摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
1 文献综述 | 第11-31页 |
·曼氏裂头蚴及曼氏裂头蚴病的概述 | 第11-21页 |
·曼氏裂头蚴及曼氏裂头蚴病的历史 | 第11页 |
·病原学 | 第11-12页 |
·生活史 | 第12-13页 |
·生理和生化特征 | 第13-15页 |
·超微结构 | 第15页 |
·流行病学 | 第15-17页 |
·致病机理和病理学 | 第17-18页 |
·临床表现 | 第18-21页 |
·诊断 | 第21页 |
·治疗 | 第21页 |
·预防和监测 | 第21页 |
·cDNA文库的简介以及在寄生虫研究中的应用 | 第21-29页 |
·均一化cDNA文库 | 第23-24页 |
·差减cDNA文库 | 第24页 |
·固相cDNA文库构建 | 第24-25页 |
·cDNA文库应用于分离新基因的方法 | 第25-29页 |
·超氧化物歧化酶的研究进展 | 第29-31页 |
2 研究的目的和意义 | 第31-32页 |
3 材料和方法 | 第32-45页 |
·材料 | 第32-35页 |
·实验材料 | 第32页 |
·主要仪器 | 第32页 |
·主要试剂 | 第32-34页 |
·主要溶液的配制 | 第34-35页 |
·实验方法 | 第35-45页 |
·总RNA的提取 | 第35-36页 |
·第一链cDNA的合成 | 第36页 |
·cDNA的扩增通过LD-PCR | 第36-37页 |
·蛋白酶K的消化 | 第37页 |
·Sfi I消化 | 第37页 |
·酶切后的双链cDNA片段化 | 第37-38页 |
·cDNA与λTripIEx2载体的连接 | 第38-39页 |
·连接产物与Lambda phage packaging protein的包装 | 第39页 |
·细菌培养 | 第39页 |
·未扩增cDNA文库滴度的测定 | 第39-40页 |
·文库的扩增 | 第40页 |
·扩增文库滴度的测定 | 第40-41页 |
·PCR方法检测文库的重组率 | 第41-42页 |
·抗血清的预吸收 | 第42-43页 |
·cDNA文库的筛选 | 第43-44页 |
·阳性克隆的鉴定、插入片段核苷酸序列测定及同源性分析 | 第44-45页 |
4 结果 | 第45-53页 |
·曼氏裂头蚴cDNA文库的构建 | 第45-47页 |
·总RNA的提取 | 第45页 |
·双链cDNA的鉴定结果 | 第45-46页 |
·PCR鉴定文库中所插入片段的cDNA长度 | 第46-47页 |
·曼氏裂头蚴cDNA文库的免疫学筛选 | 第47-53页 |
·cDNA文库的免疫学筛选阳性克隆子的获得 | 第47页 |
·重组子插入片段核苷酸序列测定 | 第47-53页 |
5 讨论 | 第53-58页 |
·关于曼氏裂头蚴cDNA文库的构建及文库的鉴定 | 第53-54页 |
·总RNA的提取 | 第53页 |
·双链cDNA的过柱 | 第53-54页 |
·cDNA片段λTriplEx2的体外包装 | 第54页 |
·关于曼氏裂头蚴cDNA文库的免疫学筛选 | 第54-58页 |
·去除抗血清中大肠杆菌抗体方法的改进 | 第54-55页 |
·cDNA文库免疫学筛选相关条件的优化 | 第55页 |
·关于EST序列的分析讨论 | 第55-58页 |
6 结论 | 第58-59页 |
·cDNA文库构建 | 第58页 |
·曼氏裂头蚴cDNA文库的免疫学筛选 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
附录 | 第64页 |