| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstaract | 第12-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-26页 |
| 第一节 新生儿筛查概述 | 第14-18页 |
| 1.1 新生儿疾病筛查目的与意义 | 第14页 |
| 1.2 新生儿疾病筛查流程 | 第14-16页 |
| 1.3 国内外新生儿疾病筛查现状 | 第16-17页 |
| 1.4 PCR技术在在新生儿疾病筛查中的优势 | 第17-18页 |
| 第二节 实时荧光PCR技术概述 | 第18-20页 |
| 2.1 实时荧光PCR技术简介 | 第18页 |
| 2.2 实时PCR的化学基础 | 第18-19页 |
| 2.3 实时荧光PCR技术的应用 | 第19-20页 |
| 第三节 本论文研究内容 | 第20-22页 |
| 参考文献 | 第22-26页 |
| 第二章 干血斑提取方法的研究 | 第26-37页 |
| 第一节 引言 | 第26-28页 |
| 1.1 干血斑标本概述 | 第26-27页 |
| 1.2 提取DNA的不同方法 | 第27页 |
| 1.3 课题的提出 | 第27-28页 |
| 第二节 材料和方法 | 第28-29页 |
| 2.1 样本来源 | 第28页 |
| 2.2 仪器自动提取方法 | 第28-29页 |
| 2.3 手工提取方法 | 第29页 |
| 第三节 结果 | 第29-33页 |
| 3.1 不同提取方法的比较 | 第29-31页 |
| 3.2 血斑标本浓度考察 | 第31-32页 |
| 3.3 PCR长片段扩增 | 第32页 |
| 3.4 多重实时荧光定量PCR | 第32-33页 |
| 第四节 讨论 | 第33-35页 |
| 参考文献 | 第35-37页 |
| 第三章 多重实时荧光定量PCR用于重症联合免疫缺陷病检测 | 第37-61页 |
| 第一节 引言 | 第37-42页 |
| 1.1 重症联合免疫缺陷病简介 | 第37页 |
| 1.2 重症联合免疫缺陷病遗传机制及临床表现 | 第37-40页 |
| 1.3 重症联合免疫缺陷病筛查的发展 | 第40-42页 |
| 1.4 本课题的提出 | 第42页 |
| 第二节 材料和方法 | 第42-47页 |
| 2.1 质粒标准品的构建及定量 | 第42-44页 |
| 2.2 实验设计 | 第44-45页 |
| 2.3 多重实时荧光定量体系建立 | 第45-46页 |
| 2.4 多重实时荧光定量反应体系定量能力考察 | 第46-47页 |
| 2.5 样本来源与标本提取方法 | 第47页 |
| 2.6 标本检测与数据分析 | 第47页 |
| 第三节 结果 | 第47-55页 |
| 3.1 质粒的构建与定量 | 第47-48页 |
| 3.2 质粒混合考察 | 第48-49页 |
| 3.3 多重RT-qPCR能力考查 | 第49-51页 |
| 3.4 标本检测与数据分析 | 第51-55页 |
| 第四节 讨论 | 第55-58页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 第四章 多色探针熔解曲线分析用于CYP21A2常见突变检测 | 第61-95页 |
| 第一节 引言 | 第61-65页 |
| 1.1 先天性肾上腺皮质增生症概述 | 第61页 |
| 1.2 21-羟化酶缺乏症简介 | 第61-62页 |
| 1.3 21-羟化酶缺乏症的基因特征 | 第62-63页 |
| 1.4 CYP21A2常见的点突变 | 第63-64页 |
| 1.5 CYP21A2点突变检测方法 | 第64页 |
| 1.6 课题的提出 | 第64-65页 |
| 第二节 材料和方法 | 第65-74页 |
| 2.1 阳性质粒的构建 | 第65-67页 |
| 2.2 质粒DNA片段的混合 | 第67-68页 |
| 2.3 基因组DNA的提取与定量 | 第68页 |
| 2.4 实验设计 | 第68-70页 |
| 2.5 人工合成的靶序列熔解曲线分析 | 第70页 |
| 2.6 CYP21A2基因检测体系建立 | 第70-73页 |
| 2.7 CYP21A2基因检测体系分析 | 第73页 |
| 2.8 测序验证 | 第73-74页 |
| 2.9 标本检测与数据分析 | 第74页 |
| 第三节 结果 | 第74-88页 |
| 3.1 质粒的构建 | 第74-75页 |
| 3.2 人工合成的靶序列熔解曲线分析考察 | 第75页 |
| 3.3 CYP21A2两管检测体系的建立 | 第75-78页 |
| 3.4 两轮PCR检测体系分析 | 第78-80页 |
| 3.5 临床标本检测 | 第80-88页 |
| 第四节 讨论 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-95页 |
| 英文缩写索引 | 第95-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |