摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 序言 | 第10-17页 |
1.1 研究背景 | 第10-15页 |
1.1.1 基因治疗 | 第10页 |
1.1.2 基因传递载体 | 第10-13页 |
1.1.3 PAMAM的特性及改性 | 第13-14页 |
1.1.4 透明质酸(HA)的特性 | 第14-15页 |
1.2 本研究的目的、意义、内容 | 第15-17页 |
第二章 聚酰胺-胺树脂-透明质酸的合成和结构表征 | 第17-21页 |
2.1 材料与仪器 | 第17页 |
2.1.1 材料 | 第17页 |
2.2 实验方法 | 第17-18页 |
2.2.1 PAMAM-HA聚合物的合成 | 第17页 |
2.2.2 聚合物的表征 | 第17-18页 |
2.3 结果与讨论 | 第18-20页 |
2.3.1 聚合物的合成 | 第18-19页 |
2.3.2 聚合物的表征 | 第19-20页 |
2.4 本章小结 | 第20-21页 |
第三章 PAMAM-HA/DNA复合物的制备及其理化性能研究 | 第21-31页 |
3.1 材料与仪器 | 第21-22页 |
3.1.1 材料 | 第21-22页 |
3.2 实验方法 | 第22-24页 |
3.2.1 质粒pEGFP-C1的大量制备 | 第22-23页 |
3.2.2 聚合物/DNA复合物的配制 | 第23页 |
3.2.3 聚合物/DNA复合物的凝胶阻滞实验 | 第23页 |
3.2.4 聚合物/DNA复合物粒径和电位的测定 | 第23-24页 |
3.2.5 透射电镜观察复合物形态 | 第24页 |
3.3 结果与讨论 | 第24-30页 |
3.3.1 聚合物与DNA的结合能力 | 第24-26页 |
3.3.2 复合物的粒径、电位和形态 | 第26-30页 |
3.4 本章小结 | 第30-31页 |
第四章 PAMAM-HA聚合物细胞毒性研究 | 第31-38页 |
4.1 材料与仪器 | 第31页 |
4.1.1 材料 | 第31页 |
4.1.2 仪器 | 第31页 |
4.2 实验方法 | 第31-33页 |
4.2.1 细胞培养 | 第31页 |
4.2.2 聚合物在不同细胞系中细胞毒性 | 第31-32页 |
4.2.3 聚合物不同作用时间的细胞毒性 | 第32页 |
4.2.4 聚合物/DNA复合物的细胞毒性 | 第32-33页 |
4.3 结果与讨论 | 第33-37页 |
4.3.1 聚合物在不同细胞系中细胞毒性 | 第33-36页 |
4.3.2 聚合物不同作用时间的细胞毒性 | 第36-37页 |
4.3.3 聚合物/DNA复合物的细胞毒性 | 第37页 |
4.4 本章小结 | 第37-38页 |
第五章 PAMAM-HA聚合物诱导细胞凋亡研究 | 第38-43页 |
5.1 材料与仪器 | 第38页 |
5.1.1 材料 | 第38页 |
5.1.2 仪器 | 第38页 |
5.2 实验方法 | 第38-40页 |
5.2.1 细胞培养 | 第38页 |
5.2.2 Annexin V-FITC细胞凋亡法考察聚合物诱导细胞凋亡 | 第38-39页 |
5.2.3 DNA Ladder实验 | 第39-40页 |
5.3 结果与讨论 | 第40-42页 |
5.4 本章小结 | 第42-43页 |
第六章 PAMAM-HA聚合物体外细胞转染系列研究 | 第43-52页 |
6.1 材料与仪器 | 第43页 |
6.1.1 材料 | 第43页 |
6.2 实验方法 | 第43-45页 |
6.2.1 质粒pEGFP-C1的大量制备 | 第43页 |
6.2.2 细胞培养 | 第43-44页 |
6.2.3 不同W/W对转染效率的影响 | 第44页 |
6.2.4 不同细胞类型对转染效率的影响 | 第44-45页 |
6.2.5 血清对转染效率的影响 | 第45页 |
6.3 结果与讨论 | 第45-51页 |
6.3.1 不同W/W对转染效率的影响 | 第45-48页 |
6.3.2 不同细胞类型对转染效率的影响 | 第48-50页 |
6.3.3 血清对转染效率的影响 | 第50-51页 |
6.4 本章小结 | 第51-52页 |
第七章 聚合物/DNA复合物体外转染途经研究 | 第52-59页 |
7.1 材料与仪器 | 第52页 |
7.1.1 材料 | 第52页 |
7.1.2 仪器 | 第52页 |
7.2 实验方法 | 第52-54页 |
7.2.1 质粒pEGFP-C1的大量制备 | 第52-53页 |
7.2.2 质粒的荧光标记 | 第53页 |
7.2.3 细胞培养 | 第53页 |
7.2.4 细胞摄取抑制剂对载体转染效率的影响 | 第53-54页 |
7.2.5 激光共聚焦显微镜观察聚合物/DNA复合物在细胞内的分布 | 第54页 |
7.3 结果与讨论 | 第54-58页 |
7.3.1 细胞摄取抑制剂对载体转染效率的影响 | 第54-56页 |
7.3.2 激光共聚焦显微镜观察聚合物/DNA复合物在细胞内的分布 | 第56-58页 |
7.4 本章小结 | 第58-59页 |
结论 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-65页 |
致谢 | 第65页 |