| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-21页 |
| 1.1 激发子的研究现状 | 第14页 |
| 1.2 植物诱导抗病性的机制研究 | 第14-16页 |
| 1.3 萜类次生代谢产物与植物抗性 | 第16-17页 |
| 1.4 转录组测序技术及应用 | 第17-18页 |
| 1.4.1 转录组测序技术 | 第17页 |
| 1.4.2 转录组测序技术在植物抗病机制研究中的应用 | 第17-18页 |
| 1.5 蛋白激发子PEVD1 的研究背景 | 第18页 |
| 1.5.1 激发子PevD1 的分离及功能研究 | 第18页 |
| 1.5.2 PevD1 诱导植物抗病的机制研究 | 第18页 |
| 1.6 NRP蛋白的研究背景 | 第18-19页 |
| 1.7 本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 1.8 本研究技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 PEVD1 的真核表达与纯化 | 第21-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 质粒和菌株 | 第21页 |
| 2.1.2 试剂和仪器 | 第21页 |
| 2.1.3 培养基与试剂配制 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-26页 |
| 2.2.1 PevD1 真核表达载体的构建 | 第22-24页 |
| 2.2.2 酵母感受态的制备、转化 | 第24页 |
| 2.2.3 PevD1 的真核表达 | 第24页 |
| 2.2.4 PevD1 的纯化 | 第24-25页 |
| 2.2.5 PevD1 蛋白浓度的测定 | 第25页 |
| 2.2.6 PevD1的Western-blot鉴定 | 第25-26页 |
| 2.2.7 真核表达的PevD1 诱导本生烟HR的活性检测 | 第26页 |
| 2.3 实验结果 | 第26-27页 |
| 2.3.1 PevD1 真核表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.3.2 PevD1 的表达、纯化、鉴定及活性检测 | 第27页 |
| 2.4 本章小结 | 第27-29页 |
| 第三章 NBNRP1 正调控PEVD1 诱导本生烟产生的防御反应和系统抗性 | 第29-38页 |
| 3.1 实验材料 | 第29-30页 |
| 3.1.1 菌株和植物材料 | 第29页 |
| 3.1.2 实验试剂和仪器 | 第29页 |
| 3.1.3 培养基与试剂配制 | 第29-30页 |
| 3.2 实验方法 | 第30-33页 |
| 3.2.1 植物培养 | 第30页 |
| 3.2.2 DAB组织染色法检测过氧化氢的沉积 | 第30页 |
| 3.2.3 PevD1 诱导胼胝质的产生 | 第30页 |
| 3.2.4 PevD1 诱导MAPK级联反应的激活 | 第30-31页 |
| 3.2.5 PevD1 诱导本生烟对 TMV 的抗性实验 | 第31-32页 |
| 3.2.6 PevD1 诱导本生烟对大丽轮枝菌的抗性实验 | 第32-33页 |
| 3.3 结果与分析 | 第33-37页 |
| 3.3.1 过氧化氢沉积的检测 | 第33-34页 |
| 3.3.2 胼胝质沉淀的观察 | 第34页 |
| 3.3.3 MAPK 级联反应激活检测 | 第34-35页 |
| 3.3.4 PevD1诱导本生烟对TMV的抗性实验 | 第35-36页 |
| 3.3.5 PevD1诱导本生烟对大丽轮枝菌的抗性实验 | 第36-37页 |
| 3.4 本章小结 | 第37-38页 |
| 第四章 转录组测序 | 第38-52页 |
| 4.1 实验材料 | 第38页 |
| 4.1.1 激发子与植物材料 | 第38页 |
| 4.1.2 实验试剂和仪器 | 第38页 |
| 4.2 实验方法 | 第38-42页 |
| 4.2.1 植株的准备 | 第38页 |
| 4.2.2 PevD1 处理本生烟 | 第38页 |
| 4.2.3 取样、RNA的提取及质量检测 | 第38-40页 |
| 4.2.4 文库构建及测序 | 第40页 |
| 4.2.5 测序数据的过滤及参考基因组的比对 | 第40-41页 |
| 4.2.6 基因表达定量 | 第41页 |
| 4.2.7 差异表达基因的筛选 | 第41页 |
| 4.2.8 差异表达基因的GO分析 | 第41页 |
| 4.2.9 差异表达基因的Pathway分析 | 第41-42页 |
| 4.3 结果及分析 | 第42-51页 |
| 4.3.1 RNA的质量检测 | 第42页 |
| 4.3.2 测序数据的质控和参考基因组的比对 | 第42页 |
| 4.3.3 样品的相关性分析 | 第42-43页 |
| 4.3.4 差异表达基因(DEGs)的筛选及功能分析 | 第43-51页 |
| 4.4 本章小结 | 第51-52页 |
| 第五章 转录组差异表达基因的定量验证 | 第52-59页 |
| 5.1 实验材料 | 第52页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第52页 |
| 5.1.2 实验试剂和仪器 | 第52页 |
| 5.2 实验方法 | 第52-54页 |
| 5.2.1 qPCR引物设计 | 第52-53页 |
| 5.2.2 RNA提取及反转录 | 第53页 |
| 5.2.3 qPCR反应体系及程序 | 第53页 |
| 5.2.4 qPCR结果统计与分析 | 第53-54页 |
| 5.3 结果及分析 | 第54-57页 |
| 5.3.1 转录组中抗病相关差异表达基因的验证 | 第54-55页 |
| 5.3.2 倍半萜类次生代谢产物合成相关基因的qPCR验证 | 第55-57页 |
| 5.4 本章小结 | 第57-59页 |
| 第六章 全文结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 附录 | 第67-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 作者简历 | 第82页 |
