Asia1型和O型口蹄疫VP1基因转化玉米初探
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1. 文献综述 | 第11-22页 |
| ·口蹄疫及其疫苗 | 第11-14页 |
| ·口蹄疫概况 | 第11页 |
| ·口蹄疫病毒 | 第11-12页 |
| ·口蹄疫的研究进展 | 第12-14页 |
| ·玉米遗传转化研究进展 | 第14-20页 |
| ·玉米转化受体系统的研究 | 第14-16页 |
| ·玉米转化方法的研究 | 第16-19页 |
| ·基因枪法与农杆菌法的比较 | 第19-20页 |
| ·转基因植物疫苗存在的问题及发展方向 | 第20-22页 |
| ·外源基因表达量较低 | 第20页 |
| ·外源基因表达产物的靶向表达 | 第20页 |
| ·启动子的选择 | 第20-21页 |
| ·密码子的优化 | 第21页 |
| ·使用特定调控序列提高转录和翻译效率 | 第21页 |
| ·可饲疫苗的免疫原性 | 第21-22页 |
| 2. 实验的目的与意义 | 第22-23页 |
| 3. 材料和方法 | 第23-33页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·目的基因及植物表达载体 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·抗生素和激素 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-27页 |
| ·植物表达载体pC1300-C056的构建 | 第25-26页 |
| ·植物表达载体pC1300-C055的构建 | 第26-27页 |
| ·胚性愈伤组织的诱导 | 第27页 |
| ·取材时间对胚性愈伤组织诱导的影响 | 第27页 |
| ·2,4-D浓度对胚性愈伤组织诱导的影响 | 第27页 |
| ·农杆菌介导转化 | 第27-28页 |
| ·农杆菌感受态制备及转化 | 第27页 |
| ·农杆菌的侵染 | 第27-28页 |
| ·农杆菌转化及共培养 | 第28页 |
| ·转化后的筛选和植株再生 | 第28页 |
| ·基因枪转化法 | 第28-29页 |
| ·愈伤组织的预处理 | 第28页 |
| ·金粉的准备 | 第28页 |
| ·微弹DNA的制备 | 第28-29页 |
| ·基因枪的准备 | 第29页 |
| ·基因枪的轰击 | 第29页 |
| ·恢复培养 | 第29页 |
| ·影响玉米愈伤组织基因转化的因素 | 第29-30页 |
| ·转化前继代天数 | 第29页 |
| ·农杆菌菌液浓度 | 第29-30页 |
| ·共培养时间 | 第30页 |
| ·多效唑及生根粉对再生苗的影响 | 第30页 |
| ·再生植株的PCR检测 | 第30-33页 |
| ·植物基因组DNA的提取 | 第30-31页 |
| ·PCR法检测阳性转基因株 | 第31-33页 |
| 4. 结果与分析 | 第33-42页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第33-34页 |
| ·质粒图谱及质粒的酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·影响玉米转基因体系建立的因素 | 第34-35页 |
| ·取材时间对胚性愈伤组织诱导的影响 | 第34页 |
| ·2，4-D浓度对玉米愈伤组织诱导的影响 | 第34-35页 |
| ·影响玉米愈伤组织遗传转化的因素 | 第35-39页 |
| ·转化前继代天数的影响 | 第35-36页 |
| ·农杆菌菌液浓度的影响 | 第36-37页 |
| ·共培养时间的影响 | 第37-38页 |
| ·潮霉素浓度对愈伤组织的筛选试验结果 | 第38-39页 |
| ·多效唑及生根粉在壮苗培养基中的使用对幼苗的影响 | 第39-40页 |
| ·基因枪转化玉米的抗性愈伤率、再生率和转化率 | 第40页 |
| ·农杆菌转化玉米的抗性愈伤率、再生率和转化率 | 第40-42页 |
| 5. 讨论 | 第42-45页 |
| ·构建高效的FMDV VP1基因表达载体 | 第42页 |
| ·影响玉米胚性愈伤组织诱导的因素 | 第42-43页 |
| ·影响农杆菌介导的玉米转化效率的因素 | 第43页 |
| ·抗性愈伤组织的分化频率 | 第43-44页 |
| ·影响基因枪介导的玉米转化效率的因素 | 第44页 |
| ·影响再生植株移栽成活率的因素 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
