| 个人简历 | 第3-8页 |
| 摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 前言 | 第15-23页 |
| 第一章 间充质干细胞微球(MSC microspheres,MMs)的构建和N-cadherin蛋白介导的细胞间作用调控软骨分化 | 第23-49页 |
| 1 材料与方法 | 第23-33页 |
| 1.1 试剂耗材 | 第23-24页 |
| 1.2 实验仪器 | 第24页 |
| 1.3 实验方法 | 第24-33页 |
| 1.3.1 试剂配置 | 第24-25页 |
| 1.3.2 MSCs的提取与培养 | 第25-26页 |
| 1.3.3 细胞培养,传代与冻存 | 第26页 |
| 1.3.4 细胞复苏 | 第26页 |
| 1.3.5 N-cad蛋白的封闭及封闭效率的检测 | 第26-27页 |
| 1.3.6 MMs的制备 | 第27页 |
| 1.3.7 MMs的表征 | 第27-32页 |
| 1.3.8 统计分析 | 第32-33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-48页 |
| 2.1 免疫荧光法检测抗体封闭率 | 第33页 |
| 2.2 细胞微球实物图 | 第33-34页 |
| 2.3 细胞微球宏观形貌 | 第34-35页 |
| 2.4 细胞活性 | 第35-36页 |
| 2.5 DNA与GAG定量检测 | 第36-39页 |
| 2.6 细胞骨架染色 | 第39-40页 |
| 2.7 组织化学染色 | 第40-43页 |
| 2.8 免疫组织化学染色 | 第43-46页 |
| 2.9 软骨相关基因的表达 | 第46-48页 |
| 3 本章小结 | 第48-49页 |
| 第二章 胶原水凝胶包裹细胞微球(CMMs)的构建及细胞-微环境相互作用对MSC成软骨分化的影响 | 第49-67页 |
| 1 材料与方法 | 第49-56页 |
| 1.1 试剂耗材 | 第49-50页 |
| 1.2 实验仪器 | 第50页 |
| 1.3 实验方法 | 第50-56页 |
| 1.3.1 试剂配置 | 第50页 |
| 1.3.2 硅胶模具的制备 | 第50-51页 |
| 1.3.3 CMMs的构建 | 第51页 |
| 1.3.4 CMMs特征表征 | 第51-55页 |
| 1.3.5 琼脂糖水凝胶包裹细胞微球的构建及切片染色 | 第55-56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-66页 |
| 2.1 硅胶模具制备CMMs | 第56-57页 |
| 2.2 CMMs细胞骨架染色 | 第57-58页 |
| 2.3 CMMA-组织化学染色 | 第58-60页 |
| 2.4 CMMA+组织化学染色 | 第60-61页 |
| 2.5 琼脂糖水凝胶包裹细胞微球组织化学染色 | 第61-62页 |
| 2.6 CMMs免疫组织化学染色 | 第62-63页 |
| 2.7 基因表达 | 第63-66页 |
| 3 本章小结 | 第66-67页 |
| 第三章 细胞间相互作用和细胞-微环境相互作用协同调控MSC成软骨分化 | 第67-82页 |
| 1 材料与方法 | 第67-72页 |
| 1.1 试剂耗材 | 第67-68页 |
| 1.2 实验仪器 | 第68页 |
| 1.3 实验方法 | 第68-72页 |
| 1.3.1 CCK8法检测多聚赖氨酸(PLL)细胞毒性 | 第68-69页 |
| 1.3.2 qRT-PCR检测基因CDH2的表达 | 第69-71页 |
| 1.3.3 MM+PLL切片染色 | 第71页 |
| 1.3.4 MM+PLL软骨相关基因表达 | 第71页 |
| 1.3.5 CMM+PLL组织学表征 | 第71-72页 |
| 1.3.6 CMM+PLL-TGF组织学表征 | 第72页 |
| 2 结果与分析 | 第72-81页 |
| 2.1 PLL细胞毒性 | 第72-73页 |
| 2.2 CDH2基因表达 | 第73-74页 |
| 2.3 MM+PLL组织学表征 | 第74-76页 |
| 2.4 MM+PLL基因表达检测 | 第76-77页 |
| 2.5 CMM+PLL组织学表征 | 第77-79页 |
| 2.6 CMM+PLL-TGF组织学表征 | 第79-81页 |
| 3 本章小结 | 第81-82页 |
| 全文总结 | 第82-84页 |
| 附录：主要英文缩略词 | 第84-85页 |
| 综述 | 第85-90页 |
| 参考文献 | 第90-103页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104页 |
