| 内容摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第9-25页 |
| 1.1 引言 | 第9页 |
| 1.2 植物细胞壁组成 | 第9-11页 |
| 1.2.1 植物细胞壁化学成分 | 第9-10页 |
| 1.2.2 木聚糖结构 | 第10-11页 |
| 1.2.3 纤维素结构 | 第11页 |
| 1.3 糖苷水解酶概述 | 第11-14页 |
| 1.3.1 糖苷水解酶分类 | 第11-12页 |
| 1.3.2 糖苷水解酶催化机制 | 第12-13页 |
| 1.3.3 糖苷水解酶应用 | 第13-14页 |
| 1.4 纤维素酶、木聚糖酶研究概述 | 第14-19页 |
| 1.4.1 纤维素酶分类 | 第14-15页 |
| 1.4.2 木聚糖酶分类 | 第15页 |
| 1.4.3 纤维素、木聚糖降解模式研究 | 第15-18页 |
| 1.4.3.1 纤维素降解机制 | 第16-17页 |
| 1.4.3.2 木聚糖降解机制 | 第17-18页 |
| 1.4.4 GH10家族木聚糖酶研究概述 | 第18-19页 |
| 1.4.5 糖苷水解酶协同效应的研究 | 第19页 |
| 1.5 Caldicellulosiruptor bescii研究进展 | 第19-24页 |
| 1.5.1 Caldicellulosiruptor bescii概述 | 第19-20页 |
| 1.5.2 C.bescii中糖苷水解酶研究 | 第20-23页 |
| 1.5.2.1 C.bescii纤维素酶 | 第20-22页 |
| 1.5.2.2 C.bescii木聚糖酶 | 第22-23页 |
| 1.5.3 Ce1A催化机制研究 | 第23-24页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 活性位点附近非催化残基在GH10家族木聚糖酶中的作用研究 | 第25-45页 |
| 2.1 前言 | 第25页 |
| 2.2 材料与方法 | 第25-29页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.2.1.1 菌株、培养基 | 第25页 |
| 2.2.1.2 仪器及生化试剂 | 第25-26页 |
| 2.2.1.3 引物的合成与测序 | 第26页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第26-29页 |
| 2.2.2.1 CbXyn10C点突变体的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.2.2 CbXyn10C重组蛋白的表达与纯化 | 第27页 |
| 2.2.2.3 CbXyn10C酶活的检测 | 第27页 |
| 2.2.2.4 CbXyn10C动力学参数的测定 | 第27页 |
| 2.2.2.5 CbXyn10C对寡糖催化效率的检测 | 第27-28页 |
| 2.2.2.6 ITC检测 | 第28页 |
| 2.2.2.7 圆二色谱检测 | 第28页 |
| 2.2.2.8 CbXyn10C与纤维七糖的分子对接 | 第28页 |
| 2.2.2.9 蛋白结晶、数据收集和结构解析 | 第28-29页 |
| 2.2.2.10 动力学模拟 | 第29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-42页 |
| 2.3.0 等温滴定量热仪(ITC)分析 | 第29-32页 |
| 2.3.1 野生型CbXyn10C的晶体结构 | 第32-33页 |
| 2.3.2 无活性突变体E140Q/E248Q与木七糖的复合物结构 | 第33-34页 |
| 2.3.3 无活性突变体E140Q/E248Q与纤维寡糖的复合物结构 | 第34-35页 |
| 2.3.4 CbXyn10C与纤维七糖结合的分子动力学模拟 | 第35-36页 |
| 2.3.5 CbXyn10C结合口袋中氨基酸残基对水解木聚糖、纤维素的影响 | 第36-40页 |
| 2.3.6 突变远端氨基酸残基对水解木聚糖、纤维素的影响 | 第40-41页 |
| 2.3.7 突变体的动力学分析 | 第41-42页 |
| 2.4 讨论 | 第42-45页 |
| 第三章 全酶CbXyn10C/Ce148B的N端和C端协同效应的研究 | 第45-56页 |
| 3.1 前言 | 第45页 |
| 3.2 材料与方法 | 第45-47页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第45页 |
| 3.2.1.1 菌株、培养基 | 第45页 |
| 3.2.1.2 仪器及生化试剂 | 第45页 |
| 3.2.1.3 引物的合成与测序 | 第45页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第45-47页 |
| 3.2.2.1 GH10-CBM、CBM-GH48和GH10-CBM-GH48蛋白的表达和纯化 | 第45-46页 |
| 3.2.2.2 CBD-GST的表达和纯化 | 第46页 |
| 3.2.2.3 酶活分析 | 第46页 |
| 3.2.2.4 水解产物的分析 | 第46-47页 |
| 3.2.2.5 免疫荧光显微镜检测 | 第47页 |
| 3.3 结果与分析 | 第47-54页 |
| 3.3.1 GH10-CBM,CBM-GH48和GH10-CBM-GH48的克隆、表达和纯化 | 第47-48页 |
| 3.3.2 GH10-CBM和CBM-GH48对纤维素的协同效应 | 第48-49页 |
| 3.3.3 GH10-CBM和CBM-GH48对木聚糖的协同作用检测 | 第49-51页 |
| 3.3.4 GH10-CBM和CBM-GH48对玉米秸秆的协同效应 | 第51-52页 |
| 3.3.5 免疫荧光显微镜检测 | 第52-53页 |
| 3.3.6 GH10-CBM-GH48降解纤维素的机制初探 | 第53-54页 |
| 3.3.7 GH10-CBM和CBM-GH48协同降解纤维素的机制示意图 | 第54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-56页 |
| 第四章 结论和展望 | 第56-58页 |
| 4.1 全文结论 | 第56页 |
| 4.2 展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 致谢 | 第65-67页 |
| 个人简历 | 第67-68页 |
| 附表 | 第68-69页 |
