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SO2对植物microRNA转录的影响及葡萄采后保鲜作用研究

中文摘要第12-15页
ABSTRACT第15-18页
第一章 文献综述第19-29页
    1.1 二氧化硫(SO_2)污染及其生理作用第19-21页
        1.1.1 SO_2污染现状第19页
        1.1.2 SO_2对植物的影响第19页
        1.1.3 SO_2对鲜食葡萄的保鲜作用第19-20页
        1.1.4 植物对SO_2的胁迫响应第20-21页
    1.2 植物miRNA的特征及其功能第21-26页
        1.2.1 miRNA概述第21-22页
        1.2.2 植物miRNA的生物合成及其作用机制第22-23页
        1.2.3 植物miRNA对非生物胁迫的响应第23-24页
        1.2.4 植物miRNA的研究方法第24-26页
    1.3 本研究的目的和意义第26-29页
第二章 高通量测序鉴定拟南芥中参与SO_2胁迫响应的microRNA第29-43页
    2.1 材料与方法第29-35页
        2.1.1 植株培养第29页
        2.1.2 SO_2熏气处理第29-30页
        2.1.3 总RNA提取第30页
        2.1.4 小RNA文库构建及高通量测序第30页
        2.1.5 测序数据的生物信息学分析第30-33页
        2.1.6 差异表达miRNA的验证分析第33-35页
    2.2 结果分析第35-40页
        2.2.1 拟南芥小RNA的测序数据分析第35-37页
        2.2.2 参与SO_2胁迫响应miRNA的鉴定第37-38页
        2.2.3 差异表达miRNA靶基因预测及功能注释分析第38-40页
        2.2.4 生长素信号途径相关miRNA及其靶基因的表达验证第40页
    2.3 讨论与结论第40-43页
第三章 二氧化硫诱导拟南芥对灰霉菌抗病性增强第43-55页
    3.1 材料与方法第43-46页
        3.1.1 植株培养与处理第43-44页
        3.1.2 灰霉菌(Botrytiscinerea)接种第44页
        3.1.3 拟南芥总RNA提取及RT-PCR分析第44-45页
        3.1.4 防御相关酶活性的测定第45-46页
        3.1.5 次生代谢物质含量的测定第46页
        3.1.6 数据统计分析第46页
    3.2 结果分析第46-52页
        3.2.1 SO_2诱导拟南芥对灰霉菌抗病性增强第46-47页
        3.2.2 SO_2熏气染菌后防御相关酶活性及其编码基因转录水平的变化第47-49页
        3.2.3 SO_2熏气染菌后酚类物质含量的变化第49-50页
        3.2.4 SO_2熏气染菌后生长素相关miRNAs及其靶基因的表达变化第50-51页
        3.2.5 SO_2熏气染菌后生长素响应基因的表达变化第51-52页
    3.3 讨论与结论第52-55页
第四章 高通量测序鉴定玫瑰香葡萄中参与SO_2保鲜作用的microRNA第55-77页
    4.1 材料与方法第56-60页
        4.1.1 材料处理第56页
        4.1.2 总RNA提取第56页
        4.1.3 小RNA文库构建及高通量测序第56页
        4.1.4 测序数据的生物信息学分析第56-57页
        4.1.5 miRNA表达分析第57-58页
        4.1.6 差异表达miRNA的靶基因预测第58页
        4.1.7 qRT-PCR验证差异表达的miRNAs及靶基因第58-60页
    4.2 结果与分析第60-73页
        4.2.1 测序数据分析第60-61页
        4.2.2 KnownmiRNAs鉴定第61-63页
        4.2.3 NovelmiRNAs鉴定第63-64页
        4.2.4 miRNAs差异表达分析第64-67页
        4.2.5 差异表达miRNAs的靶基因预测第67-69页
        4.2.6 差异表达miRNAs靶基因参与抗病相关pathway分析第69页
        4.2.7 玫瑰香葡萄贮藏期间参与糖代谢的miRNA分析第69-71页
        4.2.8 选定miRNAs及靶基因的qRT-PCR验证第71-73页
    4.3 讨论与结论第73-77页
第五章 果实抗病防御应答参与SO_2对鲜食葡萄的采后保鲜第77-89页
    5.1 材料与方法第77-80页
        5.1.1 材料处理第77页
        5.1.2 葡萄采后贮藏期间保鲜袋内SO_2浓度的测定第77页
        5.1.3 贮藏期间葡萄果实表面pH值的测定第77页
        5.1.4 贮藏期间葡萄果实表面微生物数量/菌群的检测第77-78页
        5.1.5 抗病相关酶活性检测第78页
        5.1.6 次生代谢物质含量的测定第78页
        5.1.7 RNA提取及RT-PCR分析第78-80页
        5.1.8 数据统计分析第80页
    5.2 结果分析第80-85页
        5.2.1 玫瑰香葡萄贮藏期间保鲜袋内SO_2浓度的变化第80页
        5.2.2 SO_2对葡萄果实好果率的影响第80-81页
        5.2.3 SO_2对葡萄果实表面pH值的影响第81-82页
        5.2.4 SO_2对葡萄果实表面微生物数量和活力的影响第82页
        5.2.5 SO_2对葡萄果皮PAL活性的影响第82-83页
        5.2.6 SO_2对葡萄果皮酚类物质含量的影响第83页
        5.2.7 SO_2对葡萄果皮PPO活性的影响第83-84页
        5.2.8 SO_2对葡萄果皮病程相关蛋白编码基因表达水平及相关酶活性的影响第84-85页
    5.3 讨论与结论第85-89页
结论第89-90页
展望第90-91页
参考文献第91-109页
攻读学位期间取得的研究成果第109-111页
致谢第111-113页
个人简况第113-115页

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