| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-25页 |
| 1.1 植物寄生线虫简介 | 第13页 |
| 1.2 大豆孢囊线虫 | 第13-19页 |
| 1.2.1 大豆孢囊线虫的发生与分布 | 第13-14页 |
| 1.2.2 大豆孢囊线虫的生物学特性 | 第14-15页 |
| 1.2.3 大豆孢囊线虫的危害症状 | 第15-16页 |
| 1.2.4 大豆孢囊线虫的防治方法 | 第16-19页 |
| 1.3 线虫的先天免疫反应 | 第19-22页 |
| 1.3.1 主要免疫途径 | 第20-21页 |
| 1.3.2 抗菌肽和抗菌蛋白 | 第21-22页 |
| 1.4 溶菌酶进展 | 第22-23页 |
| 1.4.1 无脊椎型溶菌酶 | 第22-23页 |
| 1.4.2 原生质型溶菌酶 | 第23页 |
| 1.5 本研究目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 大豆孢囊线虫溶菌酶基因的验证及分析 | 第25-33页 |
| 2.1 材料和方法 | 第25-29页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第25页 |
| 2.1.2 试剂和耗材 | 第25页 |
| 2.1.3 试剂与培养基的制备 | 第25页 |
| 2.1.4 大豆孢囊线虫cDNA的合成 | 第25-27页 |
| 2.1.5 大豆孢囊线虫溶菌酶基因cDNA验证 | 第27-29页 |
| 2.1.6 溶菌酶基因序列分析 | 第29页 |
| 2.2 结果与分析 | 第29-31页 |
| 2.2.1 溶菌酶基因c DNA验证 | 第29页 |
| 2.2.2 溶菌酶基因序列分析及系统发育树分析 | 第29-31页 |
| 2.3 小结与讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 大豆孢囊线虫溶菌酶基因表达特性分析 | 第33-42页 |
| 3.1 材料和方法 | 第33-37页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第33页 |
| 3.1.2 试剂和耗材 | 第33页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第33页 |
| 3.1.4 原位杂交 | 第33-35页 |
| 3.1.5 诱导表达分析 | 第35-37页 |
| 3.2 结果与分析 | 第37-40页 |
| 3.2.1 溶菌酶基因组织定位分析 | 第37-39页 |
| 3.2.2 溶菌酶基因诱导表达分析 | 第39-40页 |
| 3.3 小结与讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 大豆孢囊线虫溶菌酶基因体外RNAi功能研究 | 第42-50页 |
| 4.1 材料和方法 | 第42-46页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第42页 |
| 4.1.2 试剂和耗材 | 第42页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第42-43页 |
| 4.1.4 溶菌酶基因dsRNA的合成 | 第43-45页 |
| 4.1.5 大豆孢囊线虫体外RNAi实验 | 第45页 |
| 4.1.6 qRT-PCR检测dsRNA处理后溶菌酶基因转录水平 | 第45-46页 |
| 4.2 结果与分析 | 第46-49页 |
| 4.2.1 溶菌酶基因dsRNA合成 | 第46页 |
| 4.2.2 干扰后溶菌酶基因转录水平检测 | 第46-47页 |
| 4.2.3 体外RNA干扰后线虫存活率的检测 | 第47-49页 |
| 4.3 小结与讨论 | 第49-50页 |
| 第五章 溶菌酶基因重组蛋白抑菌效果测定 | 第50-60页 |
| 5.1 材料和方法 | 第50-56页 |
| 5.1.0 实验材料和试剂 | 第50页 |
| 5.1.1 试剂与培养基的制备 | 第50页 |
| 5.1.2 目的片段的获得 | 第50-51页 |
| 5.1.3 植物表达载体构建 | 第51-52页 |
| 5.1.4 烟草注射和蛋白提取 | 第52-54页 |
| 5.1.5 溶菌酶蛋白水平检测 | 第54-55页 |
| 5.1.6 溶菌酶蛋白抑菌活性检测 | 第55-56页 |
| 5.2 结果与分析 | 第56-59页 |
| 5.2.0 溶菌酶蛋白水平表达检测结果 | 第56-57页 |
| 5.2.1 统计菌落数法测定溶菌酶重组蛋白基因抑菌活性 | 第57-58页 |
| 5.2.2 浊度测定法测定溶菌酶重组蛋白基因抑菌活性 | 第58-59页 |
| 5.3 小结与讨论 | 第59-60页 |
| 第六章 全文结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简历 | 第69页 |
