摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
缩略词表 | 第10-13页 |
前言 | 第13-15页 |
1 材料与方法 | 第15-39页 |
1.1 材料与试剂 | 第15-16页 |
1.2 仪器 | 第16-17页 |
1.3 试剂的配制 | 第17-24页 |
1.4 实验方法 | 第24-39页 |
1.4.1 B16-F10细胞的培养及其他操作 | 第24页 |
1.4.2 获得包装有目的基因的慢病毒颗粒 | 第24-25页 |
1.4.3 慢病毒感染B16-F10细胞及稳定株筛选 | 第25-26页 |
1.4.4 质粒构建 | 第26-29页 |
1.4.5 重组质粒在BL21(DE3)中的表达的验证 | 第29-32页 |
1.4.6 重组蛋白的纯化 | 第32-34页 |
1.4.7 动物实验 | 第34-35页 |
1.4.8 ELISA实验测定小鼠血清抗体滴度 | 第35页 |
1.4.9 小鼠黑色素瘤组织HE及IHC染色 | 第35-36页 |
1.4.10 血细胞流式细胞术检测 | 第36-37页 |
1.4.11 统计学分析 | 第37-39页 |
2 实验结果 | 第39-51页 |
2.1 重组质粒的构建及蛋白表达的验证 | 第39-40页 |
2.1.1 重组质粒的成功构建 | 第39页 |
2.1.2 疫苗蛋白的成功表达 | 第39-40页 |
2.2 疫苗蛋白的纯化 | 第40-43页 |
2.2.1 pN蛋白的纯化 | 第40-41页 |
2.2.2 pb蛋白的纯化 | 第41-42页 |
2.2.3 pNb蛋白的纯化 | 第42-43页 |
2.3 NY-ESO-1表达的B16-F10细胞稳定株建立 | 第43-44页 |
2.4 免疫小鼠后相关血清抗体的产生 | 第44-46页 |
2.4.1 免疫小鼠后其血清NY-ESO-1抗体的滴度 | 第44-45页 |
2.4.2 免疫小鼠后其血清bFGF抗体的滴度 | 第45-46页 |
2.5 肿瘤接种后小鼠的体重变化 | 第46页 |
2.6 不同免疫组小鼠的肿瘤生长抑制 | 第46-48页 |
2.6.1 不同时间点肿瘤大小的情况 | 第46-47页 |
2.6.2 处死小鼠后肿瘤称重 | 第47-48页 |
2.7 各组小鼠肿瘤组织的HE染色及IHC | 第48-49页 |
2.8 不同组小鼠血液的流式细胞术检测 | 第49-51页 |
讨论 | 第51-53页 |
结论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-57页 |
综述 | 第57-69页 |
参考文献 | 第65-69页 |
致谢 | 第69-71页 |
校期间参加学术会议、发表文章及所得荣誉 | 第71-72页 |