| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 主要符号表 | 第12-13页 |
| 第1章 引言 | 第13-27页 |
| 1.1 喹诺酮类的简述 | 第13-17页 |
| 1.1.1 喹诺酮类物质的发展 | 第13-14页 |
| 1.1.2 几种重要的喹诺酮类药物理化性质 | 第14-16页 |
| 1.1.3 喹诺酮类药物残留问题 | 第16页 |
| 1.1.4 喹诺酮类药物不良反应表现 | 第16页 |
| 1.1.5 喹诺酮类最大限量规定 | 第16-17页 |
| 1.1.6 喹诺酮药物的抗菌机制 | 第17页 |
| 1.2 喹诺酮类药物残留检测方法 | 第17-22页 |
| 1.2.1 微生物检测法 | 第18页 |
| 1.2.2 理化检测法 | 第18-20页 |
| 1.2.3 免疫分析法 | 第20-22页 |
| 1.2.4 生物传感器法 | 第22页 |
| 1.3 胶体金技术简介 | 第22-24页 |
| 1.3.1 胶体金 | 第22页 |
| 1.3.2 免疫快速诊断胶体金 | 第22-23页 |
| 1.3.3 胶体金免疫层析法在检测中的应用 | 第23页 |
| 1.3.4 胶体金技术的优缺点 | 第23-24页 |
| 1.4 研究内容 | 第24页 |
| 1.4.1 诺氟沙星单克隆抗体的制备 | 第24页 |
| 1.4.2 诺氟沙星胶体金检测试纸条的研制 | 第24页 |
| 1.5 研究意义、创新点和技术路线 | 第24-27页 |
| 1.5.1 研究意义 | 第24-25页 |
| 1.5.2 创新点 | 第25页 |
| 1.5.3 技术路线 | 第25-27页 |
| 第2章 NOR人工抗原的制备与鉴定 | 第27-34页 |
| 2.1 材料 | 第27-28页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第27页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第27-28页 |
| 2.2 诺氟沙星人工抗原的制备与鉴定 | 第28-29页 |
| 2.2.1 透析袋的处理 | 第28页 |
| 2.2.2 诺氟沙星免疫抗原与包被抗原的制备 | 第28页 |
| 2.2.3 紫外光谱扫描鉴定 | 第28-29页 |
| 2.2.4 琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第29页 |
| 2.2.5 红外光谱扫描鉴定 | 第29页 |
| 2.2.6 人工抗原蛋白浓度的测定 | 第29页 |
| 2.3 结果 | 第29-33页 |
| 2.3.1 完全抗原电泳检测的结果 | 第29-30页 |
| 2.3.2 完全抗原紫外检测的结果 | 第30-31页 |
| 2.3.3 完全抗原红外检测的结果 | 第31-32页 |
| 2.3.4 测定完全抗原的浓度 | 第32-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33页 |
| 2.5 小结 | 第33-34页 |
| 第3章 诺氟沙星单克隆抗体的制备 | 第34-54页 |
| 3.1 材料 | 第34-35页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第34页 |
| 3.1.2 主要设备 | 第34-35页 |
| 3.1.3 实验动物 | 第35页 |
| 3.1.4 ELISA所需缓冲液的配制 | 第35页 |
| 3.2 方法 | 第35-37页 |
| 3.2.1 动物免疫 | 第35-36页 |
| 3.2.2 间接ELISA法测定小鼠的效价 | 第36页 |
| 3.2.3 ELISA检测方法的优化 | 第36-37页 |
| 3.3 分泌抗NOR单克隆抗体的杂交瘤细胞株的建立 | 第37-42页 |
| 3.3.1 细胞融合的有关细胞的准备 | 第37-38页 |
