| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-26页 |
| 1 荧光定量PCR(qPCR)的研究进展 | 第12-20页 |
| ·qPCR的原理 | 第12页 |
| ·qPCR的种类 | 第12-14页 |
| ·qPCR的定量方法 | 第14-17页 |
| ·绝对定量 | 第14-15页 |
| ·相对定量 | 第15-17页 |
| ·qPCR试验结果的影响因素 | 第17-19页 |
| ·RNA的完整性 | 第17页 |
| ·RNA样品中的基因组DNA污染 | 第17-18页 |
| ·反转录效率 | 第18页 |
| ·PCR扩增 | 第18页 |
| ·内参基因的选择 | 第18-19页 |
| ·qPCR在植物病理学和植物遗传育种研究中的应用 | 第19-20页 |
| ·qPCR在病原真菌研究中的应用 | 第19页 |
| ·qPCR在病原细菌检测中的应用 | 第19页 |
| ·qPCR在植物病毒检测中的应用 | 第19-20页 |
| ·qPCR在致病相关基因表达分析中的应用 | 第20页 |
| ·qPCR技术的应用前景 | 第20页 |
| 2 植物抗病分子机制的研究进展 | 第20-25页 |
| ·两种主要的植物抗病遗传基础模式 | 第21-22页 |
| ·配体-受体模型 | 第21页 |
| ·防卫(Guard)模型 | 第21-22页 |
| ·抗病相关基因及其介导的信号传导 | 第22-24页 |
| ·抗病基因 | 第22-23页 |
| ·防卫基因 | 第23页 |
| ·植物抗病基因介导的信号传导 | 第23-24页 |
| ·抗病基因的应用 | 第24-25页 |
| 3 研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 第二章 转pthA基因甜橙的分子鉴定 | 第26-41页 |
| 1 材料与方法 | 第26-31页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第26-27页 |
| ·引物的设计与合成 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-31页 |
| ·基因组DNA的提取及纯化 | 第27-28页 |
| ·转化再生甜橙的PCR检测 | 第28页 |
| ·探针的制备及灵敏度检测 | 第28页 |
| ·总DNA的限制酶消化 | 第28页 |
| ·酶切产物电泳 | 第28-29页 |
| ·转膜及核酸固定 | 第29页 |
| ·预杂交和杂交 | 第29页 |
| ·洗膜 | 第29-30页 |
| ·显影 | 第30页 |
| ·总RNA的提取及纯化 | 第30-31页 |
| ·RT-PCR反应 | 第31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-38页 |
| ·转基因甜橙的PCR检测 | 第31-34页 |
| ·基因组DNA的提取及纯化 | 第31-32页 |
| ·转化再生甜橙的PCR检测 | 第32-34页 |
| ·转pthA基因甜橙外源基因southern杂交分析 | 第34-36页 |
| ·探针灵敏度检测 | 第34页 |
| ·总DNA的限制酶消化 | 第34-35页 |
| ·酶切产物电泳 | 第35页 |
| ·转膜及杂交、显影 | 第35-36页 |
| ·总RNA提取及纯化 | 第36-37页 |
| ·RT-PCR分析 | 第37-38页 |
| 3 讨论与小结 | 第38-41页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 第三章 柑橘内参基因筛选及qPCR体系的建立 | 第41-56页 |
| 1 材料与方法 | 第41-44页 |
| ·材料 | 第41-43页 |
| ·植物材料 | 第41页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第41-42页 |
| ·内参基因及引物 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-44页 |
| ·RNA的提取及纯化 | 第43页 |
| ·RT-PCR反应 | 第43页 |
| ·定性PCR反应 | 第43页 |
| ·定量PCR反应 | 第43页 |
| ·内参基因表达稳定性的分析 | 第43页 |
| ·比较2~(-ΔΔCt)法计算基因相对表达量 | 第43-44页 |
| ·目标基因与内标基因扩增效率一致性的检测 | 第44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-54页 |
| ·总RNA的提取及纯化 | 第44页 |
| ·引物特异性分析 | 第44-48页 |
| ·内参基因及稳定性分析 | 第48-52页 |
| ·目标基因与内参基因扩增效率一致性检测 | 第52-54页 |
| 3 讨论与小结 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 第四章 转pthA基因甜橙的表达分析 | 第56-62页 |
| 1.材料与方法 | 第56-57页 |
| ·材料 | 第56-57页 |
| ·植物材料 | 第56页 |
| ·病原菌 | 第56页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第56-57页 |
| ·方法 | 第57页 |
| ·RNA的提取及纯化 | 第57页 |
| ·RT-PCR反应 | 第57页 |
| ·针刺活体接种转基因甜橙叶片 | 第57页 |
| ·定量PCR分析甜橙中pthA基因表达水平 | 第57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-60页 |
| ·pthA甜橙接种病原菌前的表达分析 | 第57-59页 |
| ·pthA-nls甜橙接种病原菌后的表达分析 | 第59-60页 |
| ·统计部分转pthA-nls甜橙的百孔发病率 | 第60页 |
| 3 讨论与小结 | 第60-62页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 全文总结 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 缩略词表 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 个人简历 | 第76页 |