| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-26页 |
| ·植物遗传转化的技术 | 第11-15页 |
| ·直接基因转移技术 | 第11-14页 |
| ·基因枪转化法 | 第12页 |
| ·原生质体转化法 | 第12-13页 |
| ·花粉管通道法 | 第13页 |
| ·电穿孔法 | 第13-14页 |
| ·显微注射法 | 第14页 |
| ·激光微束穿刺法 | 第14页 |
| ·农杆菌介导转化法 | 第14-15页 |
| ·农杆菌介导的禾谷类作物的基因转化技术及其研究进展 | 第15-21页 |
| ·禾谷类植物早期的遗传转化技术 | 第15-16页 |
| ·农杆菌介导的禾谷类作物基因转化研究进展 | 第16-17页 |
| ·农杆菌在禾谷类植物细胞表面的吸附 | 第16-17页 |
| ·酚类诱导物对Vir区基因的诱导活化 | 第17页 |
| ·提高农杆菌介导的禾谷类作物基因转化效率的策略 | 第17-19页 |
| ·菌株与受体材料 | 第18页 |
| ·培养条件 | 第18-19页 |
| ·筛选标记 | 第19页 |
| ·农杆菌介导的玉米转基因研究 | 第19-21页 |
| ·利用原生质体转化 | 第19-20页 |
| ·利用愈伤组织转化 | 第20页 |
| ·利用丛生芽转化 | 第20页 |
| ·利用悬浮细胞转化 | 第20页 |
| ·利用子房和幼穗转化 | 第20-21页 |
| ·利用农杆菌转化的成功示例 | 第21页 |
| ·农杆菌介导Floral dip转化法的研究进展 | 第21-23页 |
| ·Floral dip转化法的提出与发展 | 第22页 |
| ·Floral dip法的优势 | 第22-23页 |
| ·Floral dip法的研究意义 | 第23页 |
| ·存在问题及展望 | 第23页 |
| ·Floral dip转化法在禾本科作物基因转化中的应用 | 第23-24页 |
| ·立题依据 | 第24-25页 |
| ·研究目的与意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-33页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·菌株及质粒 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌 | 第26页 |
| ·根癌农杆菌 | 第26页 |
| ·质粒 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-33页 |
| ·培养基和抗生素 | 第27-28页 |
| ·菌种保存方法 | 第28页 |
| ·菌种的短期保存 | 第28页 |
| ·菌种的长期保存 | 第28页 |
| ·农杆菌感受态的制备及转化子的检测 | 第28-29页 |
| ·农杆菌感受态的制备及转化 | 第28页 |
| ·转化子的检测 | 第28-29页 |
| ·转化子的PCR鉴定 | 第28-29页 |
| ·转化子的酶切鉴定 | 第29页 |
| ·农杆菌的活化培养及储备液的制备 | 第29-30页 |
| ·转化培养液的制备 | 第30页 |
| ·播种及植物材料的准备 | 第30页 |
| ·田间转化 | 第30-31页 |
| ·T0代花器官的荧光观察 | 第31页 |
| ·T0代种子GFP绿色荧光蛋白检测 | 第31页 |
| ·T0代种子的抗性筛选 | 第31页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第31-33页 |
| ·玉米抗性植株总DNA的获得 | 第31页 |
| ·PCR的分子检测 | 第31-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-45页 |
| ·农杆菌转化子的检测 | 第33-34页 |
| ·转化子的PCR鉴定 | 第33页 |
| ·转化子的酶切检测 | 第33-34页 |
| ·田间转化 | 第34-35页 |
| ·花器官荧光观察 | 第35-36页 |
| ·花粉粒绿色荧光蛋白荧光观察 | 第35-36页 |
| ·花丝绿色荧光蛋白荧光观察 | 第36页 |
| ·T0代种子GFP绿色荧光蛋白表达观察 | 第36-42页 |
| ·T0代种子的抗性筛选 | 第42-43页 |
| ·T1代阳性植株PCR检测 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-53页 |
| ·关于农杆菌介导的玉米Floral dip转化法 | 第45-46页 |
| ·从转化技术上看 | 第45页 |
| ·在转化时期上不同 | 第45-46页 |
| ·二者转化的靶细胞有差异 | 第46页 |
| ·GFP表达观察结果的讨论 | 第46-47页 |
| ·本研究主要发现和创新点 | 第47-49页 |
| ·本研究的不足和需要完善的地方 | 第49-50页 |
| ·本研究的应用前景 | 第50页 |
| ·未解答的问题及今后的研究方向 | 第50-53页 |
| ·农杆菌介导的植物遗传转化作用机理的揭示 | 第50页 |
| ·转化植株的发育状态 | 第50-51页 |
| ·表面活性剂和植物激素用量的筛选和配比 | 第51页 |
| ·开展植物病毒介导的Floral dip的研究 | 第51页 |
| ·利用Floral dip法构建不同作物的插入突变体库 | 第51-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 附录 | 第62-65页 |
| 1 玉米N6培养基配方 | 第62页 |
| 2 石蜡切片制作技术 | 第62-64页 |
| 3 玉米叶片总DNA提取方法(CTAB法) | 第64-65页 |
| 附图 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
