| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 1 引言 | 第14-30页 |
| ·关于Ghrelin | 第14-21页 |
| ·Ghrelin研究概述 | 第14-17页 |
| ·Ghrelin对心血管作用及机制 | 第17-19页 |
| ·Ghrelin对生殖的作用及机制 | 第19-21页 |
| ·关于VEGF | 第21-26页 |
| ·VEGF研究概述 | 第21-24页 |
| ·VEGF对生殖的作用与机制 | 第24-25页 |
| ·VEGF与妇科疾病 | 第25-26页 |
| ·VEGF研究展望 | 第26页 |
| ·关于一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS) | 第26-27页 |
| ·NO和NOS的生物学作用 | 第26-27页 |
| ·NO和NOS与妊娠 | 第27页 |
| ·本课题目的和意义 | 第27-28页 |
| ·技术路线 | 第28-30页 |
| 2 实验一 正常妊娠早期绒毛和中晚期胎盘组织中Ghrelin与VEGF、Flt-1蛋白的表达研究 | 第30-44页 |
| ·材料与方法 | 第31-37页 |
| ·实验材料 | 第31-32页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-37页 |
| ·结果 | 第37-42页 |
| ·Ghrelin、VEGF及其受体Flt-1 RT-PCR检测结果 | 第37-39页 |
| ·Ghrelin、VEGF及其受体Flt-1免疫组化结果 | 第39-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 3 实验二 正常妊娠早期绒毛和中晚期胎盘组织中Ghrelin、VEGF、Flt-1 mRNA、的相对定量表达研究 | 第44-58页 |
| ·材料与方法 | 第44-49页 |
| ·早期绒毛和中晚期胎盘组织 | 第44页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第44-45页 |
| ·实时荧光定量PCR引物的设计及合成 | 第45页 |
| ·实时荧光定量PCR实验方法 | 第45-49页 |
| ·结果 | 第49-55页 |
| ·总RNA检测 | 第49页 |
| ·荧光定量PCR产物电泳检测结果 | 第49-50页 |
| ·Ghrelin、VEGF、Flt-1和GAPDH荧光定量PCR检测相关曲线 | 第50-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 4 实验三 正常妊娠不同时期绒毛胎盘组织匀浆中NOS、NO水平的变化研究 | 第58-64页 |
| ·材料和方法 | 第58-60页 |
| ·材料 | 第58-59页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第59页 |
| ·工作原理和方法 | 第59-60页 |
| ·统计学处理 | 第60页 |
| ·结果 | 第60-62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 5 实验四 反义抑制Ghrelin对体外HUVEC中VEGF、Flt-1表达和NOS、NO水平变化的影响 | 第64-83页 |
| ·人脐静脉内皮细胞HUVEC的培养 | 第64-66页 |
| ·实验材料 | 第64-65页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第65页 |
| ·人脐静脉内皮细胞HUVEC的培养 | 第65-66页 |
| ·反义技术对人脐静脉内皮细胞HUVEC Ghrelin抑制最佳条件的确定 | 第66-69页 |
| ·材料和方法 | 第66-69页 |
| ·反义抑制Ghrelin对培养的HUVEC中VEGF及其受体Flt-1表达的影响 | 第69-70页 |
| ·材料和方法 | 第69-70页 |
| ·实验数据处理 | 第70页 |
| ·反义抑制Ghrelin对HUVEC培养上清NOS、NO水平变化的影响 | 第70-71页 |
| ·材料和方法 | 第70-71页 |
| ·统计学处理 | 第71页 |
| ·结果 | 第71-81页 |
| ·人脐静脉内皮细胞HUVEC的培养结果 | 第71-73页 |
| ·不同时间、不同浓度反义抑制Ghrelin的结果 | 第73-76页 |
| ·反义抑制Ghrelin后VEGF及其受体Flt-1表达结果 | 第76-79页 |
| ·反义抑制Ghrelin后NO含量、NOS活力结果 | 第79-81页 |
| ·讨论 | 第81-82页 |
| ·小结 | 第82-83页 |
| 6 实验五 Ghrelin、VEGF、Flt-1及NO、NOS在妊高症发病机制中的探索性研究 | 第83-92页 |
| ·材料和方法 | 第84-85页 |
| ·材料 | 第84页 |
| ·方法 | 第84-85页 |
| ·统计学方法 | 第85页 |
| ·结果 | 第85-90页 |
| ·Ghrelin、VEGF、Ft-1蛋白在正常孕妇与妊高症孕妇胎盘中的分布和定位 | 第85-88页 |
| ·Ghrelin、VEGF、Flt-1 mRNA在正常孕妇与妊高症患者胎盘中表达 | 第88-89页 |
| ·正常孕妇与妊高症患者胎盘中NO含量、NOS活力结果 | 第89-90页 |
| ·讨论 | 第90-91页 |
| ·小结 | 第91-92页 |
| 7 全文总结 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-104页 |
| 附图 | 第104-106页 |
| 作者简介 | 第106-107页 |
