| 中文摘要 | 第18-21页 |
| ABSTRACT | 第21-25页 |
| 第一章 文献综述 | 第26-42页 |
| 1 谷子及谷糠概述 | 第26-30页 |
| 1.1 多酚类化合物的结构和分类 | 第26-27页 |
| 1.2 谷子中多酚类化合物成分 | 第27-28页 |
| 1.3 谷子中多酚类化合物的医药功能 | 第28-30页 |
| 1.3.1 抗氧化作用 | 第28页 |
| 1.3.2 抗炎抗菌功能 | 第28-29页 |
| 1.3.3 降高血糖和高血脂功能 | 第29页 |
| 1.3.4 抗肿瘤活性 | 第29-30页 |
| 2 植物多酚抗肿瘤作用的机制研究 | 第30-39页 |
| 2.1 诱导细胞凋亡 | 第30-32页 |
| 2.1.1 细胞凋亡概述 | 第30页 |
| 2.1.2 Caspases家族蛋白依赖的肿瘤细胞凋亡 | 第30-31页 |
| 2.1.3 活性氧诱导肿瘤细胞凋亡 | 第31-32页 |
| 2.1.4 多酚诱导肿瘤细胞凋亡的途径 | 第32页 |
| 2.2 多酚类药物对肿瘤炎症的减弱作用 | 第32-36页 |
| 2.2.1 慢性炎症与肿瘤发生发展紧密相关 | 第32-34页 |
| 2.2.2 microRNAs对肿瘤相关性炎症的调控 | 第34-36页 |
| 2.2.3 多酚类物质抑制炎症因子的表达 | 第36页 |
| 2.3 肿瘤细胞的代谢异常及其逆转 | 第36-39页 |
| 2.3.1 肿瘤代谢概述 | 第36-37页 |
| 2.3.2 癌基因和抑癌基因在代谢重编程中的作用 | 第37-39页 |
| 2.3.3 microRNAs对肿瘤代谢的调控 | 第39页 |
| 2.3.4 多酚逆转肿瘤代谢抑制癌细胞增殖 | 第39页 |
| 3 本课题的研究背景及目的意义 | 第39-40页 |
| 4 本文的主要研究内容和技术路线 | 第40-42页 |
| 4.1 主要研究内容 | 第40页 |
| 4.2 技术路线 | 第40-42页 |
| 第二章 谷糠中活性多酚的制备及组分分析 | 第42-53页 |
| 1 引言 | 第42页 |
| 2 材料与方法 | 第42-45页 |
| 2.1 谷糠与细胞 | 第42页 |
| 2.2 仪器及试剂 | 第42-43页 |
| 2.2.1 试剂及配制 | 第43页 |
| 2.3 谷糠及小米多酚的制备 | 第43-44页 |
| 2.3.1 制备谷糠多酚 | 第43-44页 |
| 2.3.2 测定谷糠多酚含量 | 第44页 |
| 2.4 谷糠多酚的抗肿瘤活性分析 | 第44-45页 |
| 2.4.1 细胞培养及传代 | 第44页 |
| 2.4.2 细胞冻存及复苏 | 第44页 |
| 2.4.3 检测多酚抗肿瘤活性 | 第44-45页 |
| 2.4.4 细胞形态学实验 | 第45页 |
| 2.5 BPIS抗氧化能力的分析 | 第45页 |
| 2.5.1 检测BPIS总还原能力 | 第45页 |
| 2.6 UPLC-Triple-TOF/MS鉴定BPIS中多酚组分 | 第45页 |
| 2.7 数据的处理及统计分析 | 第45页 |
| 3 结果 | 第45-51页 |
| 3.1 谷糠的内、外壳与小米中自由态和结合态多酚的含量 | 第45-46页 |
| 3.2 谷糠多酚抑制不同癌细胞的增殖 | 第46页 |
| 3.3 BPIS对肿瘤细胞形态的影响 | 第46-47页 |
| 3.4 BPIS抗氧化能力评价 | 第47-48页 |
| 3.5 BPIS组分分析鉴定 | 第48-50页 |
| 3.6 谷糠多酚(BPIS)组份中具有抗结肠癌作用的活性分子 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-52页 |
| 5 小结 | 第52-53页 |
| 第三章 BPIS诱导结肠癌细胞凋亡效应的分子机制 | 第53-66页 |
| 1 引言 | 第53页 |
| 2 材料与方法 | 第53-56页 |
| 2.1 细胞株 | 第53页 |
| 2.2 设备及试剂 | 第53-54页 |
| 2.3 细胞培养 | 第54页 |
| 2.4 细胞克隆形成实验 | 第54页 |
| 2.5 检测细胞内活性氧变化 | 第54-55页 |
| 2.5.1 采用ROS抑制剂验证BPIS对细胞内活性氧含量的影响 | 第54-55页 |
| 2.6 流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位的变化 | 第55页 |
| 2.7 Hochest33342染色法检测BPIS对细胞凋亡的影响 | 第55页 |
| 2.8 检测细胞凋亡 | 第55页 |
| 2.9 Western blotting检测凋亡相关蛋白的变化 | 第55-56页 |
| 2.10 数据处理及分析 | 第56页 |
| 3 结果 | 第56-64页 |
| 3.1 BPIS对结肠癌细胞HCT-116增殖的影响 | 第56-57页 |
| 3.2 BPIS诱导HCT-116细胞内活性氧过量产生 | 第57-59页 |
| 3.3 BPIS通过引起胞内ROS的积累诱导HCT-116细胞凋亡 | 第59-60页 |
| 3.4 BPIS使HCT-116细胞线粒体膜电位下降 | 第60-61页 |
| 3.5 BPIS诱导线粒体介导的凋亡途径 | 第61-62页 |
