中文摘要 | 第12-15页 |
ABSTRACT | 第15-18页 |
第一章 文献综述 | 第19-29页 |
1.1 二氧化硫(SO_2)污染及其生理作用 | 第19-21页 |
1.1.1 SO_2污染现状 | 第19页 |
1.1.2 SO_2对植物的影响 | 第19页 |
1.1.3 SO_2对鲜食葡萄的保鲜作用 | 第19-20页 |
1.1.4 植物对SO_2的胁迫响应 | 第20-21页 |
1.2 植物miRNA的特征及其功能 | 第21-26页 |
1.2.1 miRNA概述 | 第21-22页 |
1.2.2 植物miRNA的生物合成及其作用机制 | 第22-23页 |
1.2.3 植物miRNA对非生物胁迫的响应 | 第23-24页 |
1.2.4 植物miRNA的研究方法 | 第24-26页 |
1.3 本研究的目的和意义 | 第26-29页 |
第二章 高通量测序鉴定拟南芥中参与SO_2胁迫响应的microRNA | 第29-43页 |
2.1 材料与方法 | 第29-35页 |
2.1.1 植株培养 | 第29页 |
2.1.2 SO_2熏气处理 | 第29-30页 |
2.1.3 总RNA提取 | 第30页 |
2.1.4 小RNA文库构建及高通量测序 | 第30页 |
2.1.5 测序数据的生物信息学分析 | 第30-33页 |
2.1.6 差异表达miRNA的验证分析 | 第33-35页 |
2.2 结果分析 | 第35-40页 |
2.2.1 拟南芥小RNA的测序数据分析 | 第35-37页 |
2.2.2 参与SO_2胁迫响应miRNA的鉴定 | 第37-38页 |
2.2.3 差异表达miRNA靶基因预测及功能注释分析 | 第38-40页 |
2.2.4 生长素信号途径相关miRNA及其靶基因的表达验证 | 第40页 |
2.3 讨论与结论 | 第40-43页 |
第三章 二氧化硫诱导拟南芥对灰霉菌抗病性增强 | 第43-55页 |
3.1 材料与方法 | 第43-46页 |
3.1.1 植株培养与处理 | 第43-44页 |
3.1.2 灰霉菌(Botrytiscinerea)接种 | 第44页 |
3.1.3 拟南芥总RNA提取及RT-PCR分析 | 第44-45页 |
3.1.4 防御相关酶活性的测定 | 第45-46页 |
3.1.5 次生代谢物质含量的测定 | 第46页 |
3.1.6 数据统计分析 | 第46页 |
3.2 结果分析 | 第46-52页 |
3.2.1 SO_2诱导拟南芥对灰霉菌抗病性增强 | 第46-47页 |
3.2.2 SO_2熏气染菌后防御相关酶活性及其编码基因转录水平的变化 | 第47-49页 |
3.2.3 SO_2熏气染菌后酚类物质含量的变化 | 第49-50页 |
3.2.4 SO_2熏气染菌后生长素相关miRNAs及其靶基因的表达变化 | 第50-51页 |
3.2.5 SO_2熏气染菌后生长素响应基因的表达变化 | 第51-52页 |
3.3 讨论与结论 | 第52-55页 |
第四章 高通量测序鉴定玫瑰香葡萄中参与SO_2保鲜作用的microRNA | 第55-77页 |
4.1 材料与方法 | 第56-60页 |
4.1.1 材料处理 | 第56页 |
4.1.2 总RNA提取 | 第56页 |
4.1.3 小RNA文库构建及高通量测序 | 第56页 |
4.1.4 测序数据的生物信息学分析 | 第56-57页 |
4.1.5 miRNA表达分析 | 第57-58页 |
4.1.6 差异表达miRNA的靶基因预测 | 第58页 |
4.1.7 qRT-PCR验证差异表达的miRNAs及靶基因 | 第58-60页 |
4.2 结果与分析 | 第60-73页 |
4.2.1 测序数据分析 | 第60-61页 |
4.2.2 KnownmiRNAs鉴定 | 第61-63页 |
4.2.3 NovelmiRNAs鉴定 | 第63-64页 |
4.2.4 miRNAs差异表达分析 | 第64-67页 |
4.2.5 差异表达miRNAs的靶基因预测 | 第67-69页 |
4.2.6 差异表达miRNAs靶基因参与抗病相关pathway分析 | 第69页 |
4.2.7 玫瑰香葡萄贮藏期间参与糖代谢的miRNA分析 | 第69-71页 |
4.2.8 选定miRNAs及靶基因的qRT-PCR验证 | 第71-73页 |
4.3 讨论与结论 | 第73-77页 |
第五章 果实抗病防御应答参与SO_2对鲜食葡萄的采后保鲜 | 第77-89页 |
5.1 材料与方法 | 第77-80页 |
5.1.1 材料处理 | 第77页 |
5.1.2 葡萄采后贮藏期间保鲜袋内SO_2浓度的测定 | 第77页 |
5.1.3 贮藏期间葡萄果实表面pH值的测定 | 第77页 |
5.1.4 贮藏期间葡萄果实表面微生物数量/菌群的检测 | 第77-78页 |
5.1.5 抗病相关酶活性检测 | 第78页 |
5.1.6 次生代谢物质含量的测定 | 第78页 |
5.1.7 RNA提取及RT-PCR分析 | 第78-80页 |
5.1.8 数据统计分析 | 第80页 |
5.2 结果分析 | 第80-85页 |
5.2.1 玫瑰香葡萄贮藏期间保鲜袋内SO_2浓度的变化 | 第80页 |
5.2.2 SO_2对葡萄果实好果率的影响 | 第80-81页 |
5.2.3 SO_2对葡萄果实表面pH值的影响 | 第81-82页 |
5.2.4 SO_2对葡萄果实表面微生物数量和活力的影响 | 第82页 |
5.2.5 SO_2对葡萄果皮PAL活性的影响 | 第82-83页 |
5.2.6 SO_2对葡萄果皮酚类物质含量的影响 | 第83页 |
5.2.7 SO_2对葡萄果皮PPO活性的影响 | 第83-84页 |
5.2.8 SO_2对葡萄果皮病程相关蛋白编码基因表达水平及相关酶活性的影响 | 第84-85页 |
5.3 讨论与结论 | 第85-89页 |
结论 | 第89-90页 |
展望 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-109页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第109-111页 |
致谢 | 第111-113页 |
个人简况 | 第113-115页 |