摘要 | 第5-8页 |
abstract | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第14-28页 |
1.1 MDSCs | 第14-21页 |
1.1.1 MDSCs的来源、分布与亚群 | 第14-15页 |
1.1.2 MDSCs的扩增与活化 | 第15-16页 |
1.1.3 MDSCs发挥免疫抑制功能的机制 | 第16-17页 |
1.1.4 外周淋巴器官与肿瘤局部MDSCs的异同 | 第17-18页 |
1.1.5 MDSCs与肿瘤 | 第18-19页 |
1.1.6 MDSCs的靶向治疗策略 | 第19-21页 |
1.2 长链非编码RNA(long noncoding RNA, LncRNA) | 第21-24页 |
1.2.1 LncRNA的概述 | 第21页 |
1.2.2 LncRNA的分类与作用机制 | 第21-22页 |
1.2.3 LncRNA在免疫系统中的作用 | 第22-24页 |
1.2.4 LncRNA与MDSCs | 第24页 |
1.3 研究目的、方法、实验设计及意义 | 第24-28页 |
1.3.1 研究目的 | 第24页 |
1.3.2 研究方法 | 第24页 |
1.3.3 实验设计 | 第24-27页 |
1.3.4 研究意义 | 第27-28页 |
第二章 LncRNA Pvt1对G-MDSCs免疫抑制功能的调控 | 第28-51页 |
2.1 实验仪器和材料 | 第29-32页 |
2.1.1 实验动物和细胞株 | 第29页 |
2.1.2 主要实验仪器和耗材 | 第29-30页 |
2.1.3 主要试剂 | 第30-31页 |
2.1.4 主要溶液配制 | 第31-32页 |
2.2 实验方法 | 第32-42页 |
2.2.1 小鼠Lewis肺癌移植瘤模型和CT-26结肠癌移植瘤模型的建立 | 第32页 |
2.2.2 小鼠脾脏、骨髓和肿瘤组织中G-MDSCs的分离纯化 | 第32-34页 |
2.2.3 流式细胞仪分选肿瘤组织CD11b~+ Ly6G~+ G-MDSCs | 第34页 |
2.2.4 小鼠脾脏中CD4~+ T细胞的分离纯化(阳性选择法) | 第34页 |
2.2.5 LncRNA表达谱芯片的检测与分析 | 第34页 |
2.2.6 G-MDSCs中lncRNA Pvt1及c-myc mRNA表达水平的检测 | 第34-37页 |
2.2.7 G-MDSCs转染特异性si-Pvt1后转染效率的检测 | 第37-38页 |
2.2.8 G-MDSCs转染特异性si-Pvt1后c-myc表达水平的检测 | 第38-39页 |
2.2.9 G-MDSCs免疫抑制功能的检测 | 第39-40页 |
2.2.10 G-MDSCs转染特异性si-Pvt1后相关效应分子的检测 | 第40-41页 |
2.2.11 体外诱导G-MDSCs | 第41页 |
2.2.12 CFSE检测CD4~+ T细胞增殖情况 | 第41-42页 |
2.2.13 图像与统计学分析 | 第42页 |
2.3 实验结果 | 第42-50页 |
2.3.1 LncRNA Pvt1在小鼠肿瘤来源G-MDSCs中高表达 | 第42-45页 |
2.3.2 C-myc在小鼠肿瘤来源G-MDSCs中高表达 | 第45-46页 |
2.3.3 G-MDSCs转染si-Pvt1后转染效率的验证 | 第46页 |
2.3.4 抑制lncRNA Pvt1可以下调c-myc在G-MDSCs中的表达 | 第46-47页 |
2.3.5 抑制lncRNA Pvt1能够下调G-MDSCs免疫抑制功能和相关效应分子的表达 | 第47-48页 |
2.3.6 体外诱导的G-MDSCs中lncRNA Pvt1表达上调 | 第48-50页 |
2.4 讨论 | 第50-51页 |
第三章 LncRNA Pvt1表达下调的G-MDSCs对Lewis肺癌移植瘤生长的影响 | 第51-59页 |
3.1 实验仪器和材料 | 第51-53页 |
3.1.1 实验动物和细胞株 | 第51页 |
3.1.2 主要实验仪器和耗材 | 第51-52页 |
3.1.3 主要试剂 | 第52-53页 |
3.1.4 主要溶液配制 | 第53页 |
3.2 实验方法 | 第53-55页 |
3.2.1 小鼠Lewis肺癌移植瘤模型的建立 | 第53-54页 |
3.2.2 肿瘤生长的监测 | 第54页 |
3.2.3 FCM检测荷瘤小鼠引流淋巴结、脾脏和肿瘤组织局部Th1和CTL细胞的比例 | 第54-55页 |
3.2.4 图像与统计学分析 | 第55页 |
3.3 实验结果 | 第55-58页 |
3.3.1 LncRNA Pvt1表达下调的G-MDSCs对Lewis肺癌移植瘤生长的影响 | 第55-56页 |
3.3.2 LncRNA Pvt1表达下调的G-MDSCs对荷瘤小鼠体内CTL和Th1的影响 | 第56-58页 |
3.4 讨论 | 第58-59页 |
第四章 HIF-1α调控G-MDSCs中lncRNA Pvt1的表达 | 第59-66页 |
4.1 实验仪器和材料 | 第59-61页 |
4.1.1 实验动物和细胞株 | 第59页 |
4.1.2 主要实验仪器和耗材 | 第59-60页 |
4.1.3 主要试剂 | 第60-61页 |
4.1.4 主要溶液配制 | 第61页 |
4.2 实验方法 | 第61-63页 |
4.2.1 G-MDSCs的缺氧处理 | 第61页 |
4.2.2 G-MDSCs经缺氧处理后HIF-1α表达水平的检测 | 第61-63页 |
4.2.3 G-MDSCs经缺氧处理后lncRNA Pvt1表达水平的检测 | 第63页 |
4.2.4 图像与统计学分析 | 第63页 |
4.3 实验结果 | 第63-65页 |
4.3.1 HIF-1α在肿瘤来源G-MDSCs中高表达 | 第63-64页 |
4.3.2 HIF-1α调控G-MDSCs中lncRNA Pvt1的表达 | 第64-65页 |
4.4 讨论 | 第65-66页 |
第五章 结论、创新点与展望 | 第66-67页 |
5.1 主要结论 | 第66页 |
5.2 创新点 | 第66页 |
5.3 展望 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第74页 |