| 摘要 | 第5-8页 |
| abstract | 第8-10页 |
| 英文缩写索引 | 第13-14页 |
| 1 绪论 | 第14-21页 |
| 1.1 伤寒沙门菌简介 | 第14-15页 |
| 1.2 非编码RNA | 第15-16页 |
| 1.3 细菌在巨噬细胞内的生存 | 第16-19页 |
| 1.4 研究背景 | 第19-21页 |
| 2 实验目的、内容、技术路线 | 第21-23页 |
| 2.1 实验目的 | 第21页 |
| 2.2 实验内容 | 第21页 |
| 2.3 技术路线 | 第21-23页 |
| 2.3.1 malS-5'UTR对S.Typhi巨噬细胞内生存能力影响 | 第21页 |
| 2.3.2 malS-5'UTR对胞内生存力相关基因表达的影响 | 第21-22页 |
| 2.3.3 malS-5'UTR对胞内ATP含量的影响 | 第22页 |
| 2.3.4 malS-5'UTR对mgtC表达的影响 | 第22页 |
| 2.3.5 malS-5'UTR对胞内生存力的调节是否依赖phoP | 第22-23页 |
| 3 材料与方法 | 第23-45页 |
| 3.1 材料 | 第23-30页 |
| 3.1.1 菌株和质粒 | 第23页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 3.1.3 主要溶液及配制 | 第24-29页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第29-30页 |
| 3.2 实验方法 | 第30-45页 |
| 3.2.1 细菌培养 | 第30页 |
| 3.2.2 细菌总RNA的提取 | 第30-31页 |
| 3.2.3 malS-5'UTR高表达菌株的巨噬细胞生存实验 | 第31-32页 |
| 3.2.4 malS-5'UTR高表达菌株在LPM培养基条件生长曲线测定 | 第32页 |
| 3.2.5 基因芯片分析malS-5'UTR对全基因组表达的影响 | 第32页 |
| 3.2.6 qRT-PCR验证基因芯片结果 | 第32-33页 |
| 3.2.7 malS-5'UTR对胞内ATP含量的影响 | 第33-35页 |
| 3.2.8 qRT-PCR检测phoP/phoQ和mgtC的mRNA表达水平 | 第35页 |
| 3.2.9 WT-malS-5'UTR、WT-pBAD的MgtC::3×Flag标签融合菌株制备 | 第35-41页 |
| 3.2.10 WesternBlot检测WT-malS-5'UTR、WT-pBAD中MgtC的表达量 | 第41-43页 |
| 3.2.11 malS-5'UTR对胞内生存力调节与phoP相关性分析 | 第43-45页 |
| 4 结果与讨论 | 第45-73页 |
| 4.1 结果 | 第45-69页 |
| 4.1.1 malS-5'UTR高表达菌株的巨噬细胞生存实验 | 第45页 |
| 4.1.2 malS-5'UTR高表达菌株在LPM培养基条件生长曲线绘制 | 第45-46页 |
| 4.1.3 基因芯片分析malS-5'UTR对全基因组表达的影响 | 第46-51页 |
| 4.1.4 qRT-PCR验证基因芯片结果 | 第51-52页 |
| 4.1.5 malS-5'UTR对胞内ATP含量的影响 | 第52-53页 |
| 4.1.6 malS-5'UTR对phoP/phoQ和mgtCmRNA水平的影响 | 第53-54页 |
| 4.1.7 WT-malS-5'UTR、WT-pBAD的MgtC::3×Flag标签融合菌株制备 | 第54-60页 |
| 4.1.8 malS-5'UTR对MgtC蛋白水平的影响 | 第60页 |
| 4.1.9 malS-5′UTR对胞内生存力的调节是否依赖phoP | 第60-69页 |
| 4.2 讨论 | 第69-73页 |
| 5 主要结论与展望 | 第73-74页 |
| 5.1 主要结论 | 第73页 |
| 5.2 展望 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文及学术交流 | 第83页 |
