| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-24页 |
| ·流行病学方面 | 第11-14页 |
| ·生物学特性 | 第11页 |
| ·流行病特征 | 第11-13页 |
| ·李斯特菌病的临床表现 | 第13页 |
| ·LM的分类 | 第13-14页 |
| ·李斯特菌病的预防监控 | 第14页 |
| ·治疗方案 | 第14页 |
| ·LM致病机理及研究进展 | 第14-22页 |
| ·LM感染细胞的生活周期 | 第14-16页 |
| ·LM的毒力因子及其调控 | 第16-22页 |
| ·LM的免疫反应及LM疫苗载体的应用 | 第22-23页 |
| 结语 | 第23-24页 |
| 第二章 单核细胞增生李斯特菌△inlB/△actA LM减毒突变株的构建 | 第24-36页 |
| ·实验材料 | 第24-26页 |
| ·菌株与质粒 | 第24页 |
| ·引物的设计 | 第24-25页 |
| ·试剂 | 第25-26页 |
| ·主要实验仪器 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-30页 |
| ·actA基因上下游c/d片段的扩增 | 第26页 |
| ·pUC18-actA(c+d)克隆载体的构建 | 第26-27页 |
| ·基因敲除质粒pLSV101-actA(c+d)的构建 | 第27-28页 |
| ·LM△inlB感受态细胞的制备 | 第28页 |
| ·转化 | 第28页 |
| ·LM△inlB/△actA减毒突变株的构建 | 第28-29页 |
| ·PCR鉴定LM△inlB/△actA | 第29-30页 |
| ·LM减毒株的小鼠致病性实验 | 第30页 |
| ·结果 | 第30-34页 |
| ·actA基因上、下游片段的扩增结果 | 第30页 |
| ·pUC18-actA(c+d)克隆载体的构建及鉴定结果 | 第30-31页 |
| ·基因敲除质粒pLSV101-actA(c+d)的构建及鉴定结果 | 第31-32页 |
| ·重组LM的构建与鉴定 | 第32-34页 |
| ·减毒株LM△inlB/△actA的LD_(50)测定 | 第34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 GFP介导的PrfA调控毒力基因actA转录表达研究 | 第36-46页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·菌株 | 第36页 |
| ·质粒 | 第36-37页 |
| ·主要实验仪器 | 第37页 |
| ·试剂 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-39页 |
| ·模板的制备DNA和PCR片段的纯化回收 | 第37页 |
| ·表达融合载体pLSV16-PactA-gfp的构建和鉴定 | 第37-38页 |
| ·表达GFP的LM的构建 | 第38-39页 |
| ·绿色荧光蛋白的表达与荧光强度的检测 | 第39页 |
| ·结果 | 第39-43页 |
| ·actA启动子的扩增 | 第39页 |
| ·无启动子的gfp基因的获得 | 第39-40页 |
| ·GFP重组质粒PCR鉴定 | 第40-41页 |
| ·含gfpLM的转化鉴定 | 第41页 |
| ·绿色荧光蛋白表达的检测 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 总结 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 已论文发表 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
