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LncRNA Pvt1调控G-MDSCs免疫抑制功能的实验研究

摘要第5-8页
abstract第8-10页
第一章 绪论第14-28页
    1.1 MDSCs第14-21页
        1.1.1 MDSCs的来源、分布与亚群第14-15页
        1.1.2 MDSCs的扩增与活化第15-16页
        1.1.3 MDSCs发挥免疫抑制功能的机制第16-17页
        1.1.4 外周淋巴器官与肿瘤局部MDSCs的异同第17-18页
        1.1.5 MDSCs与肿瘤第18-19页
        1.1.6 MDSCs的靶向治疗策略第19-21页
    1.2 长链非编码RNA(long noncoding RNA, LncRNA)第21-24页
        1.2.1 LncRNA的概述第21页
        1.2.2 LncRNA的分类与作用机制第21-22页
        1.2.3 LncRNA在免疫系统中的作用第22-24页
        1.2.4 LncRNA与MDSCs第24页
    1.3 研究目的、方法、实验设计及意义第24-28页
        1.3.1 研究目的第24页
        1.3.2 研究方法第24页
        1.3.3 实验设计第24-27页
        1.3.4 研究意义第27-28页
第二章 LncRNA Pvt1对G-MDSCs免疫抑制功能的调控第28-51页
    2.1 实验仪器和材料第29-32页
        2.1.1 实验动物和细胞株第29页
        2.1.2 主要实验仪器和耗材第29-30页
        2.1.3 主要试剂第30-31页
        2.1.4 主要溶液配制第31-32页
    2.2 实验方法第32-42页
        2.2.1 小鼠Lewis肺癌移植瘤模型和CT-26结肠癌移植瘤模型的建立第32页
        2.2.2 小鼠脾脏、骨髓和肿瘤组织中G-MDSCs的分离纯化第32-34页
        2.2.3 流式细胞仪分选肿瘤组织CD11b~+ Ly6G~+ G-MDSCs第34页
        2.2.4 小鼠脾脏中CD4~+ T细胞的分离纯化(阳性选择法)第34页
        2.2.5 LncRNA表达谱芯片的检测与分析第34页
        2.2.6 G-MDSCs中lncRNA Pvt1及c-myc mRNA表达水平的检测第34-37页
        2.2.7 G-MDSCs转染特异性si-Pvt1后转染效率的检测第37-38页
        2.2.8 G-MDSCs转染特异性si-Pvt1后c-myc表达水平的检测第38-39页
        2.2.9 G-MDSCs免疫抑制功能的检测第39-40页
        2.2.10 G-MDSCs转染特异性si-Pvt1后相关效应分子的检测第40-41页
        2.2.11 体外诱导G-MDSCs第41页
        2.2.12 CFSE检测CD4~+ T细胞增殖情况第41-42页
        2.2.13 图像与统计学分析第42页
    2.3 实验结果第42-50页
        2.3.1 LncRNA Pvt1在小鼠肿瘤来源G-MDSCs中高表达第42-45页
        2.3.2 C-myc在小鼠肿瘤来源G-MDSCs中高表达第45-46页
        2.3.3 G-MDSCs转染si-Pvt1后转染效率的验证第46页
        2.3.4 抑制lncRNA Pvt1可以下调c-myc在G-MDSCs中的表达第46-47页
        2.3.5 抑制lncRNA Pvt1能够下调G-MDSCs免疫抑制功能和相关效应分子的表达第47-48页
        2.3.6 体外诱导的G-MDSCs中lncRNA Pvt1表达上调第48-50页
    2.4 讨论第50-51页
第三章 LncRNA Pvt1表达下调的G-MDSCs对Lewis肺癌移植瘤生长的影响第51-59页
    3.1 实验仪器和材料第51-53页
        3.1.1 实验动物和细胞株第51页
        3.1.2 主要实验仪器和耗材第51-52页
        3.1.3 主要试剂第52-53页
        3.1.4 主要溶液配制第53页
    3.2 实验方法第53-55页
        3.2.1 小鼠Lewis肺癌移植瘤模型的建立第53-54页
        3.2.2 肿瘤生长的监测第54页
        3.2.3 FCM检测荷瘤小鼠引流淋巴结、脾脏和肿瘤组织局部Th1和CTL细胞的比例第54-55页
        3.2.4 图像与统计学分析第55页
    3.3 实验结果第55-58页
        3.3.1 LncRNA Pvt1表达下调的G-MDSCs对Lewis肺癌移植瘤生长的影响第55-56页
        3.3.2 LncRNA Pvt1表达下调的G-MDSCs对荷瘤小鼠体内CTL和Th1的影响第56-58页
    3.4 讨论第58-59页
第四章 HIF-1α调控G-MDSCs中lncRNA Pvt1的表达第59-66页
    4.1 实验仪器和材料第59-61页
        4.1.1 实验动物和细胞株第59页
        4.1.2 主要实验仪器和耗材第59-60页
        4.1.3 主要试剂第60-61页
        4.1.4 主要溶液配制第61页
    4.2 实验方法第61-63页
        4.2.1 G-MDSCs的缺氧处理第61页
        4.2.2 G-MDSCs经缺氧处理后HIF-1α表达水平的检测第61-63页
        4.2.3 G-MDSCs经缺氧处理后lncRNA Pvt1表达水平的检测第63页
        4.2.4 图像与统计学分析第63页
    4.3 实验结果第63-65页
        4.3.1 HIF-1α在肿瘤来源G-MDSCs中高表达第63-64页
        4.3.2 HIF-1α调控G-MDSCs中lncRNA Pvt1的表达第64-65页
    4.4 讨论第65-66页
第五章 结论、创新点与展望第66-67页
    5.1 主要结论第66页
    5.2 创新点第66页
    5.3 展望第66-67页
参考文献第67-73页
致谢第73-74页
攻读硕士期间发表的论文第74页

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