| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1. 炭疽芽孢杆菌及其致病机理 | 第11-13页 |
| ·生物学特性和流行病学 | 第11页 |
| ·致病物质 | 第11-12页 |
| ·荚膜 | 第12页 |
| ·炭疽毒素 | 第12页 |
| ·致病机制 | 第12-13页 |
| 2. 炭疽杆菌疫苗的研究 | 第13-15页 |
| ·炭疽杆菌疫苗的研究现状 | 第13-14页 |
| ·疫苗研究的问题和展望 | 第14-15页 |
| 3. 蛋白质组学简介 | 第15-16页 |
| ·蛋白质组学的研究背景和意义 | 第15-16页 |
| ·蛋白质组学的研究内容和技术 | 第16页 |
| 4. 炭疽芽孢杆菌的蛋白质组学研究 | 第16-18页 |
| 5. 本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 第二章 炭疽杆菌芽孢的收集及多克隆抗体的制备 | 第20-28页 |
| 1.材料 | 第20页 |
| ·菌株 | 第20页 |
| ·主要化学试剂与器材 | 第20页 |
| 2. 方法 | 第20-24页 |
| ·芽孢的收集和纯化 | 第20-21页 |
| ·芽孢的复红美兰染色 | 第21页 |
| ·芽孢悬液计数 | 第21页 |
| ·动物免疫 | 第21-22页 |
| ·PA-D4融合蛋白的表达 | 第22页 |
| ·抗炭疽血清的制备及血清效价测定 | 第22-23页 |
| ·抗血清的分离 | 第22-23页 |
| ·间接ELISA测定血清效价 | 第23页 |
| ·抗体特异性的检测 | 第23-24页 |
| 3. 结果与分析 | 第24-26页 |
| ·芽孢的复红美兰染色 | 第24页 |
| ·芽孢计数 | 第24-25页 |
| ·PA-D4融合蛋白的表达 | 第25页 |
| ·抗体效价的测定 | 第25页 |
| ·抗血清的免疫印记分析 | 第25-26页 |
| 4. 讨论 | 第26-28页 |
| 第三章 炭疽杆菌A16R全菌体和芽孢免疫原性蛋白的研究 | 第28-49页 |
| 1. 材料 | 第28-29页 |
| ·菌株 | 第28页 |
| ·主要化学试剂与耗材 | 第28-29页 |
| ·主要仪器与分析软件 | 第29页 |
| 2. 方法 | 第29-36页 |
| ·细菌培养 | 第29页 |
| ·蛋白样品的准备 | 第29-30页 |
| ·营养体蛋白样品制备 | 第29-30页 |
| ·芽孢蛋白的制备 | 第30页 |
| ·双向电泳 | 第30-32页 |
| ·蛋白样品纯化 | 第30-31页 |
| ·等电聚焦 | 第31页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)的配制 | 第31-32页 |
| ·胶条的平衡与转移 | 第32页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第32页 |
| ·考马斯亮蓝染色和脱色 | 第32页 |
| ·图像扫描与分析 | 第32页 |
| ·半干转印 | 第32-33页 |
| ·免疫印迹 | 第33页 |
| ·胶内酶切 | 第33-34页 |
| ·胰酶解肽段混合物的MALDI-TOF/TOF质谱检测 | 第34页 |
| ·仪器 | 第34页 |
| ·点靶 | 第34页 |
| ·检测 | 第34页 |
| ·数据库查询 | 第34-35页 |
| ·蛋白质表达情况的分析 | 第35页 |
| ·预测炭疽杆菌双向电泳图中蛋白分布 | 第35-36页 |
| 3. 结果与分析 | 第36-43页 |
| ·炭疽杆菌A16R营养体蛋白的双向电泳 | 第36页 |
| ·芽孢蛋白的双向电泳情况 | 第36页 |
| ·免疫印迹结果 | 第36-42页 |
| ·A16R营养体蛋白免疫蛋白质点的质谱鉴定结果 | 第36-41页 |
| ·芽孢蛋白免疫蛋白质点的质谱鉴定结果 | 第41页 |
| ·目前已经有文献报导具有免疫原性的蛋白(Emrah,2008;Chitlaru,2007;Mukhopadhyay,2009;Huang,2004;Ariel,2003;Liu,2004) | 第41-42页 |
| ·所鉴定蛋白质的细胞功能分类情况 | 第42-43页 |
| ·所鉴定蛋白质的细胞定位情况 | 第43页 |
| 4. 讨论 | 第43-49页 |
| ·炭疽杆菌相关的免疫原性蛋白 | 第43-46页 |
| ·免疫蛋白质组学技术的优势与不足 | 第46-49页 |
| 第四章 总结和展望 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 附录1 实验中所用仪器设备 | 第58-59页 |
| 附录2 培养基和试剂的配制 | 第59-61页 |
| 附录3 实验中所用试剂 | 第61-62页 |
| 附录4 所鉴定到的蛋白的相关信息 | 第62-67页 |
| 附录5 讨论中免疫原性蛋白点的双向电泳图和Western blotting曝光图 | 第67-69页 |
| 附录6 发表文章 | 第69页 |
