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水稻白叶枯菌IS1112和IS1113的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 综述第10-26页
 1 水稻白叶枯病菌第10-11页
   ·水稻白叶枯病菌生物学性状第10页
   ·水稻白叶枯病的危害第10-11页
 2 插入序列(IS)第11页
 3 IS的命名与分类第11-12页
   ·IS的命名第11-12页
   ·IS的分类第12页
 4 IS在水稻白叶枯病菌中的重要性第12-15页
   ·水稻白叶枯病菌全基因组序列的测定第12-14页
   ·IS在防治水稻白叶枯病的重要性第14-15页
 5 常用分析IS拷贝数、扩增旁侧基因组序列的方法第15-23页
   ·定性PCR技术第15-19页
     ·反向PCR第15-16页
     ·交错式热不对称PCR第16-17页
     ·Rep-PCR和IS-PCR第17-18页
     ·基因组步移第18-19页
   ·实时荧光定量PCR第19-21页
     ·实时荧光定量PCR的发展第19页
     ·TaqMan实时荧光定量PCR法第19-21页
     ·实时荧光定量PCR的优点及局限第21页
   ·RFLP技术第21-22页
   ·Southern印迹杂交第22页
   ·毛细管电泳法第22-23页
   ·荧光原位杂交技术第23页
 6 小结第23-24页
 7 研究的目的意义与主要研究内容第24-26页
   ·研究的目的与意义第24页
   ·主要研究内容第24-26页
第二章 不同菌株中IS1112、IS1113靶标位点特征分析第26-41页
 1 材料与方法第27-31页
   ·实验材料第27页
   ·培养基和溶液的配制第27页
   ·菌株DNA的提取第27-28页
   ·构建IS-旁侧序列的DNA文库第28页
   ·引物设计第28-29页
   ·旁侧位点的扩增第29-30页
     ·PCR反应体系第29页
     ·PCR反应条件第29页
     ·PCR产物回收第29-30页
   ·序列的克隆与鉴定第30-31页
     ·感受态细胞的制备第30页
     ·与pMD18-T载体连接第30页
     ·细菌的转化第30-31页
     ·重组质粒鉴定第31页
   ·序列的测定及数据分析第31页
 2 实验结果第31-34页
   ·靶标位点的差异第31-33页
   ·差异性片段序列分析第33-34页
 3 MAFF、KACC、PX099~A中IS1112、IS1113的差异第34-39页
   ·MAFF、KACC、PX099~A的基因组差异第34-35页
   ·MAFF、KACC、PX099~A靶标位点的分析第35-38页
   ·MAFF、KACC、PX099~A靶标位点序列保守性分析第38-39页
 4 讨论第39-41页
第三章 IS1112、IS1113的拷贝数定量分析第41-51页
 1 实验材料第41-42页
   ·供试菌株第41-42页
   ·主要试剂和仪器第42页
 2 实验方法第42-46页
   ·菌株基因组DNA提取第42页
   ·标准质粒构建第42-44页
     ·IS、16S片段引物设计及PCR扩增第42-43页
     ·重叠PCR拼接16S和IS片段第43页
     ·标准质粒构建第43-44页
   ·标准曲线构建第44-45页
   ·数据分析第45-46页
 3 结果与分析第46-50页
   ·标准质粒的鉴定第46-48页
   ·标准曲线设定第48页
   ·IS1112和IS1113绝对拷贝数的测定结果第48-50页
 4 讨论第50-51页
第四章 全文总结第51-53页
参考文献第53-59页
附录第59-62页
致谢第62-63页
作者简历第63页

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