中文摘要 | 第4-8页 |
abstract | 第8-12页 |
主要英文缩写词表 | 第17-19页 |
第1章 引言 | 第19-21页 |
第2章 综述 | 第21-37页 |
2.1 丙泊酚的非麻醉活性 | 第22-27页 |
2.1.1 丙泊酚的抗癌活性 | 第22-24页 |
2.1.2 丙泊酚的神经保护作用 | 第24-25页 |
2.1.3 丙泊酚对癫痫持续状态的作用 | 第25页 |
2.1.4 丙泊酚对免疫调节的作用 | 第25页 |
2.1.5 丙泊酚对血小板聚集的作用 | 第25-26页 |
2.1.6 丙泊酚对器官的保护作用 | 第26页 |
2.1.7 丙泊酚对疼痛的作用 | 第26页 |
2.1.8 丙泊酚的遗忘效应 | 第26页 |
2.1.9 丙泊酚的减少呕吐的作用 | 第26页 |
2.1.10 丙泊酚对自噬的作用 | 第26-27页 |
2.2 自噬 | 第27-37页 |
2.2.1 自噬的概述 | 第27-29页 |
2.2.2 自噬的调控机制 | 第29-30页 |
2.2.3 自噬与活性氧簇 | 第30-32页 |
2.2.4 自噬与内质网应激 | 第32-37页 |
第3章 实验研究 | 第37-93页 |
实验一 丙泊酚对C2C12(小鼠成肌细胞)自噬的影响的研究 | 第37-71页 |
1 材料方法 | 第37-42页 |
1.1 细胞株 | 第37页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第37-40页 |
1.2.1 实验材料和试剂 | 第37-39页 |
1.2.2 主要仪器 | 第39-40页 |
1.3 液体试剂的配制 | 第40-42页 |
2 实验步骤 | 第42-55页 |
2.1 C2C12细胞株的培养、冻存、复苏和传代 | 第42-43页 |
2.1.1 细胞培养 | 第42页 |
2.1.2 细胞复苏 | 第42页 |
2.1.3 细胞传代 | 第42-43页 |
2.1.4 细胞冻存 | 第43页 |
2.2 丙泊酚处理后细胞活性测定实验 | 第43-46页 |
2.2.1 细胞活性测定实验-CCK8法(cellcountingkit-8) | 第43-44页 |
2.2.2 丙泊酚处理后的凋亡实验 | 第44页 |
2.2.3 丙泊酚处理后的活性氧簇(ROS)检测 | 第44-46页 |
2.3 自噬相关蛋白表达的检测 | 第46-54页 |
2.3.1 实时定量PCR | 第46-49页 |
2.3.2 westernblot检测自噬相关蛋白表达情况 | 第49-53页 |
2.3.3 免疫荧光法检测自噬相关蛋白表达量 | 第53-54页 |
2.4 自噬抑制剂对丙泊酚促进自噬的作用 | 第54-55页 |
2.4.1 实验分组 | 第54页 |
2.4.2 Westernblot方法检测自噬相关蛋白LC3、p62 | 第54-55页 |
2.4.3 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第55页 |
2.5 统计学分析 | 第55页 |
3 结果 | 第55-67页 |
3.1 丙泊酚对细胞增殖及凋亡的影响 | 第55-58页 |
3.2 不同浓度丙泊酚对分化后的小鼠成肌细胞株C2C12细胞自噬的影响 | 第58-65页 |
3.3 自噬抑制剂氯喹二磷酸(CQ)对丙泊酚促进自噬的影响. | 第65-67页 |
4 讨论 | 第67-71页 |
实验二 丙泊酚促进C2C12(小鼠成肌细胞)自噬机制的研究 | 第71-93页 |
1 材料方法 | 第71页 |
2 实验步骤 | 第71-76页 |
2.1 C2C12细胞株的培养、冻存、复苏和传代 | 第71-72页 |
2.1.1 细胞培养 | 第71页 |
2.1.2 细胞复苏 | 第71页 |
2.1.3 细胞传代 | 第71-72页 |
2.1.4 细胞冻存 | 第72页 |
2.2 丙泊酚促进自噬的信号通路相关蛋白表达的研究 | 第72-73页 |
2.2.1 蛋白收集 | 第72页 |
2.2.2 蛋白定量 | 第72-73页 |
2.2.3 蛋白免疫印迹法 | 第73页 |
2.3 抑制内质网应激对丙泊酚促进自噬的影响的研究 | 第73-76页 |
2.3.1 westernblot检测内质网应激相关蛋白BipCHOP的表达 | 第73-74页 |
2.3.2 H2-DCFDA检测细胞内活性氧簇(ROS)水平 | 第74-75页 |
2.3.3 丙泊酚对细胞内钙离子的影响及其机制的研究 | 第75-76页 |
2.4 抑制活性氧簇(ROS)对丙泊酚促进自噬的作用的影响 | 第76页 |
2.4.1 实验分组 | 第76页 |
2.4.2 H2-DCFDA检测细胞内活性氧簇(ROS)水平 | 第76页 |
2.4.3 westernblot检测自噬相关蛋白 | 第76页 |
3 结果 | 第76-90页 |
3.1 丙泊酚通过AMPK-MTOR通路激活自噬 | 第76-78页 |
3.2 内质网应激抑制剂TUDCA对丙泊酚诱导的自噬的相关蛋白表达的影响 | 第78-79页 |
3.3 内质网应激抑制剂和自噬抑制剂对丙泊酚处理后细胞内的ROS的影响 | 第79-82页 |
3.4 ROS增加对丙泊酚促进自噬的作用的影响 | 第82-84页 |
3.5 内质网应激抑制剂对丙泊酚调节钙离子水平的影响 | 第84-90页 |
4 讨论 | 第90-93页 |
第4章 结论 | 第93-95页 |
参考文献 | 第95-105页 |
作者简介 | 第105-107页 |
致谢 | 第107页 |