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西农萨能奶山羊脂肪酸合酶基因启动子的克隆、测序及活性区域分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 文献综述第12-25页
   ·脂肪酸合酶(FAS)的研究进展第12-17页
     ·脂肪酸合酶的概念及功能第12-14页
     ·脂肪酸合酶基因的研究进展第14-15页
     ·脂肪酸合酶的应用意义第15-16页
     ·脂肪酸合酶的启动子研究第16-17页
   ·启动子克隆方法研究进展第17-21页
     ·利用启动子探针载体筛选启动子第17-18页
     ·利用PCR 技术克隆启动子第18-20页
     ·启动子结构和功能的研究方法第20-21页
   ·生物信息学分析进展第21-22页
   ·雌激素与相关基因转录第22-23页
   ·本研究的目的与意义第23-25页
第二章 西农萨能奶山羊脂肪酸合酶(FAS)基因启动子序列全长的克隆与生物信息学分析第25-34页
   ·材料与方法第25-30页
     ·样品采集第25-26页
     ·主要试剂第26页
     ·引物设计与合成第26页
     ·西农萨能羊全血DNA 的提取第26-27页
     ·FAS 启动子的PCR 扩增第27页
     ·目的基因片段的纯化第27-28页
     ·目的基因的连接和转化第28页
     ·阳性克隆产物的鉴定第28-30页
     ·序列分析第30页
   ·结果与分析第30-33页
     ·FAS 基因启动子序列的克隆第30-32页
     ·FAS 基因启动子序列分析第32-33页
   ·讨论第33页
   ·小结第33-34页
第三章 西农萨能羊脂肪酸合酶(FAS)基因启动子缺失片段载体的构建与启动活性检测第34-44页
   ·材料和方法第34-41页
     ·样品采集第34页
     ·主要试剂第34页
     ·引物设计与合成第34-35页
     ·启动子缺失片段克隆载体的构建第35-36页
     ·启动子缺失片段荧光素酶表达载体的构建第36-37页
     ·启动子缺失片段荧光素酶表达载体的纯化第37-38页
     ·pSV-β-半乳糖苷酶对照载体的扩增及纯化第38页
     ·293、MCF-7 细胞的培养第38-39页
     ·PGL-3 重组质粒系列与pSV -β-半乳糖苷酶对照质粒共转染293、MCF-7 细胞第39-40页
     ·荧光素酶报告基因活性检测第40页
     ·β-半乳糖苷酶活性检测第40-41页
   ·结果与分析第41-43页
     ·西农萨能奶山羊脂肪酸合酶基因启动子缺失片段克隆载体的构建第41-42页
     ·西农萨能奶山羊脂肪酸合酶基因启动子缺失片段 PGL-3 表达载体的构建第42页
     ·西农萨能奶山羊脂肪酸合酶基因启动子的活性分析第42-43页
   ·讨论第43页
   ·小结第43-44页
第四章 雌激素对西农萨能羊脂肪酸合酶(FAS)启动子活性中心的作用影响研究第44-49页
   ·材料和方法第44-46页
     ·启动子活性中心序列克隆载体的构建第44-45页
     ·启动子活性中心序列荧光素酶表达载体的构建与纯化第45页
     ·pSV -β-半乳糖苷酶对照载体的扩增及纯化第45页
     ·293、MCF-7 细胞的培养第45页
     ·浓度梯度雌激素的配制第45页
     ·PGL-3 重组质粒系列与pSV -β-半乳糖苷酶对照质粒共转染293、MCF-7 细胞第45页
     ·浓度梯度雌激素作用于293 细胞第45页
     ·荧光素酶报告基因活性检测第45页
     ·β-半乳糖苷酶活性检测第45-46页
   ·结果与分析第46-47页
     ·西农萨能奶山羊脂肪酸合酶基因启动子活性中心克隆载体的构建第46页
     ·西农萨能奶山羊脂肪酸合酶基因启动子活性中心 PGL-3 表达载体的构建第46页
     ·雌激素对西农萨能奶山羊脂肪酸合酶基因启动子活性中心的影响第46-47页
   ·讨论第47-48页
   ·小结第48-49页
第五章 结论第49-50页
参考文献第50-55页
附录第55-65页
致谢第65-66页
作者简介第66页

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