| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第1章 绪论 | 第12-21页 |
| 1.1 昆虫G蛋白偶联受体研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2 Latrophilin的研究现状 | 第13-18页 |
| 1.2.1 LPH的发现 | 第13-14页 |
| 1.2.2 LPH的结构 | 第14页 |
| 1.2.3 LPH表达模式的研究 | 第14-15页 |
| 1.2.4 LPH配体的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.2.5 LPH生物学功能 | 第17-18页 |
| 1.3 转录组学在昆虫研究中的应用 | 第18-20页 |
| 1.3.1 转录组学的概念 | 第18页 |
| 1.3.2 RNA-seq技术的原理及技术流程 | 第18-19页 |
| 1.3.3 转录组学的优势 | 第19页 |
| 1.3.4 RNA-seq的应用 | 第19-20页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第2章 赤拟谷盗蛛毒素受体LPH的鉴定及功能分析 | 第21-48页 |
| 2.1 实验材料与方法 | 第21-35页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第21页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.4 LPH的鉴定及进化分析 | 第22页 |
| 2.1.5 引物设计 | 第22-23页 |
| 2.1.6 提取总RNA | 第23-24页 |
| 2.1.7 逆转录合成cDNA | 第24页 |
| 2.1.8 lph全长cDNA克隆 | 第24-28页 |
| 2.1.9 lph不同发育时期、组织表达模式分析 | 第28-29页 |
| 2.1.10 dsRNA合成 | 第29-31页 |
| 2.1.11 dsRNA的注射 | 第31-33页 |
| 2.1.12 赤拟谷盗产卵量和孵化率统计 | 第33页 |
| 2.1.13 赤拟谷盗成虫组织的解剖和拍照 | 第33页 |
| 2.1.14 lph下游的基因检测 | 第33-34页 |
| 2.1.15 数据处理 | 第34-35页 |
| 2.3 结果与分析 | 第35-45页 |
| 2.3.1 赤拟谷盗LPH的鉴定 | 第35-37页 |
| 2.3.2 LPH系统发育及同线性分析 | 第37-42页 |
| 2.3.3 赤拟谷盗lph基因的时空表达模式 | 第42页 |
| 2.3.4 RNAi表型分析 | 第42-44页 |
| 2.3.5 赤拟谷盗lph信号转导通路的分析 | 第44-45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-48页 |
| 第3章 lph通过ACh通路调控赤拟谷盗药物敏感性 | 第48-67页 |
| 3.1 引言 | 第48页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第48-61页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第48页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第48-49页 |
| 3.2.3 实验药品与试剂 | 第49页 |
| 3.2.4 总RNA提取 | 第49-50页 |
| 3.2.5 逆转录合成cDNA | 第50-51页 |
| 3.2.6 组织表达模式分析 | 第51-53页 |
| 3.2.7 dsRNA合成 | 第53-55页 |
| 3.2.8 dsRNA的注射 | 第55-56页 |
| 3.2.9 药物敏感性检测 | 第56-57页 |
| 3.2.10 ChAT、AChE和ACh含量检测 | 第57-60页 |
| 3.2.11 数据处理 | 第60-61页 |
| 3.3 结果与分析 | 第61-65页 |
| 3.3.1 赤拟谷盗lph基因的幼虫组织表达模式 | 第61页 |
| 3.3.2 RNA干扰lph增加赤拟谷盗对杀虫剂的敏感性 | 第61-62页 |
| 3.3.3 杀虫剂诱导lph基因表达 | 第62-63页 |
| 3.3.4 敲减lph分别抑制和促进chat及ace-1表达 | 第63-64页 |
| 3.3.5 干扰lph分别降低和增加ChAT及AChE的酶活水平 | 第64-65页 |
| 3.3.6 敲减lph降低ACh含量 | 第65页 |
| 3.4 讨论 | 第65-67页 |
| 第4章 赤拟谷盗lph基因调控信号通路探究 | 第67-90页 |
| 4.1 引言 | 第67页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第67-73页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第67页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第67页 |
| 4.2.3 实验试剂 | 第67-68页 |
| 4.2.4 RNAi | 第68页 |
| 4.2.5 总RNA提取和Illumina测序 | 第68页 |
| 4.2.6 数据质控分析 | 第68-70页 |
| 4.2.7 Reads在参考基因组和注释基因上的分布分析 | 第70-71页 |
| 4.2.8 基因表达量分析和差异基因表达分析 | 第71页 |
| 4.2.9 GO (Gene Ontology)功能显著性富集分析 | 第71-72页 |
| 4.2.10 Pathway显著性富集分析 | 第72页 |
| 4.2.11 qRT-PCR验证测序数据 | 第72-73页 |
| 4.3 结果与分析 | 第73-85页 |
| 4.3.1 Illumina测序结果比对到赤拟谷盗基因组 | 第73-74页 |
| 4.3.2 基因表达量分析 | 第74-77页 |
| 4.3.3 注释所有检测到的基因 | 第77-79页 |
| 4.3.4 DEGs的鉴定 | 第79-80页 |
| 4.3.5 DEGs的功能分析 | 第80-85页 |
| 4.4 讨论 | 第85-90页 |
| 第5章 lph调控est4和est6参与赤拟谷盗药物敏感性和生殖过程 | 第90-109页 |
| 5.1 引言 | 第90-91页 |
| 5.2 实验材料与方法 | 第91-100页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第91页 |
| 5.2.2 实验仪器 | 第91页 |
| 5.2.3 实验药品与试剂 | 第91-92页 |
| 5.2.4 总RNA提取 | 第92页 |
| 5.2.5 逆转录合成cDNA | 第92-94页 |
| 5.2.6 ests不同发育时期、组织表达模式分析 | 第94-96页 |
| 5.2.7 dsRNA合成 | 第96-98页 |
| 5.2.8 dsRNA的注射 | 第98-99页 |
| 5.2.9 赤拟谷盗产卵量和孵化率统计 | 第99页 |
| 5.2.10 药物敏感性检测 | 第99-100页 |
| 5.2.11 赤拟谷盗成虫组织的解剖和拍照 | 第100页 |
| 5.2.12 数据处理 | 第100页 |
| 5.3 结果与分析 | 第100-105页 |
| 5.3.1 赤拟谷盗lph下游基因est4和est6的时空表达模式 | 第100-101页 |
| 5.3.2 杀虫剂处理对诱导est4和est6表达 | 第101页 |
| 5.3.3 敲减est4和est6增加杀虫剂敏感性 | 第101-103页 |
| 5.3.4 杀虫剂处理dslph昆虫分别促进和抑制est4和est6的表达 | 第103页 |
| 5.3.5 lph分别正调控和负调控est4和est6的表达 | 第103-104页 |
| 5.3.6 RNA干扰est6和lph基因降低雌虫的产卵量和卵的孵化率 | 第104-105页 |
| 5.3.7 敲低est6和lph基因影响卵巢发育和卵的尺寸 | 第105页 |
| 5.4 讨论 | 第105-109页 |
| 第6章 总结 | 第109-111页 |
| 6.1 研究主要结论 | 第109-110页 |
| 6.2 论文主要创新点 | 第110页 |
| 6.3 论文不足之处 | 第110-111页 |
| 参考文献 | 第111-123页 |
| 在读期间已/待发表的学术论文及研究成果 | 第123-124页 |
| 致谢 | 第124页 |
