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丙泊酚对小鼠成肌细胞自噬的影响及其机制的研究

中文摘要第4-8页
abstract第8-12页
主要英文缩写词表第17-19页
第1章 引言第19-21页
第2章 综述第21-37页
    2.1 丙泊酚的非麻醉活性第22-27页
        2.1.1 丙泊酚的抗癌活性第22-24页
        2.1.2 丙泊酚的神经保护作用第24-25页
        2.1.3 丙泊酚对癫痫持续状态的作用第25页
        2.1.4 丙泊酚对免疫调节的作用第25页
        2.1.5 丙泊酚对血小板聚集的作用第25-26页
        2.1.6 丙泊酚对器官的保护作用第26页
        2.1.7 丙泊酚对疼痛的作用第26页
        2.1.8 丙泊酚的遗忘效应第26页
        2.1.9 丙泊酚的减少呕吐的作用第26页
        2.1.10 丙泊酚对自噬的作用第26-27页
    2.2 自噬第27-37页
        2.2.1 自噬的概述第27-29页
        2.2.2 自噬的调控机制第29-30页
        2.2.3 自噬与活性氧簇第30-32页
        2.2.4 自噬与内质网应激第32-37页
第3章 实验研究第37-93页
    实验一 丙泊酚对C2C12(小鼠成肌细胞)自噬的影响的研究第37-71页
        1 材料方法第37-42页
            1.1 细胞株第37页
            1.2 主要试剂和仪器第37-40页
                1.2.1 实验材料和试剂第37-39页
                1.2.2 主要仪器第39-40页
            1.3 液体试剂的配制第40-42页
        2 实验步骤第42-55页
            2.1 C2C12细胞株的培养、冻存、复苏和传代第42-43页
                2.1.1 细胞培养第42页
                2.1.2 细胞复苏第42页
                2.1.3 细胞传代第42-43页
                2.1.4 细胞冻存第43页
            2.2 丙泊酚处理后细胞活性测定实验第43-46页
                2.2.1 细胞活性测定实验-CCK8法(cellcountingkit-8)第43-44页
                2.2.2 丙泊酚处理后的凋亡实验第44页
                2.2.3 丙泊酚处理后的活性氧簇(ROS)检测第44-46页
            2.3 自噬相关蛋白表达的检测第46-54页
                2.3.1 实时定量PCR第46-49页
                2.3.2 westernblot检测自噬相关蛋白表达情况第49-53页
                2.3.3 免疫荧光法检测自噬相关蛋白表达量第53-54页
            2.4 自噬抑制剂对丙泊酚促进自噬的作用第54-55页
                2.4.1 实验分组第54页
                2.4.2 Westernblot方法检测自噬相关蛋白LC3、p62第54-55页
                2.4.3 流式细胞术检测细胞凋亡第55页
            2.5 统计学分析第55页
        3 结果第55-67页
            3.1 丙泊酚对细胞增殖及凋亡的影响第55-58页
            3.2 不同浓度丙泊酚对分化后的小鼠成肌细胞株C2C12细胞自噬的影响第58-65页
            3.3 自噬抑制剂氯喹二磷酸(CQ)对丙泊酚促进自噬的影响.第65-67页
        4 讨论第67-71页
    实验二 丙泊酚促进C2C12(小鼠成肌细胞)自噬机制的研究第71-93页
        1 材料方法第71页
        2 实验步骤第71-76页
            2.1 C2C12细胞株的培养、冻存、复苏和传代第71-72页
                2.1.1 细胞培养第71页
                2.1.2 细胞复苏第71页
                2.1.3 细胞传代第71-72页
                2.1.4 细胞冻存第72页
            2.2 丙泊酚促进自噬的信号通路相关蛋白表达的研究第72-73页
                2.2.1 蛋白收集第72页
                2.2.2 蛋白定量第72-73页
                2.2.3 蛋白免疫印迹法第73页
            2.3 抑制内质网应激对丙泊酚促进自噬的影响的研究第73-76页
                2.3.1 westernblot检测内质网应激相关蛋白BipCHOP的表达第73-74页
                2.3.2 H2-DCFDA检测细胞内活性氧簇(ROS)水平第74-75页
                2.3.3 丙泊酚对细胞内钙离子的影响及其机制的研究第75-76页
            2.4 抑制活性氧簇(ROS)对丙泊酚促进自噬的作用的影响第76页
                2.4.1 实验分组第76页
                2.4.2 H2-DCFDA检测细胞内活性氧簇(ROS)水平第76页
                2.4.3 westernblot检测自噬相关蛋白第76页
        3 结果第76-90页
            3.1 丙泊酚通过AMPK-MTOR通路激活自噬第76-78页
            3.2 内质网应激抑制剂TUDCA对丙泊酚诱导的自噬的相关蛋白表达的影响第78-79页
            3.3 内质网应激抑制剂和自噬抑制剂对丙泊酚处理后细胞内的ROS的影响第79-82页
            3.4 ROS增加对丙泊酚促进自噬的作用的影响第82-84页
            3.5 内质网应激抑制剂对丙泊酚调节钙离子水平的影响第84-90页
        4 讨论第90-93页
第4章 结论第93-95页
参考文献第95-105页
作者简介第105-107页
致谢第107页

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