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海南微藻种质资源收集、鉴定及高含油量微藻的筛选

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 前言第10-23页
   ·藻类的概述第10-11页
   ·藻类的演化及系统分类第11-13页
   ·微藻的研究现状第13-17页
     ·微藻种质资源研究第13-14页
     ·微藻的商业化利用现状第14页
     ·高脂微藻的筛选第14-15页
     ·微藻作为生物能源的开发第15页
     ·微藻规模化养殖中存在的主要问题第15-16页
     ·育种技术在微藻中的应用第16-17页
   ·18S rRNA在系统进化研究中的作用第17-18页
   ·微藻脂肪酸的研究第18-19页
     ·微藻脂肪酸的提取工艺第18页
     ·微藻脂肪酸成分分析第18-19页
   ·尼罗红在微藻研究中使用第19-20页
   ·本试验研究的目的意义第20-22页
   ·本研究技术路线第22-23页
2 材料与方法第23-39页
   ·试验材料第23-24页
     ·样品的采集第23-24页
     ·菌株和质粒第24页
   ·主要仪器和试剂第24-25页
     ·主要仪器第24页
     ·主要试剂第24-25页
   ·常用培养基的配置第25-28页
   ·实验方法第28-39页
     ·藻株的分离、纯化和培养第28-29页
       ·藻株的分离、纯化第28页
       ·藻株的培养和保存第28-29页
     ·藻株的形态学观察和鉴定第29-31页
       ·光学显微镜观察和鉴定第29页
       ·电子透射显微镜观察和鉴定第29-31页
     ·微藻分子生物学鉴定第31-35页
       ·微藻基因组DNA的提取第31-32页
       ·微藻18S rDNA、16S rDNA基因的PCR扩增和核酸序列测定第32-35页
       ·核酸序列数据的分析和系统树构建第35页
     ·高含油量微藻的筛选第35-38页
       ·利用尼罗红染色法测定微藻的含油量第35-37页
       ·直接提取法快速测定微藻含油量第37页
       ·尼罗红染色与直接提取相结合筛选高含油量微藻第37-38页
     ·微藻脂肪酸成分分析第38-39页
       ·样品处理第38页
       ·脂肪酸的组成和含量分析第38-39页
3 结果与分析第39-62页
   ·微藻种质资源的收集第39页
   ·微藻基因组DNA的提取第39-41页
   ·微藻的分类与鉴定第41-43页
     ·HKJ-1的种属鉴定第41页
     ·HKJ-2的种属鉴定第41页
     ·HKS-8的种属鉴定第41页
     ·HKS-7的种属鉴定第41-42页
     ·HKS-1的种属鉴定第42页
     ·HKS-9的种属鉴定第42页
     ·HD-1的种属鉴定第42-43页
     ·HKS-5的种属鉴定第43页
   ·一株新种(DWZ-8)的分离、纯化与鉴定第43-54页
     ·DWZ-8的细胞形态学观察与鉴定第43-48页
       ·DWZ-8的分离培养及光学显微镜观察第43-47页
       ·DWZ-8的电子透射显微镜观察第47-48页
     ·DWZ-8的18S rDNA的结构及其与近缘种的比较第48-51页
     ·DWZ-8的16S rDNA的结构及其与近缘种的比较第51-52页
     ·DWZ-8的系统发育分析第52-54页
   ·高含油量微藻的筛选第54-60页
     ·利用尼罗红染色法筛选高含油量微藻第54-58页
       ·尼罗红荧光染料用量的确定第54页
       ·尼罗红荧光染料染色时间的确定第54-55页
       ·试验材料的细胞密度确定第55页
       ·染色前二甲基亚砜添加量的确定第55-56页
       ·尼罗红染色的荧光显微镜观察第56-58页
     ·从微藻中提取粗脂的方法比较第58-60页
       ·三株微藻的生物量第58页
       ·三株微藻的粗脂含量第58-59页
       ·抽提时间的比较第59页
       ·抽提方法的比较第59-60页
   ·微藻脂肪酸成分分析第60-62页
     ·海南橡胶藻的脂肪酸成分分析第60-61页
     ·藻株Hhw的脂肪酸成分分析第61-62页
4 讨论第62-65页
   ·关于海南微藻种质资源的收集及后续资源库建立的研究第62页
   ·细胞生物学与分子生物学结合对微藻种属鉴定的必要性第62页
   ·关于电子透射显微镜微藻样品制备第62-63页
   ·关于高含油量微藻筛选第63页
   ·关于微藻作为生物质能源的开发第63-64页
   ·关于微藻脂肪酸的成分第64-65页
5 结论第65-66页
附录1:一些藻类的显微照片第66-68页
附录2:DWZ-8的18S rDNA、16S rDNA序列第68-69页
附录3:部分试剂的配制第69-70页
参考文献第70-77页
致谢第77页

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