| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 引言 | 第12-21页 |
| 1.1 TCE毒性 | 第13-16页 |
| 1.1.1 TCE代谢 | 第13-15页 |
| 1.1.2 TCE的毒作用研究 | 第15-16页 |
| 1.2 SET蛋白 | 第16-18页 |
| 1.3 表观遗传学研究 | 第18-19页 |
| 1.4 本课题组前期研究基础 | 第19页 |
| 1.5 本课题研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 1.6 研究内容 | 第20-21页 |
| 1.6.1 miRNA对SET靶向调控机制及其在TCE致肝细胞凋亡中的作用 | 第20页 |
| 1.6.2 SET通过介导H3K79me2调控p53在TCE致肝细胞DNA损伤中的作用 | 第20-21页 |
| 第二章 miRNA对SET的调控机制及其在TCE致肝细胞毒性中的作用 | 第21-42页 |
| 2.1 前言 | 第21-22页 |
| 2.2 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.2.1 细胞株及受试物 | 第22页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-35页 |
| 2.3.1 细胞培养基和溶液配置 | 第24-26页 |
| 2.3.2 细胞培养与TCE处理 | 第26页 |
| 2.3.3 双荧光素酶报告系统实验 | 第26-29页 |
| 2.3.4 Western blot检测 | 第29-33页 |
| 2.3.5 细胞凋亡检测 | 第33-34页 |
| 2.3.6 数据统计分析 | 第34-35页 |
| 2.4 实验结果 | 第35-38页 |
| 2.4.1 miR-199b-5p通过结合SET-3’ UTR抑制SET表达 | 第35-37页 |
| 2.4.2 miR-199b-5p在TCE致肝细胞凋亡中的作用 | 第37-38页 |
| 2.5 讨论 | 第38-41页 |
| 2.6 本章小结 | 第41-42页 |
| 第三章 SET通过介导H3K79me2调控p53在TCE致肝细胞DNA损伤中的作用 | 第42-67页 |
| 3.1 前言 | 第42-43页 |
| 3.2 实验材料 | 第43-46页 |
| 3.2.1 细胞株与染毒物质 | 第43-44页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第44-45页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第45-46页 |
| 3.2.4 溶液配置 | 第46页 |
| 3.3 实验方法 | 第46-55页 |
| 3.3.1 细胞培养与TCE染毒处理 | 第46-47页 |
| 3.3.2 染色质免疫共沉淀 | 第47-50页 |
| 3.3.3 脂质体转染 | 第50-51页 |
| 3.3.4 Western blot | 第51页 |
| 3.3.5 构建p53缺陷L-02细胞 | 第51-54页 |
| 3.3.6 单细胞凝胶电泳 | 第54-55页 |
| 3.3.7 数据统计分析 | 第55页 |
| 3.4 实验结果 | 第55-64页 |
| 3.4.1 染色质免疫共沉淀条件 | 第55-56页 |
| 3.4.2 p53基因启动子区H3K79me2修饰水平 | 第56-58页 |
| 3.4.3 组蛋白修饰H3K79me2对p53的表观遗传调控作用 | 第58-60页 |
| 3.4.4 成功构建p53缺陷L-02细胞 | 第60-62页 |
| 3.4.5 p53表达降低对TCE致肝细胞DNA损伤的影响 | 第62-64页 |
| 3.5 讨论 | 第64-66页 |
| 3.6 本章小结 | 第66-67页 |
| 第四章 结论与展望 | 第67-68页 |
| 4.1 结论 | 第67页 |
| 4.2 展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 附录一 英文缩略词表 | 第76-77页 |
| 附录二 双荧光素酶报告系统相关序列 | 第77-79页 |
| 攻读硕士学位期间取得的成果 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
