热稳定性细菌葡聚糖内切酶的克隆与表征
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-19页 |
| ·研究背景 | 第10页 |
| ·纤维素 | 第10-12页 |
| ·纤维素酶 | 第12-16页 |
| ·纤维素酶系的组成 | 第12-13页 |
| ·葡聚糖内切酶 | 第13-14页 |
| ·纤维素酶的来源 | 第14-15页 |
| ·纤维素酶的获取方法 | 第15-16页 |
| ·纤维素酶的应用 | 第16页 |
| ·温度对酶的影响 | 第16-18页 |
| ·本文的研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 第2章 葡聚糖内切酶的检索与表达 | 第19-34页 |
| ·引言 | 第19页 |
| ·材料与方法 | 第19-23页 |
| ·来源菌株及表达体系 | 第19-20页 |
| ·试剂与仪器 | 第20页 |
| ·溶液与培养基的配制 | 第20-23页 |
| ·实验方法 | 第23-27页 |
| ·筛选方法 | 第23页 |
| ·基因组的提取、引物设计及目标基因PCR扩增 | 第23-24页 |
| ·表达载体的构建 | 第24-25页 |
| ·重组菌的培养及酶的诱导表达 | 第25-26页 |
| ·粗酶液的制备 | 第26页 |
| ·SDS-PAGE电泳操作 | 第26页 |
| ·葡萄糖标准曲线绘制 | 第26-27页 |
| ·酶活测定方法 | 第27页 |
| ·结果与分析 | 第27-33页 |
| ·候选目标基因 | 第27-29页 |
| ·基因组的提取、引物设计及目标基因PCR扩增 | 第29-31页 |
| ·表达载体的构建 | 第31-32页 |
| ·重组酶表达及测活结果 | 第32-33页 |
| ·本章小结 | 第33-34页 |
| 第3章 重组葡聚糖内切酶的纯化及初步表征 | 第34-42页 |
| ·引言 | 第34页 |
| ·实验材料与方法 | 第34-36页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-36页 |
| ·结果与讨论 | 第36-41页 |
| ·重组酶纯化结果 | 第36-37页 |
| ·重组酶基本性质 | 第37-41页 |
| ·本章小结 | 第41-42页 |
| 第4章 重组葡聚糖内切酶的酶学性质 | 第42-53页 |
| ·引言 | 第42页 |
| ·实验材料和设备 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-45页 |
| ·金属离子及化合物对酶活的影响 | 第42-43页 |
| ·有机溶剂对酶活的影响 | 第43页 |
| ·半衰期测定 | 第43页 |
| ·酶的底物吸附性 | 第43页 |
| ·底物谱的初步探索 | 第43-44页 |
| ·酶对天然底物的降解 | 第44-45页 |
| ·结果与讨论 | 第45-52页 |
| ·金属离子及化合物对酶活的影响 | 第45页 |
| ·有机溶剂对酶活的影响 | 第45-46页 |
| ·半衰期测定 | 第46页 |
| ·酶的底物吸附性 | 第46-49页 |
| ·底物谱的初步探索 | 第49-51页 |
| ·酶对天然底物的降解 | 第51-52页 |
| ·本章小结 | 第52-53页 |
| 第5章 全文总结与展望 | 第53-54页 |
| ·全文总结 | 第53页 |
| ·展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 攻读硕士期间撰写的论文 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