| 3.3.2 细胞融合及培养 | 第38-39页 |
| 3.3.3 杂交瘤细胞的筛选 | 第39页 |
| 3.3.4 杂交瘤细胞的克隆 | 第39-40页 |
| 3.3.5 腹水制备 | 第40页 |
| 3.3.6 抗血清的纯化 | 第40页 |
| 3.3.7 抗诺氟沙星单克隆抗体特性的鉴定 | 第40-42页 |
| 3.3.8 标准竞争曲线的绘制 | 第42页 |
| 3.3.9 NOR单抗与结构类似物的交叉反应性 | 第42页 |
| 3.4 实验结果 | 第42-51页 |
| 3.4.1 血清效价的测定 | 第42-44页 |
| 3.4.2 最佳羊抗鼠二抗浓度的确定 | 第44-45页 |
| 3.4.3 最佳检测抗原稀释度 | 第45-46页 |
| 3.4.4 抗诺氟沙星单克隆抗体的制备 | 第46-47页 |
| 3.4.5 阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第47页 |
| 3.4.6 腹水制备 | 第47-48页 |
| 3.4.7 SDS-PAGE鉴定纯化后的抗体 | 第48页 |
| 3.4.8 单克隆抗体性质的测定 | 第48-50页 |
| 3.4.9 单克隆抗体亲和力的测定 | 第50页 |
| 3.4.10 标准曲线的绘制 | 第50页 |
| 3.4.11 单克隆抗体特异性测定 | 第50-51页 |
| 3.5 讨论 | 第51-53页 |
| 3.5.1 免疫动物选择 | 第51页 |
| 3.5.2 骨髓瘤细胞株的选择 | 第51-52页 |
| 3.5.3 细胞冻存 | 第52页 |
| 3.5.4 单克隆细胞克隆化 | 第52页 |
| 3.5.5 标准曲线的建立 | 第52页 |
| 3.5.6 交叉反应性 | 第52-53页 |
| 3.6 小结 | 第53-54页 |
| 第4章 诺氟沙星胶体金试纸条的制备 | 第54-73页 |
| 4.1 实验试剂与材料 | 第54-55页 |
| 4.2 实验仪器与设备 | 第55页 |
| 4.3 溶液的配置 | 第55页 |
| 4.4 试验方法 | 第55-61页 |
| 4.4.1 胶体金的制备 | 第55-56页 |
| 4.4.2 胶体金质量的判定 | 第56-57页 |
| 4.4.3 胶体金标记蛋白抗体 | 第57-58页 |
| 4.4.4 金标抗体稀释度的选择 | 第58页 |
| 4.4.5 金标复溶液的选择 | 第58页 |
| 4.4.6 检测线T线、质控线C线浓度的确定 | 第58-59页 |
| 4.4.7 试纸条组装材料的选择 | 第59页 |
| 4.4.8 试纸条的组装 | 第59-60页 |
| 4.4.9 试纸条的检测方法和结果判断 | 第60页 |
| 4.4.10 试纸条灵敏度确定 | 第60页 |
| 4.4.11 交叉反应试验 | 第60-61页 |
| 4.4.12 稳定性试验 | 第61页 |
| 4.4.13 样品加标试验 | 第61页 |
| 4.5 结果与分析 | 第61-71页 |
| 4.5.1 胶体金的制备 | 第61-62页 |
| 4.5.2 胶体金的质量评价 | 第62-63页 |
| 4.5.3 胶体金标记抗体蛋白 | 第63-65页 |
| 4.5.4 金边探针活性鉴定 | 第65-66页 |
| 4.5.5 金标复溶液选择 | 第66页 |
| 4.5.6 金标抗体稀释度的确定 | 第66-67页 |
| 4.5.7 质控线、检测线的浓度确定 | 第67页 |
| 4.5.8 试纸条组装材料的选择 | 第67-68页 |
| 4.5.9 试纸条性能测试 | 第68-70页 |
| 4.5.10 样品添加实验 | 第70-71页 |
| 4.6 讨论 | 第71-72页 |
| 4.6.1 胶体金的制备 | 第71-72页 |
| 4.6.2 关于检测限 | 第72页 |
| 4.7 小结 | 第72-73页 |
| 第5章 结论 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |