眼斑芫菁全长cDNA文库的构建及EST序列分析
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-9页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 1 绪论 | 第10-22页 |
| ·引言 | 第10页 |
| ·芫菁的生活史及人工养殖研究 | 第10-11页 |
| ·斑蝥素研究进展 | 第11-14页 |
| ·斑蝥素及其理化性质 | 第11-12页 |
| ·斑蝥素的生物合成及分布 | 第12-13页 |
| ·斑蝥应用研究 | 第13-14页 |
| ·cDNA 文库研究进展 | 第14-19页 |
| ·cDNA 文库 | 第14-15页 |
| ·cDNA 文库研究进展 | 第15-16页 |
| ·全长cDNA 文库的构建方法 | 第16-18页 |
| ·cDNA 文库的应用前景 | 第18-19页 |
| ·cDNA 文库技术的局限性 | 第19页 |
| ·EST（表达序列标签）技术简介 | 第19页 |
| ·课题学术和使用意义 | 第19-20页 |
| ·研究目的 | 第20页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第20-21页 |
| ·研究内容 | 第20页 |
| ·技术路线 | 第20-21页 |
| ·创新之处 | 第21-22页 |
| 2 眼斑芫菁成虫 cDNA 文库的构建 | 第22-39页 |
| ·材料与仪器 | 第22-24页 |
| ·供试昆虫 | 第22页 |
| ·菌株 | 第22页 |
| ·载体 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要仪器设备 | 第23-24页 |
| ·引物序列 | 第24页 |
| ·主要溶液的配制 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-33页 |
| ·眼斑芫菁的准备 | 第24-25页 |
| ·总RNA 的提取 | 第25页 |
| ·m RNA 的提取 | 第25-26页 |
| ·RT-PCR 合成ss-cDNA | 第26页 |
| ·LD-PCR 合成ds-cDNA | 第26-27页 |
| ·ds-cDNA 纯化 | 第27页 |
| ·sfiⅠ酶切ds-cDNA | 第27-28页 |
| ·酶切后ds-cDNA 片段的分级分离 | 第28页 |
| ·XL1-Blue 感受态细胞制备 | 第28页 |
| ·pDNR-LIB 载体制备 | 第28-31页 |
| ·cDNA 片段与pDNR-LIB 载体连接 | 第31页 |
| ·连接产物电转化XL1-Blue 感受态细胞 | 第31-32页 |
| ·文库原始滴度的计算 | 第32页 |
| ·文库重组率和插入片段大小检测 | 第32-33页 |
| ·扩增文库的滴度测定 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-36页 |
| ·总RNA 的提取 | 第33-34页 |
| ·ds-cDNA | 第34页 |
| ·pDNR-LIB 载体质量 | 第34-35页 |
| ·文库的重组率、文库滴度 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-39页 |
| ·眼斑芫菁的准备 | 第36-37页 |
| ·cDNA 文库的构建 | 第37-39页 |
| 3 EST 测序及分析 | 第39-49页 |
| ·材料与仪器 | 第39页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·主要试剂及配制溶液 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·测序引物 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-40页 |
| ·获得单克隆 | 第39页 |
| ·序列分析 | 第39-40页 |
| ·EST 序列功能分类 | 第40页 |
| ·眼斑芫菁系统进化树的构建 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-46页 |
| ·测序结果分析 | 第40-41页 |
| ·EST 序列相似性比较分析 | 第41-44页 |
| ·EST 序列功能分类 | 第44页 |
| ·眼斑芫菁系统进化树的构建 | 第44-46页 |
| ·讨论 | 第46-49页 |
| ·单克隆的获得 | 第46页 |
| ·文库序列分析 | 第46页 |
| ·部分序列功能分析 | 第46-49页 |
| 4 结论与展望 | 第49-50页 |
| ·结论 | 第49页 |
| ·展望 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 | 第57页 |
