| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第8-15页 |
| 1.1 1,2,4-丁三醇研究概况 | 第8-11页 |
| 1.1.1 1,2,4-丁三醇性质及应用 | 第8页 |
| 1.1.2 化学法合成1,2,4-丁三醇 | 第8页 |
| 1.1.3 生物法合成1,2,4-丁三醇 | 第8-9页 |
| 1.1.4 1,2,4-丁三醇合成途径的代谢改造 | 第9-11页 |
| 1.2 反义RNA技术及其应用 | 第11页 |
| 1.3 混合碳源共底物发酵 | 第11-12页 |
| 1.4 本课题的立题意义与研究内容 | 第12-15页 |
| 1.4.1 立题意义 | 第12-13页 |
| 1.4.2 主要研究内容 | 第13-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-17页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第15-16页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第16页 |
| 2.1.3 培养基 | 第16-17页 |
| 2.1.4 主要实验仪器 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-24页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第17-19页 |
| 2.2.2 培养方法 | 第19页 |
| 2.2.3 检测方法 | 第19页 |
| 2.2.4 细菌基因组DNA提取 | 第19页 |
| 2.2.5 大肠杆菌化转感受态制备 | 第19-20页 |
| 2.2.6 大肠杆菌感受态细胞的化转 | 第20页 |
| 2.2.7 PCR扩增目的片段 | 第20页 |
| 2.2.8 DNA纯化 | 第20页 |
| 2.2.9 质粒的提取 | 第20-21页 |
| 2.2.10 DNA的酶切与连接 | 第21页 |
| 2.2.11 大肠杆菌基因敲除方法 | 第21页 |
| 2.2.12 蛋白表达分析 | 第21-22页 |
| 2.2.13 细菌总RNA提取 | 第22页 |
| 2.2.14 基因组DNA去除方法 | 第22页 |
| 2.2.15 逆转录合成cDNA | 第22页 |
| 2.2.16 qRT-PCR | 第22-24页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第24-44页 |
| 3.1 1,2,4-丁三醇合成途径高效脱羧酶筛选 | 第24-29页 |
| 3.1.1 ipdC、kivD脱羧酶基因克隆及表达载体构建 | 第24-26页 |
| 3.1.2 脱羧酶生物信息学分析及蛋白表达水平检测 | 第26-28页 |
| 3.1.3 过表达不同脱羧酶重组大肠杆菌发酵合成BT能力比较 | 第28-29页 |
| 3.2 木糖分支途径调控及葡萄糖效应弱化对丁三醇合成影响 | 第29-38页 |
| 3.2.1 反义RNA表达系统构建 | 第30-32页 |
| 3.2.2 反义RNA对木糖异构酶XylA转录水平抑制分析 | 第32-33页 |
| 3.2.3 反义RNA调控对丁三醇合成影响 | 第33-34页 |
| 3.2.4 葡萄糖效应弱化缺失菌株构建及发酵性能检测 | 第34-36页 |
| 3.2.5 深度弱化葡萄糖效应缺失菌株构建及发酵性能检测 | 第36-38页 |
| 3.3 E.coliKXW3009培养条件优化及利用蔗渣水解液发酵合成丁三醇 | 第38-44页 |
| 3.3.1 摇瓶发酵培养基组分优化 | 第38-41页 |
| 3.3.2 5L罐发酵条件优化 | 第41-42页 |
| 3.3.3 蔗渣水解液为底物发酵合成丁三醇 | 第42-44页 |
| 主要结论与展望 | 第44-46页 |
| 主要结论 | 第44页 |
| 展望 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51页 |
