10页 |
| ·TSLP受体基因的表达 | 第10页 |
| ·TSLP受体蛋白结构 | 第10-11页 |
| 3 TSLP与过敏性疾病 | 第11-15页 |
| ·TSLP和过敏性皮炎以及哮喘的联系 | 第11-12页 |
| ·TSLP在过敏性炎症中的分子机制 | 第12-15页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第15-17页 |
| 二、材料和方法 | 第17-28页 |
| 1 材料 | 第17-20页 |
| ·实验动物 | 第17页 |
| ·质粒和菌株 | 第17-18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·主要溶液 | 第18-20页 |
| ·仪器 | 第20页 |
| 2 方法 | 第20-28页 |
| ·OVA致敏小鼠 | 第20-21页 |
| ·RT-PCR实验 | 第21-23页 |
| ·TSLP在大肠杆菌中的克隆 | 第23-26页 |
| ·TSLP在大肠杆菌中的表达 | 第26页 |
| ·表达条件的优化 | 第26-27页 |
| ·澄清裂解物的制备 | 第27-28页 |
| 三、结果与分析 | 第28-33页 |
| 1 小鼠肺组织中TSLP mRNA表达结果 | 第28页 |
| 2 重组载体的鉴定 | 第28-29页 |
| 3 表达条件的优化 | 第29-33页 |
| ·不同温度对重组蛋白表达量的影响 | 第29-30页 |
| ·不同培养基对重组蛋白表达量的影响 | 第30-31页 |
| ·不同诱导剂浓度对重组蛋白表达量的影响 | 第31-33页 |
| 四、讨论 | 第33-37页 |
| 1 包涵体形成的原因 | 第33页 |
| 2 增加蛋白可溶性的方法 | 第33-37页 |
| ·诱导温度的优化与筛选 | 第33-34页 |
| ·培养基优化与筛选 | 第34-35页 |
| ·IPTG浓度的选择 | 第35-37页 |
| 参考文献 | 第37-41页 |
| 附录一 | 第41-42页 |
| 附录二 | 第42-43页 |
| 附录三 | 第43-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
