适体筛选过程中检测方法的初步探索
| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-24页 |
| ·核酸适体研究进展 | 第10-13页 |
| ·核酸适体 | 第10-12页 |
| ·核酸适体的特点和优势 | 第12-13页 |
| ·核酸适体的筛选 | 第13-17页 |
| ·SELEX技术的原理 | 第13-14页 |
| ·SELEX技术筛选的基本程序 | 第14-17页 |
| ·核酸适体监测方法的研究进展 | 第17-24页 |
| ·ELISA检测 | 第17-18页 |
| ·斑点杂交 | 第18页 |
| ·流式细胞术 | 第18页 |
| ·基于纳米颗粒的检测方法 | 第18-19页 |
| ·适体传感器 | 第19-20页 |
| ·原子力显微镜 | 第20-21页 |
| ·分子信标 | 第21页 |
| ·荧光检测 | 第21-22页 |
| ·N-取代马来酰亚胺类巯基荧光探针检测 | 第22-24页 |
| 第二章 引言 | 第24-26页 |
| 第三章 B-内酰胺酶适体的筛选及检测 | 第26-36页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·相关试剂的配制 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-32页 |
| ·随机寡核苷酸文库的建立和引物的合成 | 第28-29页 |
| ·β-内酰胺酶的处理 | 第29页 |
| ·β-内酰胺酶核酸适体的筛选 | 第29页 |
| ·ssDNA和β-内酰胺酶结合特异性的测定 | 第29页 |
| ·目的寡核苷酸片段的扩增 | 第29-30页 |
| ·PCR产物的检测(PAGE) | 第30-31页 |
| ·核酸适体抑制β-内酰胺酶的活性实验 | 第31-32页 |
| ·结果 | 第32-33页 |
| ·PAGE电泳检测 | 第32页 |
| ·碘量法测定β-内酰胺酶的活性 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-36页 |
| ·碘量法检测核酸适体β-内酰胺酶抑制活性的原理 | 第33-34页 |
| ·PAGE电泳结果分析 | 第34页 |
| ·碘量法测定β-内酰胺酶的活性的结果分析 | 第34-36页 |
| 第四章 红细胞表面膜结构适体的筛选 | 第36-44页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36-37页 |
| ·相关试剂的配制 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-40页 |
| ·血液标本的采集 | 第37页 |
| ·血液标本的处理 | 第37-38页 |
| ·随机寡核苷酸文库的建立和引物的合成 | 第38页 |
| ·一步法筛选红细胞表面膜结构适体 | 第38-39页 |
| ·目的寡核酸片段的扩增 | 第39页 |
| ·PCR产物的检测(PAGE) | 第39页 |
| ·目的寡核酸片段的检测 | 第39-40页 |
| ·结果 | 第40-41页 |
| ·PAGE电泳结果 | 第40-41页 |
| ·血凝抑制结果 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-44页 |
| ·血凝抑制试验原理 | 第41页 |
| ·PAGE电泳结果分析 | 第41-42页 |
| ·血凝抑制结果分析 | 第42-44页 |
| 第五章 家蚕微孢子适体的筛选及检测 | 第44-56页 |
| ·实验材料 | 第44-45页 |
| ·主要仪器 | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44-45页 |
| ·相关试剂的配制 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-49页 |
| ·随机寡核苷酸文库的建立和引物的合成 | 第45-46页 |
| ·传感体系的优化 | 第46-47页 |
| ·目的寡核苷酸片段的扩增 | 第47-48页 |
| ·PCR产物的检测(PAGE) | 第48页 |
| ·与家蚕微孢子结合的寡核苷酸的筛选 | 第48页 |
| ·使用荧光探针检测筛选到的目的寡核苷酸 | 第48-49页 |
| ·结果 | 第49-53页 |
| ·传感体系的优化 | 第49-50页 |
| ·寡核苷酸洗脱次数的确定 | 第50页 |
| ·巯基引物洗脱次数的确定 | 第50页 |
| ·PAGE电泳结果 | 第50页 |
| ·荧光探针检测目的寡核苷酸 | 第50-53页 |
| ·讨论 | 第53-56页 |
| ·巯基荧光探针检测目的寡核苷酸的原理 | 第53页 |
| ·PAGE电泳分析 | 第53-54页 |
| ·荧光探针检测目的寡核苷酸的分析 | 第54-56页 |
| 第六章 全文讨论 | 第56-58页 |
| 第七章 结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 主要缩略语表 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
| 在校期间发表的论文 | 第70页 |
