黄花苜蓿MfNAC63基因的克隆及特性分析
| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 英文缩略词对照表 | 第7-10页 |
| 一 引言 | 第10-15页 |
| 1 黄花苜蓿研究概况 | 第10-11页 |
| 1.1 黄花苜蓿地理分布及生长环境 | 第10页 |
| 1.2 黄花苜蓿优良特性 | 第10-11页 |
| 2 植物NAC转录因子研究概况 | 第11-14页 |
| 2.1 NAC转录因子结构 | 第11-12页 |
| 2.2 NAC转录因子生物学功能 | 第12-14页 |
| 3 研究的目的及意义 | 第14-15页 |
| 二 实验材料与方法 | 第15-30页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第15-16页 |
| 1.1 植物材料 | 第15页 |
| 1.2 菌种 | 第15页 |
| 1.3 质粒 | 第15页 |
| 1.4 试剂 | 第15-16页 |
| 1.5 引物 | 第16页 |
| 2 实验方法 | 第16-30页 |
| 2.1 PCR扩增 | 第16-19页 |
| 2.2 生物信息学分析 | 第19页 |
| 2.3 亚细胞定位 | 第19-22页 |
| 2.4 转录激活功能验证 | 第22-25页 |
| 2.5 基因表达分析 | 第25-26页 |
| 2.6 遗传转化 | 第26-28页 |
| 2.7 转化拟南芥的筛选 | 第28-30页 |
| 三 结果 | 第30-52页 |
| 1 基因克隆 | 第30-32页 |
| 1.1 PCR扩增 | 第30页 |
| 1.2 克隆结果测序分析 | 第30-32页 |
| 2 生物信息学分析 | 第32-39页 |
| 2.1 系统发育树的构建 | 第32页 |
| 2.2 蛋白质结构预测 | 第32-34页 |
| 2.3 MfNAC63蛋白质一级结构预测 | 第34-35页 |
| 2.4 MfNAC63蛋白质的二级结构预测 | 第35-36页 |
| 2.5 MfNAC63蛋白质的三级结构预测 | 第36-37页 |
| 2.6 MfNAC63蛋白质疏水性预测 | 第37页 |
| 2.7 MfNAC63的信号肽及跨膜结构域预测 | 第37页 |
| 2.8 MfNAC63亚细胞定位预测 | 第37-39页 |
| 3 亚细胞定位验证 | 第39-42页 |
| 3.1 重组质粒的构建 | 第39页 |
| 3.2 转化农杆菌GV3101感受态细胞 | 第39-41页 |
| 3.3 MfNAC63亚细胞定位结果 | 第41-42页 |
| 4 转录激活功能验证 | 第42-46页 |
| 4.1 重组质粒的构建 | 第42-44页 |
| 4.2 重组质粒转化酵母菌AH109 | 第44-45页 |
| 4.3 MfNAC63转录激活功能验证 | 第45-46页 |
| 5 MfNAC63基因表达分析 | 第46-47页 |
| 6 遗传转化 | 第47-52页 |
| 6.1 重组质粒的构建 | 第47页 |
| 6.2 转化农杆菌AGL1结果 | 第47-49页 |
| 6.3 转化紫花苜蓿 | 第49-51页 |
| 6.4 花序浸染法转化拟南芥 | 第51-52页 |
| 四 讨论与结论 | 第52-54页 |
| 1 讨论 | 第52-53页 |
| 2 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