| 3.6 BPIS通过抑制NF-κB信号通路促进HCT-116细胞凋亡 | 第62-63页 |
| 3.7 BPIS抑制结肠癌细胞增殖的作用机制 | 第63-64页 |
| 4 讨论 | 第64-65页 |
| 5 小结 | 第65-66页 |
| 第四章 BPIS抗结肠癌细胞炎症效应及分子机制 | 第66-82页 |
| 1 引言 | 第66页 |
| 2 材料与方法 | 第66-70页 |
| 2.1 细胞株 | 第66页 |
| 2.2 实验设备及试剂 | 第66-67页 |
| 2.2.1 实验设备 | 第66-67页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第67页 |
| 2.2.3 主要试剂配制方法 | 第67页 |
| 2.3 细胞培养 | 第67页 |
| 2.4 ELISA检测 | 第67页 |
| 2.5 RNA提取、反转录cDNA | 第67-68页 |
| 2.6 实时荧光定量PCR分析 | 第68页 |
| 2.7 提取细胞核蛋白 | 第68页 |
| 2.8 Westernblot分析 | 第68-69页 |
| 2.9 检测microRNA的表达及转染 | 第69页 |
| 2.10 免疫荧光法检测NF-κB核转位 | 第69页 |
| 2.11 双荧光素酶报告载体的构建 | 第69-70页 |
| 2.12 双荧光素酶报告系统实验 | 第70页 |
| 2.13 统计分析 | 第70页 |
| 3 结果 | 第70-79页 |
| 3.1 BPIS对LPS诱导的结直肠癌HT-29细胞的抗炎症效应分析 | 第70-72页 |
| 3.2 BPIS阻滞HT-29细胞中NF-κB蛋白的核转位 | 第72-74页 |
| 3.3 BPIS通过阻滞Akt蛋白磷酸化而抑制NF-κB蛋白核转位 | 第74-75页 |
| 3.4 BPIS通过miR-149阻滞Akt蛋白表达 | 第75-77页 |
| 3.5 BPIS通过积累过量的ROS上调miR-149发挥抗炎症效应 | 第77-78页 |
| 3.6 BPIS抗炎症效应的作用机制 | 第78-79页 |
| 4 讨论 | 第79-81页 |
| 5 小结 | 第81-82页 |
| 第五章 BPIS逆转结肠癌细胞能量代谢及分子机制 | 第82-95页 |
| 1 引言 | 第82页 |
| 2 材料与方法 | 第82-86页 |
| 2.1 细胞株 | 第82页 |
| 2.2 实验仪器及试剂 | 第82-83页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第82-83页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第83页 |
| 2.2.3 主要试剂配制方法 | 第83页 |
| 2.3 细胞培养 | 第83页 |
| 2.4 RNA提取、反转录cDNA,实时定量PCR分析 | 第83页 |
| 2.5 细胞ATP生成量检测 | 第83页 |
| 2.6 细胞培养基中葡萄糖含量检测 | 第83-84页 |
| 2.7 细胞谷氨酰胺酶活性检测 | 第84页 |
| 2.8 Western blot分析 | 第84页 |
| 2.9 细胞外酸化率的测定(ECAR) | 第84-85页 |
| 2.10 细胞克隆实验 | 第85页 |
| 2.11 miR-149抑制剂转染 | 第85页 |
| 2.12 构建双荧光素酶报告载体 | 第85页 |
| 2.13 双荧光素酶报告系统实验 | 第85页 |
| 2.14 统计分析 | 第85-86页 |
| 3 结果 | 第86-92页 |
| 3.1 BPIS对结肠癌HT-29细胞糖酵解代谢的影响 | 第86-87页 |
| 3.2 BPIS对结肠癌HT-29细胞谷氨酰胺代谢的影响 | 第87-88页 |
| 3.3 BPIS抑制c-myc蛋白的表达 | 第88页 |
| 3.4 BPIS通过miR-149负调控c-myc蛋白表达 | 第88-90页 |
| 3.5 BPIS通过miR-149介导的能量代谢抑制CRC细胞的增殖 | 第90-91页 |
| 3.6 BPIS逆转结肠癌异常代谢的作用机制 | 第91-92页 |
| 4 讨论 | 第92-93页 |
| 5 小结 | 第93-95页 |
| 第六章 BPIS在裸鼠体内的抗结肠癌效应研究 | 第95-103页 |
| 1 引言 | 第95页 |
| 2 材料与方法 | 第95页 |
| 3 结果 | 第95-101页 |
| 3.1 BPIS对裸鼠体重的影响 | 第95-96页 |
| 3.2 BPIS对裸鼠皮下肿瘤体积的影响 | 第96-97页 |
| 3.3 BPIS对肿瘤中炎症相关蛋白表达的影响 | 第97-98页 |
| 3.4 BPIS对肿瘤组织中代谢相关蛋白在RNA水平的影响 | 第98-99页 |
| 3.5 BPIS对肿瘤组织中调控代谢重塑相关蛋白的影响 | 第99-100页 |
| 3.6 BPIS发挥抗结肠癌效应的分子机制 | 第100-101页 |
| 4 讨论 | 第101-102页 |
| 5 小结 | 第102-103页 |
| 总结与展望 | 第103-105页 |
| 参考文献 | 第105-117页 |
| 附录 缩略表 | 第117-118页 |
| 个人简历及读博期间发表文章 | 第118-120页 |
| 致谢 | 第120页 |
