| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 附录清单 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-29页 |
| 引言 | 第14页 |
| ·我国水资源污染现状 | 第14-15页 |
| ·我国长三角地区饮用水源水体治理的限制因素 | 第15页 |
| ·现今主要的水资源环境质量评价方法 | 第15-18页 |
| ·生物修复法研究现状 | 第18-20页 |
| ·分子生物学技术在水资源原位修复中的运用 | 第20-23页 |
| ·反硝化菌株在水体修复中的运用及其作用酶学研究 | 第23-28页 |
| ·本研究的目的、意义及主要内容 | 第28-29页 |
| 第二章 水源水体中耐酸性反硝化功能菌株的分离、驯化及鉴定 | 第29-39页 |
| 引言 | 第29页 |
| ·实验材料与方法 | 第29-33页 |
| ·菌种来源 | 第29-30页 |
| ·培养基 | 第30页 |
| ·硝氮利用菌种的筛选 | 第30页 |
| ·反硝化优势菌株的驯化及筛选 | 第30-31页 |
| ·产气菌株气体实验 | 第31页 |
| ·菌株的紫外诱变 | 第31-32页 |
| ·诱变菌株的耐酸性驯化 | 第32页 |
| ·诱变菌株不同pH值下对硝酸盐去除能力的检测 | 第32页 |
| ·诱变所得反硝化优势菌株的鉴定 | 第32-33页 |
| ·分析测试方法 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-37页 |
| ·菌株的筛选结果 | 第33-34页 |
| ·反硝化优势菌株的驯化筛选结果 | 第34页 |
| ·菌株的紫外诱变及耐酸性驯化 | 第34-35页 |
| ·诱变菌株的鉴定 | 第35-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| ·本章小结 | 第38-39页 |
| 第三章 复合菌群的构建以及反应器结构设计、运用和分析 | 第39-57页 |
| 引言 | 第39页 |
| ·实验材料与方法 | 第39-46页 |
| ·复合菌群的构建 | 第39-40页 |
| ·实验装置 | 第40-41页 |
| ·反应器的运行 | 第41-42页 |
| ·生物强化技术 | 第42页 |
| ·反应器进、出水水质分析监测 | 第42-43页 |
| ·反应器内生物膜特性研究 | 第43-44页 |
| ·强化反应器运行期间生物膜上微生物多样性的DGGE分析 | 第44-46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-54页 |
| ·反应器进出水水质分析 | 第46-50页 |
| ·反应器内生物膜特性研究 | 第50-54页 |
| ·本章小结 | 第54-57页 |
| 第四章 硝酸盐还原酶基因工程菌构建、影响因子分析及应用 | 第57-84页 |
| 引言 | 第57页 |
| 第一节 周质硝酸盐还原酶催化亚基napA基因的克隆及工程菌MZQ-MH01的构建 | 第57-68页 |
| ·实验材料与方法 | 第57-62页 |
| ·实验菌株、质粒及试剂 | 第57-58页 |
| ·主要化学试剂及培养基 | 第58页 |
| ·优化的基因组提取方法 | 第58-59页 |
| ·引物设计及合成 | 第59页 |
| ·PCR反应体系及扩增程序 | 第59-60页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第60页 |
| ·周质硝酸盐还原酶催化亚基napA基因于T克隆载体中的连接转化 | 第60-61页 |
| ·重组质粒的验证鉴定 | 第61页 |
| ·周质硝酸盐还原酶催化亚基napA基因于pET-28α(+)载体中的连接转化 | 第61页 |
| ·周质硝酸盐还原酶催化亚基napA基因在E.coli BL21中的诱导表达 | 第61-62页 |
| ·重组菌株蛋白的SDS-PAGE | 第62页 |
| ·结果与分析 | 第62-68页 |
| ·napA序列的扩增与测序 | 第62-63页 |
| ·所得目的napA基因序列分析 | 第63-64页 |
| ·T克隆中重组质粒的验证 | 第64-66页 |
| ·pET-28a vector中重组质粒的验证 | 第66-67页 |
| ·含重组质粒pET-28a-napA的表达菌株E.coli BL 21的构建 | 第67页 |
| ·工程菌株pET-28a-napA-E.coli BL 21 MZQ-MH01的全细胞蛋白电泳检测 | 第67-68页 |
| ·本节小结 | 第68页 |
| 第二节 工程菌株pET-28a-napA-E.coli BL 21 MZQ-MH01硝酸盐降解能力测定及作用相关影响因子的分析 | 第68-73页 |
| ·实验材料和方法 | 第68-69页 |
| ·实验菌株、试剂及培养基 | 第68页 |
| ·实验定量检测方法 | 第68-69页 |
| ·结果与分析 | 第69-72页 |
| ·工程菌株MZQ-MH01不同pH值下硝酸盐还原能力测定 | 第69-70页 |
| ·氨氮/硝氮对工程菌株MZQ-MH01硝酸盐还原能力的影响 | 第70页 |
| ·金属离子对工程菌株MZQ-MH01硝酸盐还原能力的影响 | 第70-72页 |
| ·本节小结 | 第72-73页 |
| 第三节 工程菌株pET-28a-napA-E.coli BL 21 MZQ-MH01激活水体自净能力的应用 | 第73-84页 |
| ·实验材料和方法 | 第73-77页 |
| ·实验装置与装置工作流程 | 第73-74页 |
| ·实验材料 | 第74页 |
| ·含工程菌株pET-28a-napA-E.coli BL 21 MZQ-MH01的微生物包埋技术 | 第74-75页 |
| ·PCR技术实时监测工程菌株MZQ-MH01的定殖 | 第75-77页 |
| ·反应器水质分析监测 | 第77页 |
| ·结果与分析 | 第77-83页 |
| ·包埋小球制备的参数优化 | 第77页 |
| ·反应器的运行 | 第77-78页 |
| ·PCR技术实时检测包埋菌株水体中的定殖 | 第78-79页 |
| ·反应器水质指标监测及分析 | 第79-83页 |
| ·本节小结 | 第83-84页 |
| 论文主要结论 | 第84-85页 |
| 论文创新点 | 第85页 |
| 论文不足与展望 | 第85-87页 |
| 信息引用及参考文献 | 第87-94页 |
| 附录1 Aeromonas hydrophila MZQ-CS01中周质硝酸盐还原酶催化亚基mapA序列及编码氨基酸序列(Accession No.GU083585) | 第94-95页 |
| 附录2 实验中所用的主要仪器设备 | 第95-96页 |
| 附录3 研究中涉及的主要水质分析监测方法 | 第96-97页 |
| 攻读硕士学位期间论文撰写与发表情况 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98页 |
